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丹参转录因子SmWRKY14基因的克隆及表达分析
引用本文:陈尘,张燕,李林,王喆之,李淑娟.丹参转录因子SmWRKY14基因的克隆及表达分析[J].中草药,2020,51(21):5590-5597.
作者姓名:陈尘  张燕  李林  王喆之  李淑娟
作者单位:陕西省植物资源保护与利用工程技术研究中心, 陕西省西安植物园(陕西省植物研究所), 陕西 西安 710061;陕西师范大学生命科学学院, 西北濒危药材资源开发国家工程实验室, 教育部药用资源与天然药物化学重点实验室, 陕西 西安 710119
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31800259);国家自然科学基金资助项目(31670299);陕西省科技厅陕西省自然科学基础研究计划资助项目(2018JQ3033);陕西省科技厅重点研发项目(2017NY-028);陕西省科学院重大项目(2016K-08)
摘    要:目的 克隆丹参Salvia miltiorrhiza转录因子基因SmWRKY14,分析其在不同组织及应答环境因子和植物激素过程中的表达特征。方法 以丹参转录组数据中Unigene(c50007_g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmWRKY14基因序列。通过生物信息软件及在线工具预测基因编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征,采用DNAMAN和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建,运用实时荧光定量PCR检测该基因的表达模式。结果 克隆得到SmWRKY14基因cDNA全长1 103 bp,编码244个氨基酸,相对分子质量27 600,等电点8.19。该蛋白含有WRKY特征基序,不含信号肽及跨膜结构域,其高级结构主要由无规卷曲构成。进化树分析表明SmWRKY14蛋白与柿WRKY14蛋白的亲缘关系最近。SmWRKY14基因在丹参中各器官中为组成型表达,且该基因与丹参酮合成关键酶基因DXS、GGPPS、CPS的表达模式相似,且受茉莉酸甲酯、脱落酸、赤霉素等植物激素及机械损伤的强烈诱导。结论 获得丹参SmWRKY14基因序列、生物信息及表达特征,为研究WRKY家族成员调控丹参酮类化合物的合成、应答植物激素及参与防御反应的分子机制提供理论依据。

关 键 词:WRKY基因  序列分析  表达模式  PCR  丹参
收稿时间:2020/3/2 0:00:00

Cloning and expression analysis of WRKY family member SmWRKY14 in Salvia miltiorrhiza
CHEN Chen,ZHANG Yan,LI Lin,WANG Zhe-zhi,LI Shu-juan.Cloning and expression analysis of WRKY family member SmWRKY14 in Salvia miltiorrhiza[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2020,51(21):5590-5597.
Authors:CHEN Chen  ZHANG Yan  LI Lin  WANG Zhe-zhi  LI Shu-juan
Affiliation:Shaanxi Engineering Research Centre for Conservation and Utilization of Botanical Resources, Xi''an Botanical Garden of Shaanxi Province, Institute of Botany of Shaanxi Province, Xi''an 710061, China;National Engineering Laboratory for Resource Developing of Endangered Chinese Crude Drugs in Northwest of China, Key Laboratory of Ministry of Education for Medicinal Resources and Natural Pharmaceutical Chemistry, College of Life Sciences, Shaanxi Normal University, Xi''an 710119, China
Abstract:
Keywords:WRKY gene  sequence analysis  expression pattern  PCR  Salvia miltiorrhiza Bge  
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