| 同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累 |
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| 引用本文： | 吕中原,钱江潮,储炬,郭美锦,王永红,庄英萍,张嗣良.同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累[J].工业微生物,2008,38(4). |
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| 作者姓名： | 吕中原 钱江潮 储炬 郭美锦 王永红 庄英萍 张嗣良 |
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| 基金项目： | 华东理工大学优秀青年教师科研基金，上海市曙光跟踪计划 |
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| 摘 要： | 利用重组毕赤酵母(Richia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenvylmethionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP水平是影响SAM合成的重要因素.为了同时保持较高的SAMS活性和ATP供应,我们构建了一株既含有AOX1诱导型表达单元,又含有GAP组成型表达单元的双SAMS表达单元P.pastoris重组菌株Gd.它既能受甲醇调控表达SAMS,又能以甘油为碳源表达SAMS.在培养过程中,先是以甲醇诱导SAMS表达,得到较高的酶活,然后在发酵中后期再将碳源换为甘油.这样不但可以维持较高的酶活,而且可以提高胞内ATP含量.实验结果显示,对于同时利用AOX1和GAP启动子表达SAMS的重组菌,可采取甲醇和甘油两阶段补料,该重组菌的SAMS比产率高于组成型重组茵Xg,Gd进入甘油补料期后胞内ATP含量高于诱导型重组菌Ga.双表达单元菌株Gd的SAM产量达到1.41 g/L,比诱导型表达SAMS的重组菌株提高了76.3%,比组成型表达SAMS的重组菌株提高了60.2%,.
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| 关 键 词： | 双表达单元 SAM合成酶 |
Combined use of AOX1 and GAP promoter to express SAM synthetase and enhance S-adenosylmethionine accumulation in Pichia pastoris |
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| LU Zhong-yuan,QIAN Jiang-chao,CHU Ju,GUO Mei-jing,WANG Yong-hong,ZHUANG Ying-ping,ZHANG Si-liang.Combined use of AOX1 and GAP promoter to express SAM synthetase and enhance S-adenosylmethionine accumulation in Pichia pastoris[J].Industrial Microbiology,2008,38(4). |
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| Authors: | LU Zhong-yuan QIAN Jiang-chao CHU Ju GUO Mei-jing WANG Yong-hong ZHUANG Ying-ping ZHANG Si-liang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pichia pastoris |
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