UPLC-Q/TOF-MS/MS法同时测定丹参川芎嗪注射液中5种酚酸

目的建立UPLC-Q-TOF-MS/MS法同时测定丹参川芎嗪注射液(丹参、盐酸川芎嗪)中5种酚酸的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用ZORBAX Eclipse Plus-C_(18)色谱柱(2. 1 mm×50 mm,1. 8μm);流动相乙腈-0. 5%甲酸,梯度洗脱;体积流量0. 3 mL/min;柱温35℃。结果丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B在各自范围内线性关系良好(R~20. 999 1),平均加样回收率90. 0%～101. 3%,RSD 1. 2%～5. 0%。结论该方法简便可行,灵敏度高,专属性好,可用于丹参川芎嗪注射液的质量控制。     

川芎嗪通过激活PKCα/Nrf2信号转导抑制七氟烷诱导的氧化损伤和血脑屏障破坏研究

目的:研究川芎嗪对七氟烷引起的氧化损伤以及血脑屏障(BBB)生理功能损伤的影响及其机制。方法:将新生幼鼠随机分组,设置对照组,并分别使用七氟烷、七氟烷和溶剂、七氟烷和川芎嗪处理小鼠,暴露于七氟烷中不同时长处死并收集小鼠大脑和海马组织,通过免疫酶联吸附检测ROS,SOD,MDA,GSH和S100β蛋白水平,制作小鼠大脑和海马组织切片并通过免疫化学染色和免疫荧光染色检测小鼠大脑和海马组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2以及HO-1的表达,并检测Nrf2的核易位,HE染色后通过透射电子显微镜检查海马神经元损伤情况,通过蛋白质印迹分析PKC/Nrf2以及MMP-2、MMP-9表达情况,使用原位酶谱检测明胶酶活性并通过PCR检测ZO-1的表达。结果:与对照组相比,七氟烷组海马神经元损伤明显,而川芎嗪处理可以明显改善七氟烷诱导的海马神经元损伤; 与对照组相比,七氟烷处理后MMP-2、MMP-9表达和明胶酶活性明显增加,ZO-1表达明显减少,BBB通透性显著增加,而TIMP-1和TIMP-2表达无显著改变; 与七氟烷组相比,川芎嗪可以抑制明胶酶活性,促进ZO-1表达,改善BBB生理状态; 与溶剂组和七氟烷组相比,对照组和川芎嗪组ROS和BMD水平明显降低,MDA和GSH活性显著增加,PKCα、Nrf2和HO-1 的表达以及Nrf2的核易位显著增加。结论:川芎嗪可以通过PKCα/Nrf2信号通路以及抑制明胶酶活性,改善BBB通透性,保护海马免受氧化应激的伤害,改善海马体组织病理学结构。     

川芎-天麻配伍对川芎中2种成分在大鼠脑内药动学的影响

目的探讨川芎⁃天麻配伍对川芎中川芎嗪、阿魏酸在大鼠脑内药动学的影响。方法18只大鼠随机分成川芎组、川芎⁃天麻(1∶0.25)组、川芎⁃天麻(1∶1)组,每组6只,建立血瘀型偏头痛模型。灌胃给药后,于大鼠脑内插入微透析探针,收集不同时间点脑透析液,UPLC⁃MS/MS法检测川芎嗪、阿魏酸含有量,绘制血药浓度⁃时间曲线,计算药动学参数。结果与单味药组比较,配伍组2种成分T1/2[川芎⁃天麻(1∶1)组阿魏酸除外]、MRT0~∞、Cmax、AUC0~∞升高(P<0.05,P<0.01);川芎⁃天麻(1∶0.25)组两者T1/2、MRT0~∞、AUC0~∞高于川芎⁃天麻(1∶1)组(P<0.05,P<0.01),川芎嗪Cmax降低(P<0.05)。结论天麻可提高川芎中川芎嗪、阿魏酸脑组织吸收程度,延长作用时间,减缓消除速率,增加蓄积,其作用强度与天麻剂量有关。     

