Galen静脉血栓的临床与影像学表现（附6例报告）

Galen静脉血栓（GVT）临床上相对少见，但随着影像学技术的发展，神经科医生对本病逐渐有所认识，但由于临床症状复杂多变，容易误诊。为提高对本病的认识，及早诊断及时治疗，现将我院收治的6例患者的临床及影像学特点报告如下。     

HCV感染人LDLR转基因小鼠肝癌细胞的初步研究

近年来在研究HCV与易感细胞的相互作用中发现 ,血清中的HCV颗粒是与 β 脂蛋白或IgG结合形成复合物(HCV RNAcarryingmaterial,HCVrcm ) ,HCVrcm通过与细胞表面的脂蛋白受体分子结合进入细胞 ,这种复合物的形成有利于HCV与靶细胞的结合和HCV的持续感染。人低密度脂蛋白受体(hLDLR)是一种表达在细胞表面的脂蛋白受体分子 ,是HCV感染细胞的重要受体 ,它在介导LDL进入细胞的过程中同时将HCV带入胞内。HCV能感染人的肝脏细胞 ,但是不能感染小鼠的肝脏细胞 ,分析可能原因是小鼠的肝脏细胞表面的小鼠低密度脂基金项目 :国家自然科…     

缺氧、VEGF及其受体表达在高血压肾损伤中的作用

目的:探讨缺氧、VEGF及其受体表达在高血压肾损伤中的作用。方法:将大鼠分为3组:①假手术组;②两肾一夹高血压未治疗组;③两肾一夹高血压降压治疗组。每组8只,观察10周后处死,对未钳夹的右肾进行常规病理、RT—PCR及免疫组化检测。用缺氧探针显示肾组织缺氧情况。结果:高血压组血清肌酐与假手术组比差异无统计意义(P＞0．05),但血压、24h尿蛋白定量、肾小球损伤指数、微动脉壁/腔比均较假手术组有上升(P＜0．01)。假手术组大鼠未钳夹肾髓质有轻度缺氧,但皮质无明显缺氧表现。高血压组髓质和皮质均有明显缺氧(P＜0．01),主要阳性部位在肾小管和病变较严重的肾小球。皮质VEGF、VEGFR-2表达均较假手术组明显升高(P＜0．01),阳性部位与缺氧探针阳性部位分布一致。与未治疗组比较,降压治疗组的血压、24h尿蛋白定量、肾小球损伤指数、肾皮质缺氧状况均有所改善,VEGF、VEGFR-2表达显著下调(P＜0．05)。结论:两肾一夹高血压大鼠模型可作为慢性肾脏缺氧的动物模型。高血压大鼠的肾皮质VEGF及其受体表达上调,并与缺氧部位分布一致,这可能是对组织缺氧的代偿反应,并参与了慢性高血压肾损伤的发生。     

生物素化标签真核表达载体的构建及其在蛋白检测中的应用

目的构建生物素化标签真核表达载体,利用生物素化蛋白检测快速、灵敏、简便的特点,对传统的Western印迹和pull down技术进行改进和优化。方法利用pCI neo载体骨架构建生物素化真核表达载体。将红色荧光蛋白插入表达载体,用辣根过氧化物酶标记的链亲和素对融合蛋白进行Western印迹检测;将萤火虫荧光素酶插入表达载体,利用pull down技术定量分析生物素化效率;将丙型肝炎病毒NS4B蛋白插入表达载体,通过pulldown技术研究丙型肝炎病毒NS4B蛋白的蛋白质间相互作用。结果构建的生物素标签真核表达载体能使目的蛋白生物素化。报告基因定量分析结果表明目的蛋白生物素化效率达72%。将该载体表达的融合蛋白应用于Western印迹和pull down技术中可实现无需特异性抗体的一步法快速检测。结论将生物素化标签真核表达载体用于Western印迹和pull down技术,建立了快速、灵敏、简便的融合蛋白质检测新方法,为生命科学领域提供了一种有利的研究工具和通用技术平台。     

