| 荧光定量PCR检测TRECs的标准品质粒和标准曲线的构建 |
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| 引用本文： | 李红兵,陈明,朱学文,汪莉萍,葛国洪,李秀华.荧光定量PCR检测TRECs的标准品质粒和标准曲线的构建[J].江苏医药,2008,34(2):173-175. |
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| 作者姓名： | 李红兵 陈明 朱学文 汪莉萍 葛国洪 李秀华 |
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| 作者单位： | 1. 陕西渭南市中心医院
2. 徐州医学院附属医院感染病科,221002 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅社会科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环(TRECs)的标准品质粒和标准曲线.方法 对TCRδ基因进行序列分析,设计一对引物和探针.提取正常人外周血单个核细胞中的DNA,经普通PCR扩增,产物纯化后与pUCM-T载体连接并转化入大肠杆菌DH5α,筛选得到重组成功的质粒.结果 重组质粒测序后显示目的片段序列正确,表明TRECs基因片段成功克隆.以103～107 copies/ml不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后,统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系(r=-0.998,P＜0.01).结论 所构建的TRECs标准品特异性和线性关系较好.
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| 关 键 词： | 聚合酶链反应 T细胞受体重排切除环 标准曲线 质粒 |
| 文章编号： | 0253-3685（2008）02-0173-03 |
| 收稿时间： | 2007-03-19 |
| 修稿时间： | 2007年3月19日 |
Construction of recombinant plasmid and standard curve for detection of TRECS by real-time quantitative PCR |
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| LI Hongbing, CHEN Ming, ZHU Xuewen,et al..Construction of recombinant plasmid and standard curve for detection of TRECS by real-time quantitative PCR[J].Jiangsu Medical Journal,2008,34(2):173-175. |
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| Authors: | LI Hongbing CHEN Ming ZHU Xuewen |
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| Affiliation: | LI Hongbing, CHEN Ming, ZHU Xuewen, et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Polymerase chain reaction TRECs Standard curve Plasmid |
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