| 赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选 |
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| 引用本文： | 徐晓兰,赖荣才,陈体强,石林春,陈士林.赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选[J].中草药,2020,51(14):3770-3776. |
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| 作者姓名： | 徐晓兰 赖荣才 陈体强 石林春 陈士林 |
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| 作者单位： | 福建农林大学蜂学学院, 福建 福州 350002;福建省农业科学院食用菌研究所, 福建 福州 350014;中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所, 北京 100193;中国中医科学院中药研究所, 北京 100700 |
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| 基金项目： | 国家自然科学青年基金资助项目（81503189）；国家自然科学青年基金资助项目（81303158）；福建省科技厅区域发展项目（2018N3014）；福建省农业科学院创新团队（STIT2017-2-8） |
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| 摘 要： | 目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。
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| 关 键 词： | 赤芝 法尼基焦磷酸合酶 酵母单杂交 转录因子 灵芝三萜 |
| 收稿时间： | 2019/11/3 0:00:00 |
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