基于SDS-PAGE对蜂蜜中蛋白质的研究

采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蜂蜜中的蛋白进行分离,通过单一变量试验得出较优的电泳参数为:蛋白提取方法采用硫酸-钨酸钠法、上样量为20μg、分离胶浓度为12%。通过优化后的电泳条件对7种不同蜜源的天然蜂蜜和市售蜂蜜进行分离。结果分析得到天然蜂蜜中的蛋白质分子质量主要集中在(20~80)ku范围内,蛋白条带在(6~12)条之间,且不同蜜源蜂蜜中的蛋白条带具有很大的相似性;而市售蜂蜜的条带数仅为(4~6)条,蛋白含量与同蜜源天然蜂蜜相比明显减少。最后,将天然蜂蜜中的主要蛋白条带利用基质辅助激光解吸电离飞行时间二级质谱(MALDI-TOF/TOF MS)进行了鉴定,结果显示大部分蛋白为来源于意大利蜜蜂分泌的MRJPs(Majoy Royal Jelly Proteins)家族蛋白。