制何首乌的炮制方法探索

目的:考察黑豆汁炖制时间对制何首乌外观性状及各类有效成分含量变化规律的影响。方法:采用HPLC同时测定不同炮制时间制何首乌样品中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷的含量,选择Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～30 min,5%～100%A; 30～40 min,100%A),流速1. 0 mL·min~(-1),柱温35℃,检测波长280 nm。结果:随炖制时间的增加,二苯乙烯苷含量逐渐降低,与8 h时相比,至64 h时含量降低76%;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷2种蒽醌苷含量先上升后下降,至24 h时达最高值,炖制40 h时降至与8 h近似的水平,之后略有波动;大黄素、大黄素甲醚2种蒽醌苷元含量先上升后下降,炖制32 h时达最大值,之后缓慢降低并趋于稳定。结论:炖制时间对制何首乌中各类成分含量的影响显著,且变化趋势不尽相同,应规范制何首乌饮片的炮制时间;同时,仅以二苯乙烯苷及蒽醌类成分作为制何首乌的指标性成分依据不够充分,应考虑增加多糖类等质量控制指标。     

不同炮制辅料对何首乌药效成分含量的影响

目的研究不同炮制辅料对何首乌药效成分含量的影响,为选择何首乌炮制辅料提供依据。方法分别采用5种不同炮制辅料制备制何首乌,高效液相色谱法按照2015年版中国药典中制何首乌成分含量测定方法分别测定制何首乌中二苯乙烯苷、游离蒽醌的含量,比较不同炮制辅料对何首乌中药效成分含量的影响。结果炮制辅料基本都会降低制何首乌中二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量。不同炮制辅料制备的制何首乌中二苯乙烯苷含量从高到低依次为空白对照何首乌>米泔水制何首乌>生姜汁制何首乌>甘草汁制何首乌>熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌,游离蒽醌含量从高到低依次为甘草汁制何首乌>空白对照何首乌>米泔水制何首乌>熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌>生姜汁制何首乌。不同炮制辅料制备的何首乌中二苯乙烯苷含量均高于2015年版中国药典中的要求,而游离蒽醌含量均未达到2015年版中国药典中的要求。结论不同炮制辅料对制何首乌中药效成分含量的影响不同。     

小叶山葡萄化学成分及细胞毒活性研究

该文对小叶山葡萄地上部分化学成分进行了研究,运用硅胶柱色谱,ODS中低压柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,分析型和制备型HPLC从小叶山葡萄60%乙醇提取物大孔树脂95%乙醇-水洗脱部位分离得到12个化合物,利用高分辨质谱,核磁共振等波谱手段鉴定其结构分别为:(1)betulinic acid,(2)2, 2, 2'-bis(4-hydroxyphenyl)propane bis(2,3-epoxypropyl)ether,(3)eriodictyol,(4)trans-ε-viniferin,(5)(+)-cis-ε-viniferin,(6)kobophenol A,(7)ampelopsin A,(8)nepalenhenol,(9)cis-miyabenol C,(10)cis-vitisin B,(11)cis-gnetin H 和(12)(+)-hopeaphenol。化合物 2,5,6,8,9,10,11 均为首次从为葡萄属中分离得到的化合物,化合物 3,7,12 为首次从小叶山葡萄中分离得到的化合物。在作用浓度为50 μmol·L^-1下,化合物 6,7和11 对MCF-7(乳腺癌细胞株)具有较明显的体外生长抑制作用,其抑制率分别为66.58%,57.16%,52.84%。     

滋肾清肝代平方中7种成分血药浓度的测定及其在大鼠体内的药代动力学分析

目的:建立UPLC-MS-MS同时测定大鼠血浆中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,1-脱氧野尻霉素和决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、白藜芦醇的分析方法,研究大鼠服用滋肾清肝代平方后的药代动力学特征。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,采用电喷雾电离源,扫描方式为多反应离子监测。结果:7种成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率94.83%~106.58%,日内、日间精密度和准确度良好。7种成分在模型组大鼠中的药时曲线下面积、末端半衰期、达峰时间、清除率、表观分布容积、药峰浓度分别为(326.65±26.66)μg·L-1·h-1,(3.64±1.69)h,0.33 h,(60.56±5.32)L·h-1·kg-1,(325.13±167.18)L·kg-1,(169.25±18.02)μg·L-1。结论:该方法特异、快速、准确、灵敏,可用于滋肾清肝代平方在大鼠体内的药动学研究。     

正交试验法优选补肾祛瘀颗粒的提取工艺

目的:优选补肾祛瘀颗粒的提取工艺,为该制剂的工业化生产提供参考。方法:采用UV测定总多糖和总黄酮含量,检测波长分别为489,510 nm;采用HPLC测定二苯乙烯苷含量,流动相乙腈-水(22∶78),检测波长320 nm。以总多糖得率为指标,通过正交试验考察料液比、提取时间、提取次数、醇沉浓度对水提工艺的影响;以总黄酮、二苯乙烯苷提取量和浸膏得率的综合评分为指标,通过正交试验考察提取时间、提取次数、乙醇用量及体积分数对醇提工艺的影响。结果:最佳水提工艺为加12倍量水浸泡1 h,回流提取3次,每次1.5 h,醇沉浓度80%;总多糖得率8.682%。最佳醇提工艺为加10倍量80%乙醇回流3次,每次1.5 h;总黄酮和二苯乙烯苷提取量分别为660.19 mg·g-1和145.91μg·g-1,浸膏得率11.81%。结论:优选的提取工艺合理可行,为补肾祛瘀方的临床推广与应用提供实验依据。     

