基于同源重组技术的表达CRE重组酶的减毒沙门菌的构建及功能初步研究

为了构建表达Cre重组酶的减毒沙门菌,本试验首先将Cre重组酶表达框插入到自杀质粒pYA3599中,构建重组自杀质粒pYA3599-Cre,电转至感受态χ7232中,经酶切鉴定与测序后,电转至χ7213感受态中,得到含有自杀质粒pYA3599-Cre的重组菌χ7213。随后通过同源重组,经两步筛选,将Cre重组酶表达框整合至减毒沙门菌χ11802的基因组中,得到重组减毒沙门菌χ11802-Cre,通过Western-boltting技术检测重组酶Cre的表达,进而将报告质粒pYA4545-lox P电转至重组菌中验证Cre重组酶的功能。结果显示,成功构建了自杀质粒pYA3599-Cre,并基于同源重组技术成功将重组酶Cre表达框整合至χ11802基因组中,通过Western-blotting成功检测出重组酶Cre的表达,且报告质粒电转至重组菌中可被切除lox P位点之间序列。本试验成功构建出能表达重组酶Cre的减毒沙门菌,为后期以位点特异性重组酶Cre为基础的减毒沙门菌微环DNA疫苗的构建奠定了基础。     

雾霾治理法制化路径探究

随着国家经济的发展,中国的生态环境已经濒临崩溃.2013年有关媒体报道,我国一些城市连日受到雾霾雾气天气的严重影响,雾霾面积高达130万km2,空气质量在不断下降,其中更为严重的是,我国有大部分地区被雾霾笼罩.因此,研究我国雾霾治理的法制化路径有着深远的意义.本文从雾霾法律治理实际情况和出现的问题入手,重点分析雾霾治理法制化路径.     

日本主权豁免法制的最新发展与启示

作为联合国《国家及其财产管辖豁免公约》的缔约国,日本通过国内立法完成了对公约的转化。出于限制豁免主义立场的考虑,日本在商业交易的判断标准、给予外国国家豁免的具体情形以及外国国家参加法院诉讼的法律效果等问题上对公约进行了较大修改;出于与国内法衔接的考虑,对国家与国家企业的关系采取了回避的态度;而在劳动者损害赔偿诉讼的管辖权等方面,虽然条文表述有异,但却符合公约的精神。日本国内立法的整体方向是扩大日本的司法管辖权,这一点既需要引起我们的警觉,也值得我们借鉴。     

东南亚国家的腐败与经济发展

本文通过分析东南亚的腐败对其投资、经济增长、金融体制及收入分配的影响，试图揭示东南亚国家的腐败与经济发展的关系。     

我国扩权强县改革理论观点综述

近年来,我国专家学者关于扩权强县改革的研究主要有以下几个方面:一是扩权强县改革的意义;二是扩权强县改革存在的问题;三是扩权强县改革的推进路径;四是扩权强县改革的注意事项。     

谁为拉菲狂

拉菲在中国已经成为一个符号,每一箱、每一瓶拉菲都能在中国找到归宿,拉菲的声望就像野火一般在中国的精英阶层中扩展开来,作为一种奢侈品和特殊资产,它的价值和荣耀仿佛无可比拟     

全球反导格局演进中的印度因素--兼论在此背景下中国的政策选择

印度战略核攻防力量的快速进步，可能引发新一轮军备竞赛，动摇南亚的战略平衡。而无论是印自身反导系统建设，还是其不断延伸的核武打击范围，都给中国带来相当的压力和挑战，需要中国以更加积极的态度加以有效应对。     

论当事人主义诉讼模式在我国法上的新进展

我国民事诉讼模式的改革目标是建立大陆法系的当事人主义诉讼模式,即以约束性辩论原则、约束性处分原则以及职权进行主义为基础,辅之以合理的释明权制度.近年来关于我国民事诉讼模式的改革目标在理论上存在一些误识,主要体现为混淆了当事人主义诉讼模式的适用范围、夸大了当事人主义与协动主义的差异等.民事诉讼法和相关司法解释条文表明,当事人主义诉讼模式的核心指标——请求拘束原则和主张责任已经基本在我国法上得以确立.     

当事人主义诉讼体制下法官审判方法的基础——要件事实概说

准确、妥当、迅速地解决民事纠纷是任何民事诉讼体制的制度目的,为达到这一目的,不同的诉讼体制采用了不同的审判方法。在职权探知主义的诉讼体制下,这一方法可以简单地概括为“三段论＋证明责任理论”,在当事入主义的诉讼体制下,这一方法则被概括为要件事实理论。作为要件事实理论的核心概念,“要件事实”充分体现了“诉讼结构下法学方法论”的基本特征,即这一概念既体现了实体法上法律事实的可评价性和法律效果单一性的特征,又蕴涵着程序法上主要事实的具体性、特定性以及并存性的特征。