高速微粒携基因侵入植物细胞的速度条件

本文围绕基因枪技术中用高速微粒向植物细胞中导入外源基因的速度条件，分析了其中的三个动力学过程：发射宏弹、加速微弹、侵入细胞．提出了气动撞击发射式基因枪中弹簧刚度应满足的条件；得到了一种用理论分析与试验测试相结合确定微弹出射速度的方法；找到了微弹侵入植物细胞的最小速度条件。从而为基因枪的设计提供了理论依据。     

新型基因枪微弹材料可行性初步研究-Ⅰ

基因枪在未来临床基因转导中很有前途,但目前所用微弹材料金、钨都属于重金属,其长期存在于人体的安全性尚无法估计。提出用羟基磷灰石(HAP)微粒来代替金或钨微粒,从理论上推导了这种取代的可行性,并报告了一种HAP微粒的制备及其负载DNA的研究结果。理论推导完全按照物理学方法进行。实验部分的方法:将稳定剂H以一定速度和比例滴入一定浓度的Ca(H2PO4)2溶液中,再按照一定的速度和比例滴入Ca(OH)2饱和溶液,期间或完成后超声处理一定时间,将所得HAP微粒溶液与亚精胺和DNA以一定比例和浓度在一定pH条件下混合。结论:所得HAP粒径值符合要求,并且能够高效负载DNA。     

Tid基因对水稻的转化及转基因植株的抗虫性

利用基因枪转化法将大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKTI)基因Ti^d转入北方推广的水稻(Oryza sativa L)品种丰优301和通887，所获得的潮霉素抗性植株通过GUS组织化学分析、PCR检测、Southern blot分子检测，证实Ti^d基因已经转入水稻基因组中，为转基因植株。用转基因水稻植株叶片进行了室内饲喂水稻二化螟(Chilo suppressalis)实验，抗虫性分析结果表明，与对照比较，部分转基因水稻植株明显地增强了对水稻二化螟虫的抗性。对转基因R1代植株进行PCR和PCR Southern分析，表明外源基因在转基因植株后代今稳定遗传。     

南荻遗传轮系统的建立及转基因植株的获得

建立了南荻愈伤组织高频诱导与再生系统及其转化愈伤组织的筛选系统,并通过本研究所建立的基因枪转化系统,将马铃薯蛋白酶抑制基因导入南荻愈伤组织而获得转基因植株。     

一种新型双向启动子——棉花曲叶病毒启动子的分离,序列分析与功？…

以棉花曲叶病毒（ＣＬＣｕＶ）侵染的烟草叶片组织ＤＮＡ为模板,通过聚合酶链反应扩增ＣＬＣｕＶ双向启动子片段并子片段并插入克隆载体。序列分析和同源性比较表明,克隆的启动子长４３６ｂｐ,与目前发现的９种ＣＬＣｕＶ株系的启动子序列均不相同,同源性最高达９９．３２％。将启动子片段分别以不同方向与ＧＵＳ报告基因和ｎｏｓ终止子融合,构建了瞬时表达载体。通过基因枪法将质粒载体导入烟草和棉花叶片细胞中进行瞬时表达。     

提高灿稻基因枪转化频率的研究

为了提高灿稻的基因枪转化频率，以14种重要的灿稻栽培品种为材料，对其胚性愈伤组织的诱导与再生的培养条件，转化细胞的筛选方案以及基因枪轰击参数进行了比较研究，建立起了较高优化的基因枪转化系统，并获得了一批有价值的转化植株。     

在植物基因工程中应用的高压脉冲放电基因枪

本文介绍了一种用于植物基因工程领域的外源基因导入技术和高压放电基因枪的工作原理及关键结构，采用高速摄影法获得了射弹的运动速度。当储能为500J时，测得第一放电电流峰值为19．3kV，电流上升时间为9μs。生物学试验结果表明，高压放电基因枪能有效地将外源基因导入植物细胞并得到表达。     

用于将DNA疫苗在体导入表皮细胞的微弹加速技术

分析了将裹着DNA疫苗的微弹射入表皮细胞技术的现状,提出了基于两阶段引射器加速微弹的方法,进行了数值模拟,得到了不同工况下第二级喷嘴的马赫数等值线、出口截面上的静压、轴线上的速度以及在负压孔产生的负压等分布。在此基础上,进行了实验研究,测得了外流场的压力、微弹速度和负压孔的负压值。同时,还观察了钨微弹的实际分布,并以钨粉为微弹射击鸡皮。结果表明,模拟数据与测量结果一致性好,数值模拟可以指导仪器设计和实际操作;微弹分布均匀,能射入表皮细胞,还可穿透表皮,能满足基因免疫的要求。     

PDS-1000/He台式基因枪使用要点及常见问题处理

基因枪应用于医学和生命科学研究领域.随着仪器性能的提升和使用者对于使用效果的要求不断提高,需要仪器使用者更好的了解基因枪使用及操作的关键因素,对于常见问题能够及时处理.本文介绍Bio-Rad(R) PDS-1000/He台式基因枪的使用要点,并对使用过程中的常见问题及处理方法进行分析.     

农杆菌介导及基因枪转化在我国甘蔗遗传转化的应用研究现状

在植物遗传化研究中,外源基因导入受体细胞的方法有多种。目前我国在甘蔗遗传转化研究中应用的研究方法主要是农杆菌介导及基因枪转化。本文对上述2种转化方法的基本原理及在甘蔗遗传转化研究的进展作简要的介绍。