枇杷叶紫珠化学成分及其细胞毒活性和抗炎活性

目的研究枇杷叶紫珠Callicarpa kochiana的化学成分及其细胞毒活性和抗炎活性。方法枇杷叶紫珠90%丙酮提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI、ODS、重结晶、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用CCK8法、Griess法、ELISA法测定化合物4~5的细胞毒活性和抗炎活性。结果从中分离得到5个化合物,分别鉴定为3,7,3’,4’-tetramethyl-quercetin (1)、pachypodol (2)、14α-hydroxyisopimaric acid(3)、14α-hydroxy-7,15-isopimaradien-18-oic acid (4)、(16R)-16,17-dihydroxyphyllolladan-3-one (5)。化合物4在一定浓度范围内对7种肿瘤细胞具有不同程度的抑制作用,并可以减少RAW264. 7细胞NO、IL-10、MCP-1、TNF-α的释放量。结论化合物1~5均为首次从该植物中分离得到,化合物4具有细胞毒活性和抗炎活性。     

PSMA-CAR-CIK转基因细胞体外杀伤三种前列腺癌细胞株效率的研究北大核心

目的:本研究通过检测前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)-肿瘤特异性嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK)转基因细胞杀伤三种前列腺癌细胞株的效率,鉴定其用于后期治疗前列腺癌的可行性。方法:通过已经构建的二代PSMA-CAR慢病毒表达载体转染CIK细胞,构建PSMA-CAR-CIK转基因细胞;通过CCK8法检测CIK细胞及PSMA-CAR-CIK转基因细胞杀伤三种前列腺癌细胞株PC3、LNCaP、DU145的效率及效靶比。结果:转基因PSMA-CAR-CIK细胞构建成功;3 h~3.5 h为检测效应细胞对靶细胞细胞毒活性时与CCK8试剂孵育的最佳时间;两种效应细胞均在效靶比为10∶1、15∶1、20∶1时,杀伤率逐步增高,无统计学意义(P>0.05),但与其它组相比差异显著(P<0.05)。结论:两种效应细胞对于前列腺癌细胞的杀伤,只要效靶比达到10∶1的比例,就能起到一个较好的杀瘤效果,并且随着效应细胞的增加,其抗肿瘤能力逐步加强;转基因PSMA-CAR-CIK细胞的构建为CAR技术治疗前列腺癌的临床应用奠定了基础。     

中国南海石珊瑚Stylophora pistilata化学成分研究

目的 研究中国南海石珊瑚Stylopgora Stylophora pistillata的化学成分。方法 运用硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)等多种柱色谱手段对化合物进行分离纯化；利用核磁共振、质谱等波谱学手段并结合其理化性质及文献数据鉴定化合物的结构。结果 从石珊瑚Stylopgora Stylophora pistillata的乙醇提取物中共分离鉴定了8个单体化合物：1,3-十四烷酸甘油二酯（1），正二十五烷（2），正二十三烷（3），肉豆蔻酸（4），2, 2"-氧代双(1, 4-二叔丁苯)（5），(R)-2-乙基己醇（6），2, 2"-bis(4-hydroxyphenyl)propane bis(2,3-epoxypropyl)ether（7）和5-hydroxy-3,4-dimethy-5- pentyl-2(5H)-furanone（8）。结论 化合物1～8均为首次从该石珊瑚中分离得到。细胞毒活性测试结果表明，化合物7对人慢性髓原白血病细胞（K562）、人肝癌细胞（BEL-7402）、人胃癌细胞（SGC-7901）、人肺癌细胞（A549）和人宫颈癌细胞(Hela)的增殖显示出一定的生长抑制活性，其余化合物对上述肿瘤细胞均无生长抑制活性。     

海洋来源真菌杂色曲霉的化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的研究一株海洋来源真菌Aspergullus versicolor NM-021杂色曲霉的化学成分及其抗肿瘤活性。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备HPLC等色谱技术对其化学成分进行分离、纯化;通过NMR、MS方法,结合与文献报道的数据比对,对化合物的结构进行鉴定。运用细胞毒活性筛选模型对其抗肿瘤活性进行初步评价。结果从该菌株中分离得到了2个蒽醌类化合物2H-6-O-Methylaverufin（1）和6-O-Methylaverufin（2）。生物活性测试结果表明,化合物1对人结肠癌和食管癌具有一定的抑制活性。结论从该菌株中分离得到1个新的具有细胞增殖抑制活性的蒽醌类化合物（1）。     

