不同方法提取和处理中华绒螯蟹组织蛋白的过敏原组分分析 |
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引用本文: | 朱黎娜,侯丽英,张盈莹,周宇捷,李韶深,李会强.不同方法提取和处理中华绒螯蟹组织蛋白的过敏原组分分析[J].中国免疫学杂志,2014(12):1652-1657. |
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作者姓名: | 朱黎娜 侯丽英 张盈莹 周宇捷 李韶深 李会强 |
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作者单位: | 天津医科大学医学检验学院;天津市中医药研究院附属医院 |
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摘 要: | 目的:分析不同方法提取和处理中华绒螯蟹组织的蛋白组分及过敏原组分,为检测中华绒螯蟹特异性IgE提供最佳抗原制备方法。方法:分别采用PBS提取法、丙酮抽提法和裂解液提取法提取中华绒螯蟹组织蛋白,并用裂解液提取法分别提取加热前、后的蟹蛋白;采用SDS-PAGE和双向电泳分析蛋白组分,采用Western blot分析过敏原组分。结果:不同方法提取的蛋白组分、sIgE与蛋白结合的强度和所识别的蛋白组分存在一定差异。PBS提取液蛋白主要分布在94、85、76、66、18kD,丙酮提取液蛋白主要分布在94、85、76、36 kD,裂解液提取液蛋白主要分布在200、125、51、43、38 kD。PBS提取液与sIgE结合的阳性反应条带主要分布在76、66、53、43、38、18 kD;丙酮提取液主要分布在94、76、66、50、43、38、18 kD;裂解液提取液主要分布在200、105、94、76、43、38、18 kD。加热前、后蟹蛋白过敏原组分差别不大。结论:裂解液提取法提取的中华绒螯蟹过敏原更适于制备测定特异性IgE的抗原。加热不影响蟹过敏原组分和与特异性IgE的结合活性。
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关 键 词: | 中华绒螯蟹 食物过敏 过敏原制备 加热 免疫活性 |
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