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1.
文题释义:水凝胶三维培养:应用安全稳定的天然或合成聚合物材料为细胞提供一个空间、立体的生存环境,可增强细胞的黏附、增殖及分泌细胞因子能力。
旁分泌效应:以往研究认为干细胞应用于创面治疗的潜能是干细胞归巢分化为损伤组织,后来发现移植的干细胞大多停留在肝、脾,很少能到达损伤创面。目前研究证实间充质干细胞通过分泌某些营养因子作用于临近的靶细胞,起到促进创面愈合的作用。
背景:研究表明间充质干细胞在创面愈合中具有减轻炎症反应、促进创面愈合、减轻瘢痕形成的作用,然而以往的普通二维培养环境由于存在细胞间接触性抑制,可能导致细胞的基因表达、信号传导和形态学存在差异。
目的:观察人羊膜间充质干细胞旁分泌创面愈合相关因子的能力是否受二维培养环境与三维培养环境的影响。
方法:利用传统酶消化法获得人羊膜间充质干细胞后,分别接种于普通细胞培养瓶(二维培养)与ShakeGelTM 3D水凝胶中(三维培养),将水凝胶中的人羊膜间充质干细胞分别进行成脂、成骨、成软骨诱导分化,免疫荧光染色确定细胞分化方向;待两种培养环境中的人羊膜间充质干细胞融合至70%-80%,于倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜下观察细胞的生长特点及形态;培养24 h后,应用RT-qPCR技术测定细胞旁分泌创面愈合相关因子的mRNA相对表达量;培养48 h后,利用ELISA试剂盒检测细胞旁分泌创面愈合相关因子的蛋白表达量。
结果与结论:①二维培养组人羊膜间充质干细胞呈扁平状,为典型间充质样细胞形态;三维培养组人羊膜间充质干细胞呈圆形,均匀分散于水凝胶的每一层;②三维培养中的人羊膜间充质干细胞具有3系诱导分化潜能;③三维培养组白细胞介素6、白细胞介素8、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、透明质酸、肝细胞生长因子、血管内皮生长因子mRNA相对表达量高于二维培养组(P < 0.001,P < 0.05),两组白细胞介素4、白细胞介素10、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、转化生长因子、角化细胞生长因子mRNA相对表达量比较差异无显著性意义(P > 0.05);④三维培养组白细胞介素6、白细胞介素10、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、白细胞介素8、肝细胞生长因子、转化生长因子β1、血管内皮生长因子蛋白表达量高于二维培养组(P < 0.001,P < 0.01,P < 0.05),两组白细胞介素4、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、角化细胞生长因子蛋白表达量比较差异无显著性意义(P > 0.05);⑤结果表明,水凝胶三维培养环境中的人羊膜间充质干细胞可呈现更好的形态及创面修复相关因子旁分泌生物学效应。
ORCID: 0000-0002-9744-2176(王旗)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程 相似文献
2.
目的 探究槐耳颗粒联合索拉非尼对晚期肝癌患者免疫功能及生活质量的影响.方法 将80例晚期肝癌患者按治疗方法不同分为对照组和观察组,每组40例.对照组予以甲苯磺酸索拉非尼片口服(每次0.4 g),观察组在对照组用药基础上加用槐耳颗粒口服(每次20 g).比较两组患者治疗总有效率、免疫功能指标[CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、自然杀伤(NK)细胞]水平、不良反应发生率及肝胆肿瘤治疗功能评定量表(FACT-hep)评分差异.结果 观察组患者总有效率为92.50%(37/40),高于对照组的72.50%(29/40),差异有统计学意义(P﹤0.05).治疗后,两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平均升高,CD8+水平均降低,差异均有统计学意义(P﹤0.05);治疗后,观察组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平均高于对照组,CD8+水平低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).观察组患者不良反应总发生率为17.50%(7/40),低于对照组的40.00%(16/40),差异有统计学意义(P﹤0.05).治疗后,两组患者FACT-hep量表生理、心理、社会、功能及症状领域评分均较治疗前升高,且观察组患者生理、心理、社会、功能及症状领域评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 槐耳颗粒联合索拉非尼可显著提高晚期肝癌临床疗效,改善患者免疫功能,降低不良反应发生率,提升患者生活质量. 相似文献
3.
4.
目的研究氯氰菊酯(CYP)对白介素-6(IL-6)作用下前列腺特异性抗原(PSA)基因mRNA表达的效应。方法将LNCaP细胞接种于6孔板中培养24h,以含0、25、50、100 mg/L质量浓度IL-6的培养基培养24h后收获细胞,提取总RNA,以荧光定量RT-PCR检测PSA mRNA相对表达水平。以50mg/L的IL-6和10-7、10-6、10-5 mol/L的CYP共同培养LNCaP细胞24h,收获细胞,提取总RNA,以荧光定量RT-PCR检测PSA mRNA相对表达水平。结果 IL-6能够促进LNCaP细胞PSA mRNA的表达水平,50mg/L的IL-6对诱导作用最强(P0.05);PSA mRNA的相对表达水平随着氯氰菊酯浓度的增加而降低,各实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论实验条件下,氯氰菊酯可以抑制IL-6作用下LNCaP细胞PSA mRNA的表达。 相似文献
5.
钩虫是肠道寄生线虫中危害最严重的虫种,据估计 2010 年全世界钩虫感染人数约 4 亿。 感染人体的钩虫主要有美洲钩虫和十二指肠钩虫,两种钩虫的虫种鉴定在钩虫病的流行病学研究、钩虫病的防治策略制定、临床用药和寄生虫教学均具有重要的指导意义。 目前实验室对两种钩虫的鉴定方法主要有形态学观察、免疫学检测和分子生物学检测。 本文就两种钩虫的鉴定方法研究进展作一综述。 相似文献
6.
