| 重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定 |
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| 引用本文： | 刘礼初,梁国栋,杜靖远. 重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定[J]. 华中科技大学学报(医学版), 1999, 28(4): 2 |
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| 作者姓名： | 刘礼初 梁国栋 杜靖远 |
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| 作者单位： | ：刘礼初 |
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| 基金项目： | 863 国家高科技生物技术领域基金 |
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| 摘 要： | 构建重组人骨形态发生蛋白－２／７融合体， 研究其在大肠杆菌中的表达及生物学活性。利用ＤＮＡ 重组技术，将编码人骨形态发生蛋白－２ （ＢＭＰ－２） 成熟肽的０．３６ ｋｂ 基因片段与编码人骨形态发生蛋白－７ （ＢＭＰ－７） 成熟肽的０．４４ｋｂ 基因片段连接，得到重组人骨形态发生蛋白－２／７ 融合基因； 经测序鉴定后，将其克隆到表达载体ｐＢＶ２２２中，转化大肠杆菌ＤＨ５α， 温度诱导表达。表达蛋白经初步纯化后测定其对培养小鼠成骨样细胞增殖、分化及碱性磷酸酶活性的影响。克隆质粒转化的工程菌，经４２℃诱导４～６ ｈ 后，高效表达重组人骨形态发生蛋白－２／７， 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一新的蛋白带， 分子量约２９ ｋｕ，约占菌体总蛋白的２０％ ，表达蛋白以包涵体的形式存在，经初步纯化、裂解、复性后的ＢＭＰ－２／７ 蛋白具有促进成骨样细胞分化、增殖及增加碱性磷酸酶活性的作用。ＢＭＰ－２／７ 融合基因的构建和表达，可能提供一种全新的具有诱导成骨作用的蛋白
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| 关 键 词： | 人骨形态发生蛋白-2/7融合基因 构建和表达 成骨样细胞 碱性磷酸酶 |
Construction and Expression of rhBMP 2/7 Fusion Protein in E.coli and Bioassay in Vitro |
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| Liu Lichu ,Liang Guodong ,Du Jingyuan et al. Construction and Expression of rhBMP 2/7 Fusion Protein in E.coli and Bioassay in Vitro[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences), 1999, 28(4): 2 |
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| Authors: | Liu Lichu Liang Guodong Du Jingyuan et al |
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| Affiliation: | Liu Lichu 1,Liang Guodong 2,Du Jingyuan 1 et al 1 Department of Orthopedics,Xiehe Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430022 2 National Laboratory of Molecular Virology and Genetic Engineering,Beijing 100052 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rhBMP 2/7 fusion gene construction and expression osteoblast alkaline phosphatase |
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