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检测传染性支气管炎抗体NP-ELISA方法的建立
作者姓名:郝春丽  李文林  董清平  王泽霖  王新卫  杨大光
作者单位:河南农业大学牧医工程学院 郑州450002(郝春丽,李文林,王泽霖,王新卫,杨大光),河南出入境检验检疫局 郑州450003(董清平)
摘    要:【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的检测IBV抗体的间接ELISA方法;【方法】以表达的重组IBVNP蛋白为包被抗原,将之包被于聚苯乙烯酶标板上,以封闭液进行封闭,然后加待检血清在37℃作用1h,洗涤后加酶标兔抗鸡IgG抗体,在37℃作用1h,加底物显色,终止反应后测定OD值;【结果】抗原包被浓度为1.45μg/ml,待检血清最佳稀释度为1:40,酶标二抗最佳工作浓度为1:1000,确定阳性判定标准为OD450≥0.314。NP-ELISA与AIVH9、H5、H7、IBD、ND、EDS76的标准阳性血清不发生交叉反应,具有良好的特异性;【结论】NP-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好、方便快速的特点,可用于临床IB抗体的检测。

关 键 词:传染性支气管炎病毒(IBV)  抗体  NP蛋白  间接ELISA

Development of NP-ELISA for Detection of Antibody against Infectious Bronchitis Virus
Authors:Hao Chunli  Li Wenlin  Dong Qingping  Wang Xinwei  Wang Zelin  Yang Daguang
Affiliation:1. College of Animal Husbandry And Veterinary, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002; 2. Henan Entry-Exit Inspection And Quarantine Bureau, Zhengzhou 450003
Abstract:
Keywords:Avian infectious bronchitis Virus  Antibody  NP protein  Indirect ELISA
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