| 含人IL－2基因的真核表达质粒的构建及其在真核细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 孙洁提,钱关详,陈诗书,郑仲承,孙兰英,刘新垣.含人IL－2基因的真核表达质粒的构建及其在真核细胞中的表达[J].生物化学与生物物理学报,1995(3). |
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| 作者姓名： | 孙洁提 钱关详 陈诗书 郑仲承 孙兰英 刘新垣 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学生物化学教研室，中国科学院上海生物化学研究所 |
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| 基金项目： | “863”国家高科技项目 |
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| 摘 要： | 本工作用ＰＣＲ由人的外周血单个核细胞。ｃＤＮＡ人中获取了带有信号肽的ＩＬ－２全ｃＤＮＡ克隆，并构建了不同的表达质粒：带有ＳＶ４０启动子的以质粒为载体的ｐＳＶＫ３－ＩＬ２和以逆转录病毒为载体的ｐＬＮ－ＩＬ２系列：ｐＬＮＣＩＬ２，ｐＬＮＳＩＬ２，ｐＬＩＬ２ＳＮ，它们分别带有ＣＭＶ、ＳＶ４０和ＬＴＲ启动子。用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法、ＳＡ→脂质体法和电穿孔等方法分别将这些ＩＬ－２表达质粒转染人ＣＯＳ－７及ＣＴＬＬ－２细胞中，测定不同时间细胞培养液上清中ＩＬ－２的量。结果表明，这些表达质粒在靶细胞中均有不同程度的一过性表达，ＩＬ－２的分泌至少可持续５天，转染后７２～９６小时ＩＬ－２产量最高，一般可达２８～３０Ｕ／ｍｌ，最高为５０Ｕ／ｍｌ。本工作比较了不同启动子和表达调控元件对ＩＬ－２表达的影响，还比较了在不同靶细胞中这些表达质粒产生ＩＬ－２的量。
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| 关 键 词： | 基因治疗，基因转染，白细胞介素－2（IL－2），逆转录病毒载体 |
A Study of the Construction of Different Expression Vectors Containing IL-2 Gene and Their Expressions in Eukaryotic Cells |
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| SUN Jie-Ti, QIAN Guan-Xiang and OHEN Shi-Shu.A Study of the Construction of Different Expression Vectors Containing IL-2 Gene and Their Expressions in Eukaryotic Cells[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,1995(3). |
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| Authors: | SUN Jie-Ti QIAN Guan-Xiang and OHEN Shi-Shu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene therapy Gete transfection Interleukin-2 Retroviral vector |
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