蒲公英总DNA的提取及其RAPD-PCR反应条件的优化 |
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引用本文: | 李喜凤,杜云锋,张红梅,郝哲,许闽,白雁.蒲公英总DNA的提取及其RAPD-PCR反应条件的优化[J].时珍国医国药,2010,21(6). |
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作者姓名: | 李喜凤 杜云锋 张红梅 郝哲 许闽 白雁 |
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作者单位: | 1. 河南中医学院,河南,郑州,450008 2. 河南省医药科学研究院,河南,郑州,450052 |
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基金项目: | 河南省重点科技攻关资助项目 |
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摘 要: | 目的 建立并优化蒲公英样品总DNA提取方法及其RAPD-PCR反应体系.方法 采用改良的CTAB法提取基因组DNA,对蒲公英RAPD-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选.结果 建立了多态性高、重复性好、可用于蒲公英RAPD分析的最佳反应体系.25 μl反应体系中含有:1×Taq Mix buffer,50 ng DNA模板,0.4 μmol/L 引物,1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,1.25U Taq酶.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,38℃复性1 min,72℃延伸2 min,共40个循环;72℃延伸10 min,反应结束后,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用RAPD标记技术进行蒲公英鉴定及种质资源遗传多样性分析奠定了基础.
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关 键 词: | 蒲公英 基因组DNA提取 随机扩增多态性DNA技术 |
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