TGF-β1基因转染BMSCs后复合软骨细胞共培养

目的探讨应用TGF—β1基因转染和软骨细胞共培养后，促进大鼠BMSCs目的基因向软骨细胞的分化效果，为构建新型的软骨种子细胞提供思路。方法6周龄健康雄性Wistar大鼠、扩增、提取质粒pcDNA3．1-TGF—β1，酶切、电泳鉴定并测序。实验分组：TGF-β1基因转染BMSCs组（A组）、单纯BMSCs与软骨细胞共培养组（B组）、TGF—β1转染BMSCs后复合软骨细胞共培养组（C组）、空白BMSCs对照组（D组）、软骨细胞对照组（E组）。结果电泳显示TGF—β1目的基因条带，基因测序与Gene—Bank cDNA序列相符。MTT法测定A、B、C、D、E组细胞在490nm波长处的吸光度值，C组与A、B、D、E组间差异有统计学意义（P〈0．01）。RT—PCR和Western blot检测目的基因和蛋白的表达量、TGF—β1表达均以C组最多，A组次之；Ⅱ型胶原表达以C组最多，A组次之。结论通过TGF—β1转染同时复合软骨细胞共培养能有效促进BMSCs向软骨细胞分化，是一个较有前景的发展方向，对组织工程软骨应用于临床具有重要意义。