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达氏鲟自噬基因MAP1LC3B克隆及其组织表达分析
引用本文:胡伟,许巧情,郭慧芝,李由申,韩盼盼,袁汉文,张书环,陈敦学.达氏鲟自噬基因MAP1LC3B克隆及其组织表达分析[J].南方农业学报,2020,51(2):445-452.
作者姓名:胡伟  许巧情  郭慧芝  李由申  韩盼盼  袁汉文  张书环  陈敦学
作者单位:中国水产科学研究院长江水产研究所/农业农村部淡水生物多样性保护重点实验室,武汉 430223长江大学动物科学学院,湖北荆州 434020长江大学动物科学学院,湖北荆州,434020中国水产科学研究院长江水产研究所/农业农村部淡水生物多样性保护重点实验室,武汉,430223贵州大学动物科学学院,贵阳,550025
摘    要:目的]掌握达氏鲟微管相关蛋白1A/1B轻链3B基因(MAP1LC3B)的表达模式,为后续研究MAP1LC3B基因功能及揭示达氏鲟的抗病分子机制提供理论依据.方法]采用RACE技术从达氏鲟组织中克隆MAP1LC3B基因,通过ProtParam、TMpred、Phyre2及Singal 4.1等在线软件进行生物信息学分析,同时借助实时荧光定量PCR检测MAP1LC3B基因在达氏鲟不同组织中的表达情况.结果]达氏鲟MAP1LC3B基因cDNA序列全长2208 bp,包含378 bp的开放阅读框(ORF)、202 bp的5'端非编码区(5'-UTR)和1628 bp的3'端非编码区(3'-UTR),编码125个氨基酸.MAP1LC3B氨基酸序列含有GABARAP泛素结构域、Agt7结合位点、脂化位点和维管束蛋白结合位点.达氏鲟MAP1LC3B蛋白由18种氨基酸组成,其中谷氨酸(Glu)含量最高(占9.6%)、丙氨酸(Ala)含量最低(占1.6%);蛋白分子量为14743.01 Da,理论等电点(pI)为8.92,不稳定系数为65.12,总平均亲水性为-0.484,是一种不稳定的疏水性蛋白,且不存在跨膜结构,也无信号肽序列.MAP1LC3B基因在达氏鲟鳃、脑、皮肤、头肾、前肾、脾脏、中肾、心脏和肠道等组织中均有表达,以在鳃和肠道组织中的相对表达量较高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05).结论]达氏鲟MAP1LC3B基因具有较高的保守性,在鳃和肠道黏膜免疫组织中高表达,表明自噬参与达氏鲟黏膜免疫过程,调节机体免疫反应.

关 键 词:达氏鲟    自噬    微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)    GABARAP泛素结构域    抗病机制

Cloning and expression of autophagy-related gene MAP1LC3B in Dabry's sturgeon(Acipenser dabryanus)
HU Wei,XU Qiao-qing,GUO Hui-zhi,LI You-shen,HAN Pan-pan,YUAN Han-wen,ZHANG Shu-huan,CHEN Dun-xue.Cloning and expression of autophagy-related gene MAP1LC3B in Dabry's sturgeon(Acipenser dabryanus)[J].Journal of Southern Agriculture,2020,51(2):445-452.
Authors:HU Wei  XU Qiao-qing  GUO Hui-zhi  LI You-shen  HAN Pan-pan  YUAN Han-wen  ZHANG Shu-huan  CHEN Dun-xue
Abstract:
Keywords:
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