猪病毒性繁殖障碍综合征的免疫预防

母猪繁殖障碍性疾病是以妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊、产出畸形无活力的弱仔及母猪不育症为特征的一种征候群 ,又称猪繁殖障碍综合征 (ＳＭＥＤＩ) ,随着规模化养猪的发展 ,ＳＭＥＤＩ已成为一些养猪场的重要疫病之一 ,给养猪业造成了巨大的经济损失。ＳＭＥＤＩ的病因十分     

27例乙型血友病患者Ⅸ因子基因突变研究

采用ＰＣＲ（聚合酶链反应）及ＧＡＷＴＳ（ＧｅｎｏｍｉｃＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｉｔｈＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｓＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）技术，研究了江苏、湖北、山东、广东、福建、宁夏六省区２７例乙型血友病患者及其家系成员ＦⅨ（九因子）基因各２．２Ｋｂ　ＤＮＡ序列。在２ｌ例中发现２０种不同类型的突变。其中１２种是未曾报道的新突变。３８％的突变发生在ＣｐＧ二核苷致序列上，进一步证实了ＣｐＧ确系突变热点。同时检出６例女性为致病基因携带者。对开展基因产前诊断及优生优育等，具有重要意义。     

应用区带离心法纯化地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗

目的应用区带离心法纯化原代地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗。方法浓缩的原代地鼠肾细胞乙脑灭活疫苗,经36％和60％不连续蔗糖密度、23 000r/min离心4h后,收取纯化的乙脑抗原组分,制成纯化乙脑疫苗。结果浓缩疫苗经一步区带离心纯化后,抗原效价提高3倍以上,蛋白去除99.5%以上。经稀释制成的半成品疫苗与未经浓缩的原疫苗相比,抗原效价提高4倍以上,蛋白去除99％以上。结论区带离心法可用于纯化地鼠肾细胞乙脑疫苗。     

流感的食疗与护理

春季正是流感好发的季节，可大多数人对流感没有正确的认识．往往买贵药或吃大量的药物治疗。而流感不是药物可治愈的，最好的方法就是卧床休息和大量饮水，高烧时适当服用退热剂，以减轻病痛，同时注意预防细菌感染，必要时可用抗生素治疗，一般1～2周自愈．也可配合食疗，以促进自愈。常见的饮食疗法有以下几种，可根据病情食用。     

原料人血浆病毒核酸检测试剂适用性的评价

目的评价血液制品生产用原料人血浆病毒核酸检测试剂的适用性。方法常规ELISA法检测合格的18 636份原料血浆样本,分别采用cobas s 201系统的6份和96份样本混合筛查模式进行乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)、人免疫缺陷病毒(human immunode-ficiency virus,HIV)核酸筛查,对筛查到的反应性样本进行COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HBV/HCV/HIV-1 test(简称CAP/CTM)核酸鉴别试验,评价不同混合筛查模式在实际检测中的适用性。结果 18 636份血浆样本中,6份样本混合筛查模式检测到12份反应性样本,96份样本混合筛查模式未检出反应性样本。CAP/CTM核酸鉴别试验结果表明,12份反应性样本中有6份检测到低浓度(20 IU/mL)HBV核酸,未检测到HIV、HCV核酸阳性样本。结论 96份样本混合筛查模式可有效检测到病毒核酸阳性样本,未发生高浓度病毒样本漏检,未检测到的低浓度样本可通过后续病毒灭活工艺进行有效灭活,不影响血液制品的安全性,且该筛查模式的检测通量更大,更适合用于原料血浆的常规核酸检测筛查。     

乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)中间品的稳定性

目的对乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)生产各阶段的中间品进行稳定性观察。方法将各阶段中间品置4℃保存,于不同时间取样,进行病毒滴度、抗原含量和小鼠免疫原性检测。结果4℃下病毒收获液14d内滴度下降8.0%,灭活收获液的抗原含量8周内下降7.3%。浓缩原液、鱼精蛋白处理原液、蔗糖区带离心原液抗原含量在12周内分别下降了9.7%、8.3%和8.3%,加保护剂脱糖原液12周内抗原含量下降了8.4%,稀配半成品24周内抗原含量下降了2.98%,但在12周内均保持了良好的小鼠保护效力。结论上述样品在4℃下,保存期限内均保持了良好的稳定性。     

猪流感复合多表位核酸疫苗的构建及其表达研究

目的构建猪流感病毒复合多表位核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。方法以H3、H9亚型流感的HA抗原表位及流感病毒的其它主要抗原(NP、NA、M)表位基因为基础,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765bp的复合多表位基因(Epi),其中各表位基本独立,将其克隆入真核表达载体pIRES1neo,构建重组质粒pIRE-Epi。将多表位抗原基因Epi插入到融合表达基因H57中,构建重组质粒pIRE-H57-Epi。将构建的重组质粒在Hela细胞中表达,并用免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性。结果所构建的融合表达载体pIRE-Epi和pIRE-H57-Epi,在Hela细胞中表达出流感病毒多表位抗原蛋白,并具有抗原性。结论已成功构建猪流感病毒多表位基因,有可能成为较理想的猪流感候选疫苗。     

高效液相色谱法测定菊蓝抗流感片中蒙花苷含量

建立菊蓝抗流感片中蒙花苷的含量测定方法。采用高效液相色谱法,DiamonsilTMC18柱(250m×4.6m,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(43∶57∶1),检测波长为326nm。蒙花苷在0.251 2～2.512μg的范围内具有良好的线性关系,r=0.999 8;平均回收率为98.9%(RSD为0.3%)。可为菊蓝抗流感片的质量控制提供依据。     

乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果SA14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。