紫檀芪对中波紫外线照射的HaCaT细胞抗氧化物酶表达及活性的影响

目的 探讨紫檀芪对HaCaT细胞急性中波紫外线（UVB）损伤的防御作用及相关机制。方法 MTS法和流式细胞仪检测不同浓度紫檀芪作用后HaCaT细胞增殖活性及凋亡与坏死率，筛选无毒性紫檀芪浓度。HaCaT细胞随机分为对照组（不做任何处理）、UVB组和2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪组及2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪 + UVB组。Western印迹法检测紫檀芪和UVB处理前后HaCaT细胞内Nrf2核转位情况，定量PCR检测过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）的表达，ELISA检测CAT和SOD活性。结果 MTS法和流式细胞仪检测结果显示，2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪对HaCaT细胞无毒性作用。对照组Nrf2胞质蛋白1.03 ± 0.08、胞核蛋白1.04 ± 0.11；与对照组比较，2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组Nrf2胞质蛋白和胞核蛋白均无明显变化，UVB组Nrf2胞质蛋白无明显变化，但Nrf2胞核蛋白显著增加（1.77 ± 0.08，q = 17.24，P < 0.01）。与对照组及UVB组比较，2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪 + UVB组Nrf2胞质蛋白浓度均显著下降（0.86 ± 0.10、0.87 ± 0.11、0.46 ± 0.11，均P < 0.05），胞核蛋白浓度则显著升高（2.38 ± 0.11、2.57 ± 0.11、2.07 ± 0.13，均P < 0.01）。qPCR显示，与对照组相比，UVB照射对CAT mRNA表达有明显的抑制作用（P < 0.05），对SOD mRNA表达则无明显影响（P > 0.05），2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组CAT和SOD的表达亦均无明显变化（P > 0.05）。然而，2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT表达的抑制（P < 0.05），并上调SOD的表达（P < 0.05）。ELISA显示，UVB照射可显著降低HaCaT细胞内CAT和SOD活性（均P < 0.001），2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT和SOD活性的抑制作用（P < 0.05），但其活性仍明显低于对照组（P < 0.05）。结论 紫檀芪可通过激活Nrf2通路，上调其下游抗氧化物酶CAT、SOD表达，防御HaCaT细胞急性UVB损伤。

Effect of pterostilbene on the and activity of antioxidant enzymes in ultraviolet B-radiated HaCaT Cells