基于药动学与药效学相关联的养阴通脑颗粒主要有效部位正交配伍研究

目的探讨养阴通脑颗粒主要有效部位(总生物碱、总黄酮、总皂苷、总酚酸)配伍后在脑缺血再灌注模型大鼠体内药物浓度及其药动学与药效学变化。方法采用正交试验法组成上述主要有效部位用量配比不同的9个组方,供脑缺血再灌注模型大鼠ig给药,高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定不同时间点血浆中的葛根素、阿魏酸和川芎嗪血浆药物浓度。DAS 3.2.6软件以非房室模型拟合药动学参数,并运用总量统计矩法和综合评分法对整体药动学特征进行评价。同时采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的含量。最后进行药动学-药效学(PK-PD)模型研究,获得各药物浓度与药效之间的定量方程。结果葛根素、阿魏酸和川芎嗪在模型大鼠体内的药动学特征有所差异。总量统计矩和综合评分研究表明不同配伍对总量零阶矩、总量平均滞留时间、综合评分等参数影响不一。主要有效部位正交配伍给药后,一定程度上会抑制脑缺血再灌注大鼠血浆中SOD和CAT的降低。各PK-PD模型均采用Sigmoid-Emax模型,拟合结果与实测数据之间相关性良好,R值均大于0.85。结论养阴通脑颗粒主要有效部位配伍对模型大鼠体内的药动学行为和抗氧化指标具有一定影响;中药复方多成分药物代谢动力学可采用总量统计矩和综合评分法进行研究;PK-PD结合模型可用于中药复方多成分药动学与药效学之间相关性的评价与预测。     

疏血通注射液联合丹参川芎嗪注射液对脑梗死患者康复效果的影响

目的:探讨疏血通注射液联合丹参川芎嗪注射液对脑梗死患者康复效果的影响。方法:选取62例脑梗死患者作为研究对象,根据随机数字表法分为观察组和对照组各31例。两组患者均接受常规治疗措施,对照组在此基础上给予丹参川芎嗪注射液治疗,观察组则给予疏血通注射液治疗。对比观察两组脑梗死患者近期疗效、神经功能(SSS)、日常行为能力(BI)评分以及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平。结果:观察组患者的治疗有效率为96.77%,明显高于对照组患者的70.97%,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者在治疗前SSS评分及BI评分差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后的SSS评分及BI评分较治疗前均有明显改善,且观察组比对照组改善明显,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者在治疗前体内hs-CRP和NSE水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗后hs-CRP和NSE水平均有所降低,且观察组降低更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑梗死患者在实施常规治疗的基础上采用疏血通注射液治疗,能够促进患者康复,并可改善患者神经功能及日常行为能力,降低患者体内hs-CRP和NSE水平,保护并修复受到损伤的血管壁,降低血液的黏稠度。     

川芎嗪对免疫介导骨髓衰竭小鼠肾脏氧化应激的影响

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对免疫介导的骨髓衰竭(BMF)小鼠肾脏氧化应激的影响。方法将C57小鼠随机分成正常对照组、单纯辐照组(TBI)、模型组、TMP低剂量组(5 g·L~(-1))、TMP中剂量组(10 g·L~(-1))、TMP高剂量组(20 g·L~(-1))。C57小鼠经5.0 Gy X射线全身辐照和淋巴细胞输注,建立BMF模型。观察14 d后小鼠外周血三系细胞、骨髓有核细胞、骨髓病理学、肾脏病理学及氧化应激等指标。结果模型组骨髓病理显示有核细胞减少,外周血三系明显降低,说明成功建立免疫介导BMF模型;模型组肾脏病理显示肾小管水肿,氧化应激指标MDA升高,抗氧化应激指标GSH、SOD、GSH-Px下降,提示BMF小鼠肾脏存在氧化应激损伤。经TMP治疗后,肾脏病理未见明显异常,肾脏中MDA下降及GSH、SOD上升,免疫组化结果显示,HIF-1α表达下降,并出现VEGF表达。结论 TMP可减轻免疫介导的BMF小鼠肾脏氧化应激损伤,可能与调节HIF-1α/VEGF表达有关。