Apoptin原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

目的构建Apoptin的原核表达载体,并制备抗原物质Apoptin融合蛋白。方法在获得Apoptin融合基因的基础上,成功构建了Apoptin的高效原核表达载体pET-28a( )-Apoptin,将该质粒转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。结果转化有Apoptin的原核表达载体pET-28a( )-Apoptin的大肠杆菌E.coliBL21(DE3)经IPTG诱导后,经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约17 000的位置出现目的蛋白条带,大小与Apoptin融合蛋白一致。结论Apoptin原核表达载体pET-28a( )-Apoptin能够表达出Apoptin融合蛋白,为进一步的Apoptin研究和制备Apoptin抗体奠定了基础。     

NT4-Ant-Shepherdin[79-87]融合基因重组载体的构建

目的设计构建携带NT4-Ant-Shepherdin[79-87]的cDNA融合基因的重组载体,为针对Survivin的靶向治疗奠定基础。方法应用非对称引物/模板法、PCR技术制备NT4-Ant-Shepherdin[79-87]cDNA片断,连接于pGEM-T-Easy载体,经克隆测序、酶切后与PBV220/NT4质粒连接;转化感受态细胞E.coliDH5α,亚克隆获得NT4-Ant-Shepherdin[79-87]融合基因。结果克隆出Ant-Shepherdin[79-87]基因,经酶切及测序证实结果正确;连接PBV220/NT4,经克隆、酶切,琼脂糖凝胶电泳证实获得321bp的NT4-Ant-Shepherdin[79-87]目的基因片断。结论通过分子生物学技术成功构建了携带NT4-Ant-Shepherdin[79-87]融合基因的重组载体,为进一步研究针对Survivin的靶向抗肿瘤作用奠定了基础。     

FSC用汽油机的电控标定方法

以中国大学生方程式汽车大赛,即Formula Student China(以下简称FSC)作为研究平台,对其燃油供给系统的喷油MAP、点火系统的启动加浓系数、电控系统的怠速控制等相关参数,在计算机软件模拟与台架实验的基础下进行了标定方法探究,阐述了动力ECU标定流程,优化了启动性能、怠速控制、喷油脉谱图、点火提前角脉谱图和变速工况下喷油补偿等的标定,试验结果表明软件模拟及台架试验的预期模拟数据与实车标定数据基本一致,运用软件模拟与实际结合的标定方法可以大大的参赛车辆的标定效率。     

2006款东风雪铁龙凯旋行驶时水温过高

<正>故障现象一辆2006年生产的东风雪铁龙凯旋,发动机型号为PSA RFN 10LH3X,排量为2.0L,VIN为LDCC43X356029***,行驶里程为150 000km。该车在行驶过程中水温过高报警。据车主反映:水温过高时,发动机舱内冒出白色蒸汽,打开发动机舱盖后发现是水箱上水管脱落,拖至维修站。维修技师将水箱上水管安装完后试车故障再现,再次拖回维修站。更换水箱、水泵后     

舰船装备故障诊断特征知识获取方法研究

将粗糙集理论引入到舰船装备故障诊断特征知识获取,提出一种基于粗糙集理论的舰船装备故障诊断特征知识获取模型.该模型从包含冗余和不一致信息的原始数据出发,构建决策表,通过属性约简和属性值约简获取故障诊断的最小约简属性集和诊断规则,并建立诊断规则知识库.实例分析表明:在保持故障诊断分类结果的情况下,该方法可以提取出最能反映故障的特征,并能有效地解决舰船装备故障诊断中规则获取的知识冗余或缺失问题,从而为粗糙集在舰船装备故障诊断中的深入应用打下基础.     

浅谈世界技能大赛汽车技术项目

正世界技能组织WorldSkills International(WSI),非盈利性的成员组织,宗旨在于各国、各地区推广职业教育与培训TVET,促进青年人员和维修人员职业技能水平的提升,在世界范围内宣传技能对经济社会发展的影响。世界技能组织在全球范围内运作,政治、宗教上中立。该组织成立于1950年,由西班牙和葡萄牙两国发起,注册地为荷兰阿姆斯特丹。截止至2017年11月,共     

船艇舱室火灾危险性的灰色聚类评估研究

在对船艇舱室火灾危险性评估的重要性及其方法进行分析的基础上,提出运用灰色聚类分析的原理和方法来确定船艇舱室火灾的危险性评估问题,既避免了人为定性判断的主观任意性,又克服了其它定量方法对船艇舱室火灾危险性评估问题的缺陷和不足,使火灾危险性评估更为有效合理,从而更好地进行安全防范。     

基于模糊信息融合的船舶动力装置综合故障诊断方法研究

在模糊集理论的基础上,将决策级信息融合技术应用于故障诊断系统中,提出了一种基于系统模糊综合评价融合结构下的综合故障诊断方法.该方法以模糊逻辑运算和全局决策融合来自多传感器的局部判决来获取诊断对象的综合诊断结果,并对船舶主动力系统的运行故障进行诊断研究,结果表明,该方法准确有效,为船舶动力装置故障的智能化诊断提供了有益的借鉴.     

TGFβ1-(78-109)-HBc融合蛋白的原核表达

目的　应用基因工程技术制备TGFβ1 (78- 10 9) HBc融合蛋白 ,作为TGFβ1疫苗 ,用于抗纤维化研究。方法　合成TGFβ1 (78- 10 9)编码区DNA ,连接于质粒载体 ,再在其下游连接HBc编码区 ,测序证实后 ,进行原核表达 ,表达产物以SDS PAGE、ELISA等方法鉴定。结果　经DNA序列分析证实融合基因序列完全正确 ,SDS PAGE证实原核表达产物相对分子质量为 2 5kD ,ELISA检测证实TGFβ1 (78- 10 9)和HBc的抗原表位均可正确暴露。结论　本研究成功构建了TGFβ1 (78- 10 9) HBc融合基因 ,进行了原核表达 ,并初步证实了表达产物的抗原性 ,为下一步进行TGFβ1疫苗抗纤维化的研究打下了基础