| 纳米载体介导人胰岛素样生长因子1基因转染兔骨髓间充质干细胞及其表达 |
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| 引用本文： | 丁幸坡,金先庆,王智勇,付艳丽.纳米载体介导人胰岛素样生长因子1基因转染兔骨髓间充质干细胞及其表达[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(6):1035-1038. |
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| 作者姓名： | 丁幸坡 金先庆 王智勇 付艳丽 |
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| 作者单位： | 1. 河南省正骨研究院小儿骨科研究室,河南省洛阳市,471002
2. 重庆医科大学儿科研究所外研室,重庆市,400014 |
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| 摘 要： | 目的:构建增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced-green fluorescent protein,EGFP)标记的人胰岛素样生长因子(human insulin-like growth factor, hIGF-1)真核表达载体,转染至兔骨髓间充质干细胞,为组织工程关节软骨的构建提供基因改良的种子细胞.方法:实验于2005-03/2006-01在重庆医科大学儿科研究所完成.根据GeneBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T18载体,测序鉴定后酶切出目的基因片段并插入pIRES2-EGFP中,构建成真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1,经PCR及双酶切鉴定正确后用非病毒类纳米材料基因转移载体PAMAM-D介导转入兔骨髓间充质干细胞,通过荧光观察、流式细胞仪、RT-PCR等方法从各个水平检测hIGF-1在细胞的表达.结果:成功构建了增强型绿色荧光蛋白基因标记的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1,并检测到目的基因hIGF-1在兔骨髓间充质干细胞的理想表达.结论:新型纳米材料PAMAM-D是高效、简便、表达持久的基因转染方法,经IGF-1基因修饰的骨髓间充质干细胞是软骨组织工程种子细胞的理想选择.
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| 关 键 词： | 纳米载体 人胰岛素样生长因子1 骨髓间充质干细胞 生物材料 纳米材料 载体介导 人胰岛素 样生长因子 基因转染 骨髓间充质干细胞 真核表达质粒 gene expression vectors nanometer mediated rabbit mesenchymal stem cells growth human 理想选择 软骨组织工程 基因修饰 水平检测 基因标记 增强型绿色荧光蛋白 |
| 文章编号： | 1673-8225(2008)06-01035-04 |
| 修稿时间： | 2007年12月25 |
Transfection of human insulin-like growth factor-1 gene into rabbit mesenchymal stem cells mediated by nanometer vectors and the gene expression |
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| Ding Xing-po,Jin Xian-qing,Wang Zhi-yong,Fu Yan-li.Transfection of human insulin-like growth factor-1 gene into rabbit mesenchymal stem cells mediated by nanometer vectors and the gene expression[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2008,12(6):1035-1038. |
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| Authors: | Ding Xing-po Jin Xian-qing Wang Zhi-yong Fu Yan-li |
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