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杂志ISSN号
人表皮生长因子基因的化学合成和克隆及其在酵母中的表达
引用本文:
袁汉英,闵永洁,石松,陶无凡,吴声积,李育阳,王启松,吕慧梅,张承圭,胡倩.人表皮生长因子基因的化学合成和克隆及其在酵母中的表达[J].生物工程学报,1991,7(4).
作者姓名:
袁汉英
闵永洁
石松
陶无凡
吴声积
李育阳
王启松
吕慧梅
张承圭
胡倩
作者单位:
复旦大学遗传所,上海;南京大学生花系,南京
摘 要:
用固相亚磷酰胺法合成了人表皮生长因子基因,全长为173个核苷酸,它被分成8个寡核苷酸,分别在DNA合成仪上合成。经分离纯化后的寡聚核苷酸进行酶促连接,然后被克隆到噬菌体M13mpl8中,克隆经分子杂交、限制酶酶切以及DNA序列分析检测,证明合成的人表皮生长因子基因和设计的完全一致。将人表皮生长因子基因的DNA片段插入酵母分泌型表达载休YFD59 HindⅢ位点中,建成表达人表皮生长因子基因的质粒YFDl04,再将此质粒转化酿酒酵母,所得转化子经摇瓶发酵,发酵上清液用受体结合试验表明有人表皮生长因子表达。
关 键 词:
基因的化学合成
人表皮生长因子
分泌型表达载体
酵母
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