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靶向Akt2基因RNA干扰重组表达载体的构建和测序
引用本文:曹婷婷,张茂林,赵国强,卢滨,王静.靶向Akt2基因RNA干扰重组表达载体的构建和测序[J].山东医药,2008,48(28):19-21.
作者姓名:曹婷婷  张茂林  赵国强  卢滨  王静
作者单位:1. 郑州大学第五附属医院,河南郑州,450052
2. 郑州大学
3. 郑州市第五人民医院
4. 郑州大学第一附属医院
基金项目:河南省卫生厅科技攻关课题
摘    要:目的 利用RNA干扰技术,以Akt2为靶基因,设计并构建重组表达载体,并进行测序鉴定.方法 利用GenBank中已知Akt2的mRNA基因序列设计具有短发夹结构的两条寡核甘酸序列,经退火形成互补双链,与pGEM-T Easy载体进行连接,经蓝白筛选后以T7和SP6为引物进行PCR鉴定,对表达载体pRNAT-U6.2及亚克隆产物进行双酶切,将得到的基因及线性化的表达载体再次连接,利用PCR方法进行重组体的筛选鉴定并进行测序分析.结果 将合成的DNA序列克隆到表达载体上,经PCR扩增筛选鉴定和测序鉴定证实为所需序列.结论 Akt2靶向RNA干扰重组表达载体构建成功.

关 键 词:Akt2基因  RNA干扰  重组表达载体

Construction and identification of Akt2 gene siRNA eukaryotic expression vectors
CAO Ting-ting,ZHANG Mao-lin,ZHAO Guo-qiang,LU Bin,WANG Jing.Construction and identification of Akt2 gene siRNA eukaryotic expression vectors[J].Shandong Medical Journal,2008,48(28):19-21.
Authors:CAO Ting-ting  ZHANG Mao-lin  ZHAO Guo-qiang  LU Bin  WANG Jing
Abstract:
Keywords:
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