健康促进企业和健康企业的内涵与实践辨析

[摘要]?微小RNA （microRNA, miRNA）在宿主-病毒相互作用中起关键调节作用，参与HBV感染、复制和HBV相关疾病的调节。细胞miRNA可以通过直接结合HBV转录物或通过靶向与HBV生命周期相关的细胞因子间接调节HBV转录和复制。反过来，HBV感染也可以影响宿主细胞内的miRNA水平。HBV和miRNA之间的相互作用在HBV复制和HBV相关疾病的发病机制中发挥重要作用。本文对miRNA与HBV的相互关系进行综述，为进一步探讨HBV感染致病的分子机制和开发新的抗HBV治疗策略提供参考。     

基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的建立

目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。     

HBV基因型的研究现状与发展趋势探讨

[摘要]?目前研究已知HBV有多种基因型，不同基因型在不同的种族、地域方面分布特点不同且HBV基因型是造成慢性感染自然史差异的原因之一，它们在感染的临床表现和抗病毒治疗的反应中起着重要作用。检测HBV基因型和了解HBV不同基因型对疾病预后的影响，对评估患者疾病结局和指导临床规划最佳治疗方案具有重要意义。 　　[关键词]　乙型肝炎病毒；基因型；基因突变；治疗     

红细胞外铁分布在HBV感染临床不同阶段的变化及预测再活动期的价值

目的 分析红细胞外铁分布在乙型肝炎病毒(HBV)感染临床不同阶段的变化及预测价值。方法 选择2016年12月-2021年1月在海口市人民医院检验科接受乙肝病毒检测的198例HBV感染患者，分为免疫耐受期、免疫清除期、低复制期、再活动期四组，比较各组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、肝功能指标，检测各组血清铁蛋白(SF)和血清铁(SI)水平，绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SF、SI对HBV感染患者再活动期的预测价值。结果 HBV感染患者不同阶段血清SF、血清SI、HBsAg、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆红素(TBIL)水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);以HBV感染免疫清除期为对照，ROC曲线分析显示，血清SF对HBV感染再活动期预测的曲线下面积(AUC)最高，以339.05μg/L为cut-off值，预测HBV感染患者再活动期的敏感度、特异度分别为73.21%、56.34%;并联试验(即血清SF>339.05μg/L或血清SI>33.32μmol/L)敏感度最高(85.71%),串联试验(即血清SF>339.05μg/L及血清SI>33.32μmol/L)特异度最高(92.96%)。结论 HBV感染患者临床不同阶段血清SF、血清SI呈特征性变化趋势，两者可作为HBV感染再活动期的生物标志物。     

反基因锁核酸在转基因小鼠体内抗乙肝病毒的短期效果

目的探讨短期内反基因锁核酸(anti-gene-locked nucleic acid,anti-gene,LNA)与拉米夫定(lamivudine,LAM)在乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因小鼠体内的抗病毒效果。方法对照组和反基因LNA治疗组于第1 d、3 d、5 d经尾静脉注射给药,拉米夫定组以每次2 mg/kg剂量灌胃2次/天,连续7 d。采用real-time PCR检测血清的HBV DNA,磁微粒化学发光法检测血清HBsAg。结果给药后的第1 d、3 d、5 d、7 d,反基因LNA组和拉米夫定组对HBV DNA平均抑制率分别为19.45%、44.37%、51.33%、52.64%和2.54%、4.04%、5.84%、9.39%,反基因LNA组和拉米夫定组对血清HBsAg的平均抑制率分别为20.37%、36.01%、44.73%、47.44%和2.17%、4.32%、5.40%、7.71%。免疫组织化学染色观察肝组织切片中HBV HBsAg细胞阳性情况,反基因LNA组HBV HBsAg细胞阳性率为(39.30±4.90)%,拉米夫定组为(80.50±3.40)%。以上结果显示,反基因LNA短期内能有效抑制乙肝病毒,而拉米夫定未能有效抑制乙肝病毒。结论短期内反基因LNA比拉米夫定具有更好的抗乙肝病毒效果,为乙肝病毒的基因治疗提供理论依据和实验基础。     

过氧化物酶体增殖物激活受体在乙型肝炎病毒的转录与复制中的作用研究现状

<正>乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）属嗜肝DNA病毒,通过逆转录机制复制。HBV基因组转录生成3. 5kb HBV m RNA（前基因组RNA）是病毒复制过程中最关键的步骤[1]。多种细胞转录因子通过激活HBV核心启动子,促进病毒前基因组RNA的转录生成和病毒的逆转录复制[2-3]。在这些细胞转录因子中,肝富集转录因子最受关注,是调节前基因组RNA转录的<正>乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）属嗜肝DNA病毒,通过逆转录机制复制。HBV基因组转录生成3. 5kb HBV m RNA（前基因组RNA）是病毒复制过程中最关键的步骤[1]。多种细胞转录因子通过激活HBV核心启动子,促进病毒前基因组RNA的转录生成和病毒的逆转录复制[2-3]。在这些细胞转录因子中,肝富集转录因子最受关注,是调节前基因组RNA转录的     

慢性HBV感染者HBsAg血清学清除后为什么还发生肝细胞癌?

本文综述了慢性HBV感染者HBsAg血清学清除后发生肝细胞癌的风险、机制及启示。     

急性乙型肝炎患者pDCs上CD86表达变化及意义

目的 探讨外周血浆细胞样树突状细胞(pDCs)在急性乙型肝炎(AHB）患者临床转归中的变化及作用。方法 纳入2015年6月至2017年5月收治的急性乙型肝炎(AHB组)患者40例， 给予退黄、降酶、保肝等药物，并加用恩替卡韦0．5 mg空腹口服，1次/d。另纳入健康体检者26例为健康对照组（ HC组）。HC组于体检当天、AHB组于治疗前及治疗后6周采集外周静脉全血，采用ELISA法检测2组血浆HBV DNA、HBsAg、HbeAg及肝功能指标水平，并应用流式细胞仪检测pDCs的频数及其功能分子CD86的表达水平。结果 治疗6周后，AHB组临床症状显著缓解，血清学指标和乙型肝炎标志物水平显著下降（P<0.01）。治疗6周后，AHB组HBV DNA转阴率为82.5%，HBsAg清除率为72.5%，HBeAg血清学转换率为75.0%，与治疗前比较差异均有统计学意义（P<0.01）, HC组pDCs频数显著高于AHB组治疗前。AHB组治疗后CD86+pDCs显著高于治疗前。HC组CD86ABC显著低于AHB组治疗前。结论 在急性乙型肝炎患者外周血pDCs的数量降低。急性乙型肝炎患者在治疗后CD86+pDCs增多。急性乙型肝炎患者pDCs上CD86表达上调。