哮喘相关基因与治疗药物的生物信息学分析

目的:通过生物信息学技术比较哮喘患者与健康人的基因芯片数据,初步鉴定与哮喘相关的基因以及治疗哮喘的潜在药物。方法:从基因表达数据库下载GSE74986基因芯片,使用GEO2R分析得出差异表达基因,采用Morpheus制作差异表达基因的热图;通过DAVID 6.8对差异表达基因进行基因本体及京都基因与基因组百科全书分析,使用String 10.5构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选核心基因。进一步使用Cytoscape 3.6.1的插件MCODE对差异表达基因进行模块分析。通过医学本体信息检索平台筛选治疗哮喘的小分子药物。结果:筛选出510个差异表达基因,包括29个上调基因和481个下调基因。差异表达基因生物过程与通路主要富集在染色质沉默、核糖核酸聚合酶Ⅱ启动子的转录调节、蛋白质转运、信使核糖核酸加工、核糖核酸剪接以及泛素介导的蛋白水解、内质网中的蛋白质加工、核糖核酸转运、髓样分化因子依赖性Toll样受体信号通路、血小板激活、核苷酸结合寡聚化结构域样受体信号通路等。共得出9个核心基因,包括T-复合蛋白1θ亚基(CCT8),T复合物蛋白1α亚单位(TCP1),26S蛋白酶调节亚单位S10B(PSMC6),热休克蛋白90α(HSP90A) A1,细胞周期蛋白C(CCNC),HSP90AB1,26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基6(PSMD6),泛素特异性蛋白酶14(USP14),真核细胞翻译起始因子4E(EIF4E)。得出2个重要模块,模块里的基因主要涉及剪接体和泛素介导的蛋白水解、蛋白修饰以及核糖核酸修饰等生物过程。治疗哮喘的潜在小分子药物有茴香霉素和金雀异黄素等。结论:差异表达基因和核心基因促进了对哮喘发病分子机制的理解,为哮喘的诊治提供了潜在的基因靶标与治疗药物。     

喘可治对小鼠急性肺损伤TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响

目的:研究喘可治注射液对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的防治效果及作用机制。方法:SPF级雌性C57BL/6J小鼠48只,随机分为正常组、模型组、地塞米松组、喘可治组,每组12只。喘可治组每只小鼠腹腔注射0.2 m L·d-1,1次/d,连续7 d;地塞米松组造模前3 d按1 mg·kg~(-1)腹腔注射,1次/d,连续3 d;模型组注射等剂量的生理盐水,正常组不作处理。除正常组外,第8天腹腔注射LPS 0.1 m L(0.5 g·L~(-1)),乙醚吸入麻醉后,各小鼠滴鼻LPS 25μL(0.5 g·L~(-1)),制作ALI模型。24 h后取材检测。酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β),IL~(-1)8的含量;免疫组织化学染色检测核转录因子-κB(NF-κB)p65的蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织p65,Toll样受体4(TLR4),Nod样受体蛋白3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase)-1蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织p65和TLR4的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清TNF-α,IL~(-1)β,IL~(-1)8含量升高(P0.01),肺组织p65,TLR4,NLRP3,Caspase-1蛋白表达升高,p65和TLR4 mRNA的表达升高(P0.05);与模型组比较,喘可治组小鼠血清TNF-α,IL~(-1)β,IL~(-1)8含量降低(P0.01),肺组织p65,TLR4,NLRP3,Caspase-1蛋白表达降低,p65和TLR4 mRNA的表达降低(P0.05)。结论:喘可治注射液能有效改善LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺组织的损伤程度,其机制可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路进而对肺组织起到保护作用。     

综合评估慢性阻塞性肺疾病稳定期中医证型与疾病程度及预后的相关性

目的:运用综合评估法分析慢性阻塞性肺疾病稳定期中医证型与病情程度及预后的相关性。方法:将符合纳入标准的200例患者分为肺气虚、肺脾气虚、肺肾气虚及肺肾气阴两虚四组,观察1年前后患者肺功能、mMRC分级、CAT评分,并进行数据整理及统计分析。结果:肺肾气虚证、肺肾气阴两虚证患者较肺气虚证、肺脾气虚证患者肺功能分级重且FEV1下降更明显、出现呼吸困难症状重且程度进展快、对生活质量影响较大且影响增加更显著,但肺气虚证与肺脾气虚证、肺肾气虚证与肺肾气阴两虚证之间无明显差异。结论:慢性阻塞性肺疾病稳定期中医证型与疾病程度及预后存在相关性。     

血痹学说与心脑血管疾病探讨

从历代医家对血痹病因、病机、脉证、变证、治则、方药的相关论述,结合临床观察发现,血痹学说与心脑血管疾病存在着许多交汇之处。表明血痹既是中医血脉系的疾病之一,又是血脉系各种疾病（血痹变证）的病因。通过对血痹学说进行广泛的探讨,有助于系统地研究中医血脉系病变与防治,有利于现代中医学的发展。     