二苯乙烯苷和远志总皂苷配伍对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的影响

目的探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)和远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响。方法PC12细胞除空白组外运用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型,被随机分成模型组、TSG(200 mmol/L)组、TEN组(100 mg/L)、TSG-TEN配伍组(TSG200 mmol/L+TEN100 mg/L)、多奈哌齐组(10μmol/L)。采用MTT比色法检测各组细胞存活率;取细胞上清液分别测各组的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)、超氧化物歧化酶(SOD)活力;统计各组的细胞分化率。结果(1)细胞存活率的高低为:TSG-TEN组>TSG组>多奈哌齐组>TEN组(P<0.01);TSG组、TEN组、多奈哌齐组均低于TSG-TEN配伍组(P<0.01,P<0.05);(2)与模型组比较,TSG组、TEN组、TSG-TEN配伍组可降低LDH含量、MDA含量、抑制AchE活力及增强SOD活力(P<0.05)。且TSG-TEN配伍组对降低LDH含量、MDA含量、抑制AchE活力及增强SOD活力效应比TSG或TEN单用组效应更好(P<0.01);(3)PC12细胞的分化率高低为:TSG-TEN组>多奈哌齐组>TSG组>TEN组(P<0.01,P<0.05);TSG组、TEN组、多奈哌齐组均低于TSG-TEN配伍组(P<0.01,P<0.05)。结论TSG和TEN配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有显著的协同保护作用,其作用机制可能与改善胆碱能系统、抗氧化应激、降低突触可塑性损伤有关,且TSG优于TEN。     

虎杖多指标成分测定及质量控制方法研究

目的 采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS对虎杖中二苯乙烯类、蒽醌类和黄酮类等化合物进行快速分析,将多指标成分的测定和明晰化指纹图谱共同应用于中药质量控制的研究模式中。方法 采用Agilent SB-C_l8柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,分别采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS两种分析方法对虎杖中化学成分进行分离测定。结果 共从虎杖鉴别出中2个二苯乙烯类、10个蒽醌类和10个黄酮类成分,HPLC-DAD法可以同时测定虎杖药材中的虎杖苷、白藜芦醇和大黄素、大黄素甲醚。结论 采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS对虎杖中二苯乙烯类、蒽醌类和黄酮类成分进行快速分析测定,有效地控制虎杖的质量。     

HPLC法测定乌参醒脑滴丸中二苯乙烯苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定乌参醒脑滴丸中2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（二苯乙烯苷）含量的方法。方法采用SunFireTM C18（250 mm×4.6 mm,5.0μm）色谱柱,柱温为30℃;以乙腈-水（体积比20∶80）为流动相,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为320 nm。结果二苯乙烯苷在12.75～85.0μg.mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.8%,RSD为2.16%。结论该法可用于乌参醒脑滴丸中二苯乙烯苷的含量测定。     

Tetrahydroxy Stilbene Glucoside Alleviates High Glucose-Induced MPC5 Podocytes Injury Through Suppression of NLRP3 Inflammasome

Background

Tetrahydroxy stilbene glucoside (TSG) is an active ingredient of Heshouwu and is an antioxidant. The underlying mechanisms of the renoprotective effect of TSG in diabetic nephropathy have not been previously reported. In this study, we investigated the mechanisms of TSG in preventing podocytes injury in high glucose (HG) condition.

买麻藤中1个新的含氮芪类化合物

目的 研究买麻藤Gnetum montanum藤茎的化学成分。方法 利用正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶、中压制备液相色谱和半制备HPLC等多种柱色谱技术进行分离纯化,并综合运用ESI-MS、HR-ESI-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR、DEPT、¹H-¹H COSY、HSQC、HMBC等方法鉴定化合物的结构。结果 从买麻藤藤茎的95%乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为（Z）-5-（2,4-二羟基-6-（4-羟基-3-甲氧基苯乙烯基）苯基）吡咯烷-2-酮（1）、银松素单甲醚（2）、3-羟基-5,4''-二甲氧基芪（3）、银松素（4）、买麻藤醇（5）、刚果买麻藤素F（6）、异丹叶大黄素（7）、闭苞买麻藤素（8）、白藜芦醇（9）、顺式-ε-葡萄素（10）、ε-葡萄素（11）、双异食用大黄苷元A（12）、顺式-射干素B（13）和小叶买麻藤素A（14）。结论 化合物1为新化合物,命名为顺式买麻藤内酰胺（cis-gnetumamide）,化合物3、10、13和14为首次从该植物中分离得到。