DMSO增强原核表达TAT-EGFP（Apoptin）穿膜效应的研究

目的：构建pET15b-TAT-EGFP和pET15b-TAT-Apoptin,观察表达的融合蛋白TAT-EGFP在细胞内的定位及TAT-Apoptin的诱导Caski凋亡活性。方法：人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET15b后再连接EGFP和Apoptin基因,组成pET15b-TAT-EGFP（Apoptin）重组子。转化大肠杆菌,1mMIPTG诱导TAT-EGFP（Apoptin）融合蛋白表达,His亲和层析柱纯化。培养的Caski细胞经过10%DMSO处理1h后,加入融合蛋白孵育1h,观察TAT-EGFP进入细胞的情况。同时用TUNEL检测TAT-Apoptin诱导Caski凋亡的情况。结果：成功地构建了高表达pET15b-TAT-EGFP（Apoptin）重组子,纯化了分子质量约为30KD的融合蛋白TAT-EGFP和17KD的TAT-Apoptin融合蛋白,并在体外培养的Caski细胞经10%DMSO处理后证实TAT-EGFP融合蛋白穿透生物膜的能力明显增强。结论：通过对TAT-EGFP融合蛋白的表达纯化及活性分析,证实了DMSO能够增强TAT的蛋白转导作用,为肽类及生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。     

精原干细胞体外转化和转分化的研究进展

精原干细胞(SSC)在睾丸曲细精管内微环境的精确调控下,只能单向分化为精子。然而,SSC可在特定条件下转化为多能干细胞,甚至直接重编程转分化为功能性终末分化细胞。该特殊潜能使其在再生和精准医学领域具有很好的运用前景。     

卡维地洛联合依那普利对老年风湿性心脏病慢性心力衰竭患者临床症状及心功能的影响

目的：探讨卡维地洛联合依那普利对老年风湿性心脏病慢性心力衰竭患者临床症状及心功能的影响。方法：选取2017年1月~2019年1月收治的100例老年风湿性心脏病慢性心力衰竭患者,根据随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用依那普利治疗,观察组采用卡维地洛联合依那普利治疗,比较两组临床症状相关指标、心功能指标及不良反应发生情况。结果：治疗后,观察组心率、舒张压、收缩压均低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组心室收缩末容量、心室舒张末容量均低于对照组,左室射血分数高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组不良反应发生率对比,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：卡维地洛联合依那普利治疗可改善老年风湿性心脏病慢性心力衰竭患者临床症状,提高患者心功能。     

灾害脆弱性分析在血液透析室新型冠状病毒肺炎应急管理中的应用

通过灾害脆弱性分析(HVA),制定并完善疫情防控下医院血液透析室的应急预案,旨在提升临床工作人员对疫情的防控管理能力。方法 以Kaiser模型为指导构建血液透析室疫情防控风险评估表,识别疫情防控工作中的主要风险,根据风险值排序和事件发生的可能性和严重性均较高的风险事件构建应急防控预案。选择血液透析室工作人员44例为评价对象,比较实施防控预案前（2022年3月）和实施后（2022年6月）的效果。 结果 以HVA为基础的血液透析室疫情防控应急管理预案应用后,病房工作人员相关防护知识掌握及落实情况、手卫生执行率、患者及家属防护行为等数据都得到提高,病区实现了零感染,无聚集性病例发生。。 结论 灾害脆弱性分析能及时有效地发现疫情防控下血液透析室的应急管理风险事件,明确风险管理重点,以此为基础制定的风险防控方案能够有效降低高风险事件发生率,减少医患双方的心理恐慌,确保在疫情防控下血液透析室工作的顺利开展。     

心肺复苏成功22例报告

自 1996年 5月～ 2 0 0 2年 8月 ,我们抢救成功呼吸心跳骤停患者 2 2例 ,现就心肺脑复苏中的体会讨论如下。1.一般资料本组男 17例 ,女 5例 ;年龄 2 8～ 76岁。 2 1例为心原性猝死 ,1例为腹部外伤失血性休克致呼吸心跳停止。有 3例 2次出现室颤 ,1例 4次出现室颤。原发病包括 :急性心肌梗塞 14例 ,冠心病猝死 3例 ,扩张型心肌病 2例 ,风湿性心脏病 1例 ,陈旧性心肌梗塞食管癌手术 1例及腹部外伤肝脾破裂失血性休克 1例。2 .抢救方法和预后本组的抢救方法均按照 CPR标准与 ECC指南推荐的BL S及 AL S进行。2 2例中 19例呼吸心跳骤停发生…     