基于转录组学与网络药理学探讨补中益气丸治疗慢性阻塞性肺疾病的机制

目的探索补中益气丸治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的分子机制。方法在TCMSP中获取补中益气丸活性成分及靶点;以GEO数据库为主,OMIM数据库为辅获取疾病靶点,使用R软件映射出药物-疾病共同靶点。通过Cytoscape 3.7.2绘制药物-成分-共同靶点-疾病网络图,以及基于共同靶点的PPI网络拓扑分析图。使用R软件对共同靶点进行GO功能富集分析、KEGG通路富集分析,并利用KEGG通路富集分析结果构建通路-靶点网络图。最后对活性成分及靶点进行分子对接验证。结果共获得163个补中益气丸活性成分及225个可用于后续分析的靶点,1313个COPD靶点,映射得出药物-疾病共同靶点20个。分析得出补中益气丸治疗COPD主要有槲皮素、山柰酚、豆甾醇等活性成分;涉及δ-阿片受体1(OPRD1)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、表皮生长因子受体(EGFR)、窖蛋白1(CAV1)、热休克蛋白B1(HSPB1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(CASP8)等作用靶点。GO分析提示主要与氧化应激反应相关;KEGG分析提示主要与肿瘤坏死因子、Toll样受体、低氧诱导因子-1、叉头盒O、Janus激酶-转录激活因子等信号通路有关。最后,分子对接结果证实了活性成分与靶点具有较好的结合能力。结论补中益气丸治疗COPD的分子机制可能是以抗炎与抗氧化应激为核心,兼顾调节免疫、低氧耐受、气道黏液高分泌与保护血管内皮细胞多方面。     

加味半夏厚朴汤干预慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征30例临床研究

目的:观察在西医常规治疗基础上加用加味半夏厚朴汤治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)重叠综合征的临床疗效并探讨中药对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)调控下炎症因子及血管内皮功能的影响.方法:62例AECOPD与OSAHS重叠综合征患者,采用计算机随机分组分为治疗组与对照组,最终每组完成30例.对照组予西医常规治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用中药汤剂加味半夏厚朴汤口服,疗程均为14 d.观察并比较2组患者治疗前后中医证候积分、外周血白细胞计数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)、动脉血气分析指标氧分压(PaO2)及二氧化碳分压(PaCO2)、彩超肺动脉收缩压(PASP)、外周血低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血浆内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)指标的变化情况,并比较临床疗效.结果:治疗后治疗组临床疗效等级分布明显优于对照组(P<0.05).治疗后2组患者中医证候积分及血WBC、血CRP、PaCO2、PASP指标均明显低于治疗前(P<0.05),PaO2明显高于治疗前(P<0.05),治疗组上述指标改善均明显优于对照组(P<0.05).治疗后2组患者血HIF-1α、IL-6、TNF-α、ET-1、VEGF水平均明显低于治疗前(P<0.05),治疗组明显低于对照组(P<0.05).结论:在西医常规治疗基础上加用加味半夏厚朴汤能改善AECOPD与OSAHS重叠综合征患者的临床表现,其可能通过调节HIF-1α信号水平,进而调控IL-6、TNF-α、ET-1、VEGF的表达,减轻患者的炎症反应,改善血管内皮功能.     

补肾法对支气管哮喘慢性持续期肾虚证患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Treg细胞及生活质量的影响

【目的】观察补肾法对支气管哮喘慢性持续期肾虚证患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Treg细胞和Foxp3 mRNA表达的影响及对患者生活质量的改善作用。【方法】将60例慢性持续期肾虚证支气管哮喘患者随机分为对照组、穴注组与肌注组,每组20例。对照组维持入组前的常规西医治疗方案,穴注组与肌注组在原有治疗基础上加喘可治注射液穴注双侧足三里穴或肌肉注射,疗程均为90 d。观察各组治疗前后外周血CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Treg细胞及Foxp3 mRNA表达的变化、成人哮喘生命质量评分量表(AQLQ)及哮喘控制测试量表(ACT)评分变化。【结果】(1)治疗后,除对照组CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Treg细胞比例无显著性变化外,各组CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Treg细胞比例及Foxp3 mRNA表达均较治疗前显著升高(P0.01),且穴注组和肌注组的升高作用均优于对照组(P0.01);同时,穴注组Foxp3 mRNA表达也较肌注组显著升高(P0.05)。(2)治疗后,除对照组对刺激原的反应、自我健康的关心和肌注组对刺激原的反应无显著性变化外,各组AQLQ各维度评分及其总分均较治疗前显著改善(P0.05或P0.01);且穴注组和肌注组在改善活动受限、哮喘症状、自我健康的关心及其总分方面均优于对照组(P0.01);同时,穴注组在改善活动受限方面也优于肌注组(P0.01)。(3)治疗30 d及90 d后,各组ACT评分均显著升高(P0.05或P0.01),且治疗90 d后,穴注组和肌注组均较治疗30 d后显著升高(P0.01);治疗30 d及90 d后,穴注组和肌注组的ACT评分均较对照组显著升高(P0.01)。【结论】喘可治注射液能够调节哮喘慢性持续期患者的外周血T淋巴细胞亚群的紊乱状态,使之恢复平衡,改善患者的临床症状和生活质量。     

慢性阻塞性肺疾病从五脏相关论治

从五脏相关理论阐述慢性阻塞性肺病(COD)的临床表现、病因病机等.认为COPD在其发生发展过程中无不与脾、肾、心和肝等脏腑系统密切关联,相互影响.从五脏相关学说,更好地认识和掌握COPD的辨证论治,发挥中医药诊治内科疑难病的重要作用,为COPD的诊治提供新的思路.     

温法在肺系疾病中的应用及变通

关于温法在治疗肺系疾病中的应用理论研究甚少，但是在应用温法和温药治疗咳喘病症，无论古代或近代的医籍均记载颇多。如《伤寒论》六经辨证，肺系疾病总的病机是寒邪外袭，治疗倡导“扶阳气”的基本思想。肺系疾病之所以使用温肺之法，着跟点在于患者气阳虚弱是关键。中医学认为，因肺为华盖，位居上焦，在外合于皮毛，风寒之邪由皮毛玄府直人，外寒内侵常居十之八九，故直接称肺阳虚者不多。