米曲霉氨基酰化酶纯化方法的研究

比较了盐析法和有机溶剂沉淀法对于米曲霉氨基酰化酶的纯化效果。分别使用硫酸铵、无水乙醇和丙酮对米曲霉氨基酰化酶进行纯化，结果发现：有机溶剂沉淀法的纯化效果优于盐析法。采用丙酮二次沉淀法纯化的氨基酰化酶比酶活为93.20U／mg，纯化倍数为3．26：通过乙醇二次沉淀，得到的酶液比酶活为93.22U／mg，纯化倍数为3．10，而采用盐析法纯化的酶液的比酶活为56.01U／mg，纯化倍数为2.06。从酶的纯化效果方面考虑，丙酮沉淀法最佳，但从工业生产的可行性方面考虑，乙醇沉淀法较好。     

酶法拆分氮-15标记S-苄基-半胱氨酸的研究

S-苄基-半胱氨酸是化学法制备氮-15（^15N）标记胱氨酸及其衍生物的重要前体,以S-苄基-D,L-半胱氨酸为拆分底物,对氨基酰化酶酶促拆分工艺如反应温度、初始pH值、酶和底物的用量、反应时间等工艺参数进行了考察。在较佳的工艺条件下,苄基-L-半胱氨酸拆分的单程收率达到45%,未出现同位素丰S-度稀释现象。     

米曲霉3042的液体培养特性及其产氨基酰化酶的特性研究

对液体培养的米曲霉所产生的氨基酰化酶胞内外分布及其酶的最适ＰＨ、温度和热稳定性进行了探讨。结果表明,米曲霉３０４２属于凝聚型菌株,当搅拌速度为９０－１２０ｒ／ｍｉｎ时可获得较好的菌球,氨基酰化酶属于人酶,存在于细胞内部或分布于细胞壁上;菌体酶最适Ｐ眯７．０,最适温度为５５℃。好的菌球;氨基铧酶属于胞内酶,存在于细胞内部或分布于细胞壁上,菌体酶活最适ＰＨ为７．０,最适温度为５５℃。     

弱碱性大孔树脂固定化氨基酰化酶的性能研究

对以弱碱性大孔阴离子树脂二乙胺基乙基羟乙酯(DEAE-E/H)为载体制备得到的固定化氨基酰化酶的性质进行系统研究。结果表明,DEAE-E/H固定化氨基酰化酶具有很好的热稳定性。与自由酶相比,固定化酶的最适反应温度分别由47℃变为57℃,pH值由7.0变为6.5,并且最适反应条件范围明显变宽。Co2+对固定化酶活力具有较强的激活作用,其最佳浓度为1×10-3mol/L。分别对其在间歇和连续操作过程巾的反应进行研究,结果表明,固定化酶具有较高的操作稳定性。