SEN病毒部分基因的克隆及序列测定

目的：了解我国人群中是否存在SEN病毒(SENV)感染,并分析SENV国内分离株的部分基因序列,方法：在SENV的保守区设计引物,建立巢式PCR方法检测血清中SENV DNA,并对PCR产物进行克隆,测序,结果,7例非甲－非瘐型肝炎,且输血传播病毒（TTV）阴性患者中,2例SENV阳性,其中一株的序列与意大利SENV－D株（AX－25730）相对应位置核苷酸序列同源性为90％,结论：本研究证初了我国存在SENV感染,建立了检测SENV的PCR方法,并对SENV部分基因进行了克隆及测序,对进一步开展SENV诊断和流行病学调查具有重要意义。     

烧伤性异位骨化早期跟腱局部巨噬细胞募集及极化研究

目的 模拟临床烧伤性异位骨化(HO)的发生,探索该疾病的发生机制。方法 将24只C57BL/6小鼠随机分为对照(HO)组(n=12)与研究(HO+Burn)组(n=12)。HO组建立HO模型,HO+Burn组建立HO+烫伤模型。记录两组小鼠存活率及跟腱部位手术伤口愈合情况,以及HO+Burn组小鼠背部烫伤皮肤恢复情况。术后1周和3周,Micro-CT检测手术部位HO的生成情况;HE染色观察组织学特点;茜素红染色观察钙结节的生成情况;免疫荧光染色观察巨噬细胞浸润特征及极化特点。结果 术后3周,各组小鼠跟腱部位均出现创伤性HO,跟腱部位可见明显的片状高密度影;HO组骨密度、骨体积分数、HO面积低于HO+Burn组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1周、3周,HO+Burn组茜素红免疫荧光染色荧光信号强度均高于HO组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1周、3周,HO+Burn组M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞表达均高于HO组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后3周,HO+Burn组成骨细胞标志物OCN荧光信号强度高于HO组,差异有统计学意义(P<0...     

HLA—DR分子的分离纯化

目的：纯化HLA－DR。方法：纯化抗HLA－DR单克隆抗体1243并与CNBr活化的Sepharose4B偶联亲和柱,应用免疫亲和层析方法纯化HLA－DR分子。结果;从5g HLA-DR阳性的人B淋巴瘤细胞系RAJI裂解液中得到20μHLA-DR分子。它们以二聚体形式存在,能与构象依赖型单抗L243进行结合,煮沸变性后分开为α和β两条单链。这为MHCⅡ类分子抗原表位研究奠定了基础。     

丙型肝炎病毒感染细胞的相关分子研究进展

病毒与细胞表面分子结合是病毒感染的前提。研究丙型肝炎病毒（HCV）感染细胞的相关分子，对于阐明HCV的感染机制、预防和治疗丙型肝炎以及建立感染模型具有重要意义。近年来，该方面研究取得了一些重要进展，几种能介导病毒感染的细胞分子被相继发现，如低密度脂蛋白受体（LDLr)、CD81、GAGs和Sip-L等。本文旨在对这些细胞分子作一综述。     

小鼠白蛋白增强子在肝癌细胞系中无增强功能

目的：鉴定小鼠白蛋白增强子序列在肝癌细胞系中对白蛋白启动子转录活性的影响。方法：以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因，将小鼠白蛋白增强子序列(-10．21～-8．43kb)之间的不同区段与白蛋白启动子相融合，转染不同组织来源细胞系，用荧光显微镜和流式细胞仪分别对GFP的表达情况进行分析。结果：瞬时转染小鼠肝癌细胞系Hepa1-6，上游的不同增强子区段均不能增强白蛋白启动子的转录活性，相反，它们都不同程度地下调了启动子的转录活性；稳定转染期，E1E3能极弱地增强启动子的转录活性。稳定转染人肝癌细胞系HepG2，上游的不同增强子区段均能抑制白蛋白启动子的转录活性，导致报告基因不能表达。在非肝脏组织的细胞系中，小鼠白蛋白启动子无转录活性。结论：只使用白蛋白启动子在肝癌细胞系中表达目的基因较同时使用白蛋白启动子和增强子效果会更好。