| 1，3-丙二醇脱氢酶一步纯化与杂化凝胶固定化的初步研究 |
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| 引用本文： | 彭益强,罗菊香,张磊,方柏山.1，3-丙二醇脱氢酶一步纯化与杂化凝胶固定化的初步研究[J].化工进展,2008,27(2):284-288,293. |
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| 作者姓名： | 彭益强 罗菊香 张磊 方柏山 |
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| 作者单位： | 华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室,福建泉州362021 |
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| 基金项目： | 国家863计划子课题（2006AA020103）、国家自然科学基金资助项目（20676048）、国务院侨办课题（06QZR08）. |
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| 摘 要： | 转录表达来源于Klebsiella．pl，3-丙二醇脱氢酶（PDH）基因片段的E．coli工程菌，在5L发酵罐、30℃、pH值7．0、200r／min（微氧）条件下培养20h；发酵菌体经破碎分离后所得样品通过HisTrap HP柱亲和层析一步纯化得到电泳纯的PDH，纯化倍数为2．94倍，活性回收率为50％，经SDS-PAGE电泳鉴定获得一条清晰条带，表达蛋白亚基相对分子质量约为41kDa。用改进的溶胶-凝胶法（杂化凝胶）包埋纯化酶，考察正硅酸乙酯（TEOS）浓度、海藻酸盐（ALG）浓度、CaCl2浓度及ALG与TEOS体积比等因素对酶固定化效果的影响，结果表明，较优包埋条件为：ρ（TEOS）=20g／L，ρ（ALG）=30g／L，ρ（CaCl2）40g／L，V（ALG）：V（TEOS）=3：1；由此制备的PDH的ALG-SiO2杂化凝胶保藏60天后酶活仍保持80％，进行批次反应时，反应3批后酶活保持70．3％，反应第6批时酶活剩余29.8％。
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| 关 键 词： | 1 3-丙二醇脱氢酶 纯化 杂化凝胶 固定化 |
| 文章编号： | 1000-6613（2008）02-0284-06 |
| 收稿时间： | 2007-08-06 |
| 修稿时间： | 2007-09-14 |
1,3-propanediol dehydrogenase one-step purification and composite gel immobilization |
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| PENG Yiqiang, LUO Juxiang, ZHANG Lei, FANG Banshan.1,3-propanediol dehydrogenase one-step purification and composite gel immobilization[J].Chemical Industry and Engineering Progress,2008,27(2):284-288,293. |
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| Authors: | PENG Yiqiang LUO Juxiang ZHANG Lei FANG Banshan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | 1 3-propanediol dehydrogenase purification composite gelation immobilization |
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