异型南五味子根茎中倍半萜类化学成分及其细胞毒活性

目的:对异型南五味子根茎中的倍半萜类化合物进行分离、结构鉴定和细胞毒活性研究。方法:将药材异型南五味子根茎阴干,粉碎成粗粉,用95%乙醇提取3次,每次1 h。减压回收提取液至无醇味后,将提取液用水分散,过聚酰胺柱色谱,依次用不同体积分数乙醇洗脱,得到水洗脱物,30%乙醇洗脱物,60%乙醇洗脱物和95%乙醇洗脱物。30%乙醇洗脱部位过小孔树脂柱色谱(MIC),不同体积分数乙醇洗脱MCI树脂,得到水洗脱物,30%乙醇洗脱物,50%乙醇洗脱物和95%乙醇洗脱物,50%乙醇洗脱物为富集得到的总倍半萜部位。以甲醇-水为流动相,用中压制备液相色谱对总倍半萜类部位进行分离,用TLC和HPLC对得到的组分进行合并。对于含有倍半萜的组分用高效液相色谱进行分离,分离得到单体化合物。得到的单体化合物用ESI-MS和NMR谱学技术进行结构确定。结果:从异型南五味子根茎中获得8个倍半萜类化合物,结构分别鉴定为1α-hydroxy-9-deoxycacalol(1),balsamiferine B(2),balsamiferine D(3),chaetopenoid A(4),chaetopenoid B(5),asterothamnone A(6),asterothamnone B(7),and 10-dehydroxy-melleoliede B(8)。体外抗肿瘤活性筛选表明,化合物2,6,7对人肝癌细胞(SMMC7721)具有抑制活性,半数抑制浓度分别为10.6,9.5和15.5μmol·L~(-1)。结论:倍半萜化合物1~8为从南五味子属植物中首次获得。     

3株产黑色素类杆菌内毒素对人牙髓、牙周膜成纤维细胞细胞毒作用

研究发现:3株感染根管内产黑色素类杆菌、牙髓类杆菌、产黑类杆菌、中间类杆菌的内毒素脂多糖,对体外培养的人牙髓、牙周膜成纤维细胞具有细胞毒作用,其最低抑制浓度为100ug/ml,并表现出时间依赖性和浓度依赖性。     

田基黄对人舌癌细胞株TSCCa细胞毒作用的研究

本实验采用体外细胞毒试验（MTT法）和电镜观察，研究了田基黄对人舌癌细胞株TSCCa的细胞毒作用。结果表明：田基黄对人舌癌细胞株TSCCa的生长有明显的抑制作用，其抑制率随浓度的增加而提高。电镜下见田基黄对癌细胞内线粒体和粗面内质网有损伤作用。结果提示中药田基黄对口腔鳞癌有较好的治疗作用。     

β-榄香烯及顺铂对人涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞毒作用的研究

涎腺腺样囊性癌是最常见的涎腺恶性肿瘤之一，选择药物有效地控制其复发和转移成为目前研究的热点。β-榄香烯是近年来受到高度重视的抗癌药物之一，是从中药温莪术中提取出来的具有抗癌活性的物质，在白血病等临床常见肿瘤的治疗中，取得了肯定的疗效。本研究旨在探讨β-榄香烯对体外培养人涎腺腺样囊性癌细胞株的细胞毒作用，以及与化疗药物顺铂联合应用的效果。     

免疫效应细胞增殖与细胞毒性功能检测3种方法的比较

目的：对比研究用于检测免疫效应细胞增殖与细胞毒功能的方法。方法：分别采用CCK?8法、EdU标记法、CFSE标记法检测不同培养条件下NK92细胞增殖［组1：100 U/mL白细胞介素（interleukin,IL）?2;组2：100 U/mL IL?2+10 U/mL IL?15］。用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）释放法、活细胞染料双标流式法、荧光素酶法检测两组NK92对K562细胞的杀伤。结果：CCK?8法检测结果提示组2增殖能力强于组1,但差异无统计学意义（P＞0.05）,而EdU和CFSE标记法均提示两组间增殖能力有显著差异（P＜0.05）。活细胞染料双标流式法与荧光素酶法均能够检测出不同效靶比下两组NK92细胞毒功能的差异（P＜0.05）,LDH释放法在低效靶比下未检测出两组细胞毒性的差异（P＞0.05）。以双标流式法的检测值为标准参照,荧光素酶法和LDH释放法的检测值与其呈显著相关性（rS=0.979 4,P＜0.001;rS=0.973 2,P＜0.001）。结论：CCK?8法更侧重于检测代谢活性,EdU和CFSE标记法更适用于悬浮类免疫细胞的增殖检测。3种细胞毒功能检测具有一致性,活细胞染料双标流式法适合检测对悬浮类靶细胞的杀伤,荧光素酶法比LDH释放法更适用于检测对贴壁细胞的杀伤作用。     

双特异性单克隆抗体的再导向细胞毒作用研究

利用双特异性单克隆抗体(双抗)再导向效应细胞治疗肿瘤是目前很有前景的一种特异免疫疗法。体外研究表明,双抗再导向效应细胞杀伤各种肿瘤细胞具有特异性强、疗效显著的特点。动物实验证明,双抗具有明显的抑制或治疗肿瘤的作用。现有的Ⅰ期临床试用结果显示,晚期肿瘤病人普遍对双抗有很好的治疗反应。