抑制核因子-κB活性对TNF-α诱导的肾小球系膜细胞血管紧张素原表达的影响

目的： 研究抑制核因子-κB（NF-κB）活性对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的SD大鼠肾小球系膜细胞血管紧张素原表达及血管紧张素Ⅱ产生的影响。方法：分离SD大鼠肾小球系膜细胞分为下列3组：对照组，TNF-α处理组，TNF-α＋NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯（PDTC）处理组（TNF-α＋PDTC处理组）。以电泳迁移率变动分析法（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）检测NF-κB 活性，放射免疫分析法检测培养液血管紧张素Ⅱ水平，RT-PCR方法检测血管紧张素原mRNA表达，蛋白质印迹法（Western blotting）检测血管紧张素原蛋白表达。结果： TNF-α处理组NF-κB活性［（20.67±9.14）×102 μg/cell］显著高于对照组［（8.25±4.35）×102 μg/cell，P<0.01］与TNF-α＋PDTC处理组［（7.20±4.57）×102 μg/cell，P<0.01］，TNF-α＋PDTC处理组与对照组比较无显著差异。血管紧张素原mRNA表达TNF-α处理组（0.27±0.05）显著高于对照组（0.20±0.05，P<0.05），与TNF-α＋PDTC处理组（0.22±0.06，P>0.05）比较无显著差异；蛋白表达TNF-α处理组［（0.60±0.19） μg/cell］显著高于对照组［（0.37±0.15） μg/cell，P<0.05］及TNF-α＋PDTC处理组［（0.37±0.17） μg/cell，P<0.05］，TNF-α＋PDTC处理组与对照组比较无显著差异（P＞0.05）。培养液血管紧张素Ⅱ水平在TNF-α处理组［（9.73±2.38）×10-5 ng·L-1/cell］显著高于对照组［（7.50±1.51）×10-5ng·L-1/cell，P<0.05］及TNF-α＋PDTC处理组［（6.94±1.46）×10-5 ng·L-1/cell，P<0.05］，TNF-α＋PDTC处理组与对照组比较无显著差异（P＞0.05）。结论：TNF-α可激活SD大鼠肾小球系膜细胞NF-κB，并诱导血管紧张素原表达及血管紧张素Ⅱ产生增加；抑制NF-κB活性可降低血管紧张素原表达及血管紧张素Ⅱ产生。结果提示NF-κB介导TNF-α诱导的肾小球系膜细胞血管紧张素原表达及血管紧张素Ⅱ产生。