蔗糖铁联合促红细胞生成素治疗老年糖尿病患者慢性心衰合并贫血

目的探讨蔗糖铁联合促红细胞生成素(EPO)治疗老年糖尿病患者慢性心功能不全(CHF)合并贫血的疗效和安全性。方法2006年1月-2008年8月,解放军第四一一医院肾内科共收治36例慢性心功能不全合并贫血老年糖尿病患者;其中男性21例,女性15例;年龄均>65岁,平均(74.2±5.8)岁;血红蛋白(Hb)均<120g/L。所有患者均静脉予以蔗糖铁(200mg/个月),皮下注射EPO(3000U/次,2次/周)治疗,共12个月。治疗前及治疗第6、12个月观测纽约心脏病协会(NYHA)心功能评分、左室射血分数(LVEF)、直视模拟标度尺(VAS)评分、Hb变化及不良反应发生情况并进行对比分析。结果到治疗第12个月,Hb从治疗前的(99.1±14.2)g/L上升至(128.0±12.5)g/L;NYHA分级从(3.9±1.3)级降至(2.7±0.4)级;LVEF从(31.6%±14.1%)上升至(41.0%±12.9%);VAS从(8.4±1.6)降至(2.6±1.9),以上各指标前后对比差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前后收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血肌酐(Scr)无明显改变。无药物不良反应及并发...     

急性心肌梗塞心肺复苏成功后再溶栓三例报道

急性心肌梗塞是心内科急症 ,梗塞初期其电生理极不稳定 ,很容易室颤而死。但经过积极心肺复苏成功后 ,能不能溶栓是一个有争议的问题。我院心内科自 1996年 5月至今已成功复苏了 11例心肌梗塞心跳骤停病人 ,对其中 3例进行了溶栓 ,以此总结如下 :病例介绍例 1　男 ,5 7岁。咽部不适 ,颈部及左肩部疼痛 10天 ,其间曾晕厥 1次 ,于 1996年 5月 14日来我院。经查心电图以急性心肌梗塞收入院。查体 :Ｔ37 8℃ ,Ｐ114次 /分 ,ＢＰ13/ 9ｋＰａ ,双肺未闻及干湿罗音 ;心浊音界向左下轻度扩大 ,心律齐 ,心音低钝。心电图示Ｉ、ａＶＬ、Ｖ1～Ｖ4 导联…     

心电图对急性下壁心肌梗死相关动脉的预测价值

通过体表心电图可以定位梗死相关动脉,本文就体表心电图判断急性下壁心肌梗死的梗死相关动脉的研究近况做一概述。     

糖类高渗化合物对TAT穿膜效率的影响

目的研究糖类高渗化合物葡萄糖、蔗糖或甘露醇预处理细胞对TAT穿膜效率的影响。方法人工合成荧光标记多肽TAT-FITC和无意义肽NCO-FITC,将其作用于体外培养的人宫颈癌细胞株Siha、小鼠成纤维细胞L929及人肝癌细胞株HepG2。荧光酶标仪定量检测不同预处理对各细胞摄取荧光标记短肽的影响及内吞抑制药阿米洛利对不同预处理后TAT穿膜的影响;荧光显微镜观察不同预处理后,TAT-FITC的穿膜效率及其在Siha细胞内的定位;MTT检测不同预处理对Siha细胞存活率的影响。结果糖类高渗化合物预处理细胞后,TAT-FITC可高效穿膜进入细胞内,且在胞浆、胞核中均匀分布,胞核浓度高于胞浆浓度;未见NCO-FITC穿膜进入细胞。0.6mol·L-1葡萄糖预处理后,细胞摄取TAT-FITC的荧光强度较0.6mol·L-1蔗糖预处理后相近且较对照组明显增强(P<0.01),0.5mol·L-1甘露醇预处理的荧光强度次之。加入阿米洛利后,糖类高渗化合物预处理的细胞摄取TAT-FITC荧光强度均明显减弱(P<0.01)。MTT数据显示适当浓度的糖类高渗化合物对细胞的活力有轻微影响。结论0.6mol·L-1葡萄糖或0.6mol.L-1蔗糖或0.5mol·L-1甘露醇预处理均可提高TAT对培养细胞的穿膜效率,但对细胞活力影响较小;预处理后细胞可能以内吞方式摄取TAT-FITC短肽。