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可分泌性胰高血糖素样肽1融合蛋白cDNA克隆的构建
引用本文:娄明武,尹学念,王绍娟,张国斌,胡卫东,刘静华,庞丽梅,王继萍,王全颖.可分泌性胰高血糖素样肽1融合蛋白cDNA克隆的构建[J].中国临床康复,2006,10(40):75-77.
作者姓名:娄明武  尹学念  王绍娟  张国斌  胡卫东  刘静华  庞丽梅  王继萍  王全颖
作者单位:[1]深圳市龙岗中心医院介入影像科,广东省深圳市518116 [2]北华大学,吉林省吉林市132013 [3]吉林大学第一临床学院放射科,吉林省长春市130021 [4]西安市华广生物工程有限公司,陕西省西安市710000
基金项目:广东省科学技术厅项目(2005836001082);深圳市科技和信息局项目(JH200505260306A);深圳市重点学科基金资助项目
摘    要:目的:为了探讨体内分泌表达胰高血糖素样肽1(GLP—1)治疗2型糖尿病的可行性,构建可分泌表达胰高血糖素样肽1的cDNA克隆。 方法:实验于2005-09/2006-04在西安华广生物工程公司实验室进行。采用非对称互补引物/膜板法,体外合成两端含有酶切位点的胰高血糖素样肽1的cDNA片段,通过用NaeⅠ和XhoⅠ内切酶消化从NT4 cDNA克隆中获取NT4的信号肽和前导序列,通过T4连接酶连接构建分泌表达胰高血糖素样肽1的cDNA克隆。该克隆的特点是确保信号肽酶识别点的正确性。 结果:测序证实克隆的胰高血糖素样肽1的cDNA与GeneBank提供的序列完全一致;经限制性内切酶物理图谱方法证实已经成功地将胰高血糖素样肽1cDNA重组到含NT4的信号肽和前导序列下游。DNAsis软件分析结果表明该克隆编码具有信号肽酶识别点的NT4-GLP—1融合蛋白。 结论:成功构建了能够分泌表达胰高血糖素样肽1的融合蛋白的cDNA克隆。

关 键 词:胰高血糖素  神经生长因子类  重组融合蛋质类  糖尿病  2型  基因疗法
文章编号:1671-5926(2006)40-0075-03
收稿时间:2006-06-02
修稿时间:2006-07-12

Construction of cDNA clone of the secretory glucagon-like peptide-1 fusion protein
Lou Ming-wu, Yin Xue-nian, Wang Shao-juan, Zhang Guo-bin, Hu Wei-dong, Liu Jing-hua, Pang Li-mei, Wang Ji-ping, Wang Quan-ying.Construction of cDNA clone of the secretory glucagon-like peptide-1 fusion protein[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2006,10(40):75-77.
Authors:Lou Ming-wu  Yin Xue-nian  Wang Shao-juan  Zhang Guo-bin  Hu Wei-dong  Liu Jing-hua  Pang Li-mei  Wang Ji-ping  Wang Quan-ying
Abstract:
Keywords:
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