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PCV2 PPV PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用
引用本文:YUE Feng-xiong,崔尚金,RAN Duo-liang,张超范.PCV2 PPV PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国兽医科学,2008,38(8).
作者姓名:YUE Feng-xiong  崔尚金  RAN Duo-liang  张超范
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001
基金项目:国家农业科技成果转化基金,国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:参照GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列,设计了4对引物分别用于扩增PCV2 ORF2、PPV NS1、PRV gB、PRRSV N基因的目的片段.通过对反应因素进行优化,建立了检测PCV2、PPV、PRV、PRRSV的多重PCR(mPCR)诊断方法.敏感性和特异性结果显示,该mPCR对4种病毒的最低核酸检测量分别为29.0 Pg(PCV2)、17.3 pg(PPV)、36.8 pg(PRRSV)、38.4 Pg(PRV),而对猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒1型、牛病毒性腹泻黏膜病病毒、大肠杆菌的扩增结果均为阴性.119份临床样品的多重PCR检测结果显示,有3份样品同时感染PPV和PCV2,68份样品同时感染PRRSV和PCV2,其余样品均为PCV2阳性.表明,建立的多重PCR方法能够对PCV2、PPV、PRV、PRRSV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断.

关 键 词:猪圆环病毒2型  猪细小病毒  猪伪狂犬病病毒  猪生殖与呼吸综合征病毒  多重PCR

Establishment and application of a multiplex PCR assay for simultaneous detection of PCV2, PPV, PRV and PRRSV
YUE Feng-xiong,CUI Shang-jin,RAN Duo-liang,ZHANG Chao-fan.Establishment and application of a multiplex PCR assay for simultaneous detection of PCV2, PPV, PRV and PRRSV[J].Veterinary Science in China,2008,38(8).
Authors:YUE Feng-xiong  CUI Shang-jin  RAN Duo-liang  ZHANG Chao-fan
Abstract:
Keywords:
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