IFN-γ基因修饰的肿瘤细胞来源exosomes的抗肿瘤效应

目的]探讨IFN-γ基因修饰的肿瘤细胞来源的exosomes体内抗肿瘤效应。方法]通过密度梯度离心和蔗糖密度梯度法分离纯化E．G7-OVA肿瘤细胞分泌的exosomes。用表达小鼠IFN-γ基因的腺病毒载体AdIFN-γ和对照载体AdLacZ感染E．G7-OVA肿瘤细胞。将AdIFN-γ基因修饰的E．G7-OVA细胞来源的exosomes命名为Exo／IFN-γ，AdLacZ感染E．G7．OVA细胞及E．G7-OVA细胞来源的exosomes分别命名为Exo／LacZ和Exo。用这些exosomes免疫小鼠．观察其抗肿瘤效应．并探讨其作用机制。结果]电镜下exosomes为双层膜结构，呈特征性的“盘状”结构，直径在40～100nm之间。通过Western印迹，在制备的Exo／IFN-γ中检测到IFN-γ，而在Exo／LacZ未检测到IFN-γ。与对照组PBS相比，用Exo、Exo／LacZ免疫小鼠分别能导致20％和30％小鼠90d无瘤（P=0．0008），而用Exo／IFN-γ免疫小鼠则能导致60％小鼠90d无瘤（P=0．0001）；CTL表明，Exo／IFN-γ免疫诱导的CTL活性明显高于Exo和Exo／LacZ（P=0．0083）。结论]INF-γ基因转染的E．G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes含有IFN-γ，且Exo／IFN-γ具有比常规exosomes更显著的抗肿瘤效应。