| 大白菜霜霉菌诱导抑制性消减杂交cDNA文库的构建和分析 |
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| 引用本文： | 唐永洽,于拴仓,朱月林,张凤兰,余阳俊,赵岫云,张德双.大白菜霜霉菌诱导抑制性消减杂交cDNA文库的构建和分析[J].植物生理学通讯,2010(5):453-458. |
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| 作者姓名： | 唐永洽 于拴仓 朱月林 张凤兰 余阳俊 赵岫云 张德双 |
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| 作者单位： | [1]南京农业大学园艺学院,南京210095 [2]北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑项目（2009BADB8B00-03）; 大宗蔬菜产业技术体系建设专项资金; 北京市自然科学基金（6102011）; 北京市科技计划项目（Z09090501040902） |
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| 摘 要： | 以抗霜霉病大白菜双单倍体系（DH）‘T12-19’为材料,构建了霜霉病诱导表达的正向抑制性消减文库,并利用反向Northern斑点杂交技术对768个阳性克隆进行了筛选,共获得57个病原菌诱导上调表达的克隆。测序后得到55条通读表达序列标签（ESTs）,对这些ESTs序列进行聚类和拼接分析,共获得50个unigenes。Blast分析表明,37个unigenes与已知基因高度同源,占全部非重复序列的67.3%。对已知功能基因按MIPS的分类方法进行功能分类,发现这些基因的功能主要涉及物质与能量代谢、转录调控、蛋白质合成与代谢、膜及转运、信号转导、抗病防御等。为了验证文库筛选结果的可靠性,采用实时荧光定量PCR技术分析了其中2个克隆BFCH10和BFIA7的表达谱。结果表明,这2个克隆在接种病菌6h后明显上调表达,与反向Northern斑点杂交结果基本一致。
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| 关 键 词： | 大白菜 霜霉病 抑制性消减文库 实时荧光定量PCR |
Construction and Analysis of Suppression Subtractive Hybridization cDNA Library in Chinese Cabbage（Brassica rapa ssp.pekinensis） Leaves Induced by Peronospora parasitica |
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| TANG Yong-Qia,YU Shuan-Cang,ZHU Yue-Lin,ZHANG Feng-Lan,YU Yang-Jun,ZHAO Xiu-Yun,ZHANG De-Shuang.Construction and Analysis of Suppression Subtractive Hybridization cDNA Library in Chinese Cabbage（Brassica rapa ssp.pekinensis） Leaves Induced by Peronospora parasitica[J].Plant Physiology Communications,2010(5):453-458. |
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| Authors: | TANG Yong-Qia YU Shuan-Cang ZHU Yue-Lin ZHANG Feng-Lan YU Yang-Jun ZHAO Xiu-Yun ZHANG De-Shuang |
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| Affiliation: | 1College of Horticulture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;2Biejing Vegetable Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brassica rapa ssp pekinensis downy mildew suppression subtractive hybridization（SSH） realtime PCR |
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