目的:当前用于预测心脏毒性的定量构效关系(quantitative structure activity relationship, QSAR)模型仅限于hERG通道抑制作用这一机制,应用范围较狭窄。本研究旨在构建包含各类心脏不良反应的QSAR模型,以应用于中药化学成分潜在心脏毒性的预测。方法: 从Toxicity Reference Database(ToxRefDB)和Side Effect Resource(SIDER)数据库中共收集1 109个具有心脏毒性的化合物和789个不具有心脏毒性的化合物作为构建QSAR模型的训练集,应用ADMET Predictor软件计算、筛选分子描述符,通过两种算法(支持向量机和人工神经网络)依次纳入不同数量分子描述符分别构建QSAR模型,通过10折交叉验证方法进行内部验证选择最优模型,然后通过查阅文献及数据库共收集19种具有心脏毒性和10种不具有心脏毒性的中药化学成分作为外部验证集,评价所建QSAR模型对于中药化学成分心脏毒性预测的适用性。结果: 经筛选后共有220种分子描述符参与建模,用支持向量机算法所建的最优模型为包含87种分子描述符的模型,其内部验证结果显示模型灵敏度为71%,特异度为70%,约登指数(Youden’s index)和马修斯相关系数(Matthews correlation coefficient)均为0.41。用人工神经网络算法所建的最优模型为包含13个神经元及87种分子描述符的模型,其内部验证结果显示模型灵敏度为78%,特异度为77%,约登指数和马修斯相关系数均为0.54。通过29种中药化学成分验证显示,支持向量机模型外部验证结果灵敏度为95%,特异度为40%,整体预测的准确率达到76%;人工神经网络模型外部验证结果灵敏度为95%,特异度为60%,整体预测的准确率达到83%。结论:应用人工神经网络算法构建的模型预测能力要优于支持向量机算法构建的模型,通过已知毒性的中药化学成分验证表明,此QSAR模型有良好的灵敏度和预测准确率,可以用于中药化学成分心脏毒性的预测。 相似文献
7.
目的编制适用于我国儿童的膳食营养知-信-行调查问卷。方法以Pearson相关分析法分析重测信度;采用Cronbach'sα系数评价内部一致性信度;采用单项与总和相关分析评价内容效度;采用因子分析评价结构效度。结果知识、态度、行为各维度和总问卷的重测信度系数分别为0.684、0.792、0.752、0.705,Cronbach'sα系数分别为0.816、0.889、0.981、0.943。内容效度中,除态度2、行为2、行为8、行为10条目外,其他各条目与问卷总分的相关系数均大于0.200;除知识7、行为2、行为8、行为10条目外,其他各条目与所属维度总分的相关系数均大于0.300。因子分析提取了3个公因子,累积方差贡献率为51.21%,56%的条目提取公因子后的共同度超过0.5。结论该问卷具有较好的效度和信度,可为同类研究提供参考。 相似文献
8.
补骨脂酚的体外肝微粒体代谢及代谢减毒作用的种属比较 总被引:1,自引:1,他引:0
目的研究补骨脂酚在人、比格犬和大鼠肝微粒体的体外代谢动力学及种属差异,评价不同种属肝微粒体对补骨脂酚人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)的减毒作用。方法应用MTT法检测HK-2细胞的存活率来评价补骨脂酚对HK-2细胞的毒性作用以及不同种属肝微粒体对其毒性的影响。应用HPLC法分析补骨脂酚在3个种属肝微粒体孵育液中的剩余浓度,研究其在肝微粒体中的代谢稳定性和代谢动力学。结果在3个种属肝微粒体分别作用下,补骨脂酚的HK-2细胞毒性明显降低。补骨脂酚在人肝微粒体中的代谢最慢,在大鼠肝微粒体中的代谢最快,人、犬和大鼠的代谢动力学参数Km、Vmax、T21和CLint分别为:(81.66±3.41),(89.35±4.32)和(31.89±2.60)μmol.L-1;(0.47±0.01),(0.57±0.01)和(1.88±0.09)μmol.L-1.min-1;(44.14±1.13),(53.31±0.29)和(6.79±0.39)min;(39.38±1.04),(65.16±0.35)和(365.92±20.01)ml.min-1.kg-1。结论肝微粒体降低补骨脂酚的HK-2细胞毒性,这一减毒作用与补骨脂酚经肝微粒体酶的代谢相关。补骨脂酚的体外肝代谢动力学性质存在着一定的种属差异;犬肝微粒体对高浓度补骨脂酚所致的HK-2细胞毒性的降低作用要弱于人和大鼠肝微粒体。 相似文献
9.
学龄前儿童机体铁营养状况及膳食的影响因素 总被引:5,自引:0,他引:5
目的了解学龄前儿童机体铁的营养状况及膳食影响因素.方法膳食调查采用称重记帐法,连续调查5d.发铁含量测定采用原子吸收光谱法.结果膳食中铁的摄入量为22.01mg/人日,达膳食营养供给量(RDA)的220%,其中植物性铁占82.48%,动物性铁仅占17.52%.发铁含量均值为(26.19±12.42)μg/g,发铁不足率为33%.结论被调查对象铁营养状况不良,铁的食物来源不合理,应增加血红素铁、维生素C及维生素B2的摄入量,以提高铁的生物利用率. 相似文献
10.