| 利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌asa A基因 |
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| 引用本文： | 李磊,王一诺,邹清华.利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌asa A基因[J].微生物学免疫学进展,2019(1):14-18. |
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| 作者姓名： | 李磊 王一诺 邹清华 |
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| 作者单位： | 北京大学基础医学院病原生物学系;全国医学教育发展中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81572041) |
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| 摘 要： | 目的利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌ATCC 17978的asaA。方法设计上下游引物中包含asaA的同源序列,并以pKD4质粒为模板,扩增含有卡那霉素抗性基因的DNA片段。将该片段转化于表达重组酶的17978感受态细胞中,在卡那霉素筛选压力下,得到经两次同源双交换的具有卡那霉素基因标记的突变菌株。随后,在重组酶的作用下将抗性基因去除,最终得到无抗性基因标记的突变菌株ΔasaA。结果通过该重组系统,首先将卡那霉素抗性基因的DNA片段替换了基因组中asaA的DNA片段,然后将卡那霉素抗性基因的DNA片段消除,最终获得了asaA缺失的突变体。结论通过Red重组系统为鲍曼不动杆菌中其他基因的缺失突变提供方法与思路。
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| 关 键 词： | 鲍曼不动杆菌 基因敲除 Ⅵ型分泌系统 asaA |
Deletion of asaA gene in Acinetobacter baumannii by Red recombination system |
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| LI Lei,WANG Yi-nuo,ZOU Qing-hua.Deletion of asaA gene in Acinetobacter baumannii by Red recombination system[J].Progress In Microbiology and Immunology,2019(1):14-18. |
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| Authors: | LI Lei WANG Yi-nuo ZOU Qing-hua |
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| Affiliation: | (Department of Microbiology, School of Basic Medical Sciences, Peking University, Beijing 10019, China) |
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| Abstract: | LI Lei;WANG Yi-nuo;ZOU Qing-hua(Department of Microbiology, School of Basic Medical Sciences, Peking University, Beijing 10019, China) |
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| Keywords: | Acinetobacter baumannii Gene knock-out The type Ⅵ secretion system(T6SS) asaA |
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