pcDNA3.1-HMOX1重组质粒载体的构建与鉴定

目的：构建pcDNA3．1－HMOX1重组质粒载体。方法使用基因合成法合成HMOX1基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3．1载体的BamHⅠ和 NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。结果 pCDNA3．1－HMOX1重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因HMOX1的序列完全正确,重组质粒载体构建成功。结论成功构建pCDNA3．1－HMOX1融合基因并在DH5α大肠杆菌内表达,为进一步探讨HMOX1的生物学功能奠定了基础。     

性激素通过影响血脂、细胞免疫功能及氧化／抗氧化系统影响衰老

目的　通过全国流行病学调查 ,探讨血清性激素水平变化与衰老的关系。方法　以健康自愿者 2 2 5 3例为研究对象 ,应用放射免疫法测定性激素 ;全自动生化仪测定血脂谱、血糖 (GLU)及载脂蛋白 (apo) ;用流式细胞仪测定T细胞亚群 ;采用硫代巴比妥酸法和Oyanagui的亚硝酸盐形成法分别测定血清丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)。结果　老年男性随增龄促卵泡激素 (FSH)、黄体生成素 (LH )血清浓度均显著增加 ;睾酮 (T)、游离睾酮 (FT)随增龄明显下降 ,17β 雌二醇 (17β E2 )则相反 ,E2 /T比值随增龄明显升高。垂体泌乳素 (PRL)随增龄有所升高、孕酮 (P)变化不明显。血清胆固醇 (TC)随增龄升高 ,甘油三酯 (TG)无明显变化 ;与年轻组比 ,老年组高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、HDL C/TC显著降低 ,同时低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)显著升高 ,HDL C/LDL C随增龄有所降低 ;apoA1和apoB均随增龄显著升高 ,apoA1/apoB比值则降低 ;GLU各年龄段无明显变化。与年轻组相比老年组CD3+ ,CD4 + 各组均明显下降 ;而CD8+ 随增龄明显升高 ,CD4 + /CD8+ 比值随增龄显著降低。与年轻组相比 ,老年组MDA明显升高 ,SOD却显著降低。通过偏相关分析 (双侧检验 ,控制BMI、FSH、LH、PRL)显示男性TC、LDL C、apoA1、apoB、CD8+ 、MDA均与E2     

血清AFU对原发性肝癌诊断价值的meta分析

目的用meta分析的方法评价血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在原发性肝癌(PHC)诊断中的价值。方法检索Cochrane Library、Pub Med、web of knowledge(Medline、BIOSIS Previews)、Springer link、Science Direct数据库,检索时间为1997年1月至2013年12月。中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网、万方、重庆维普等数据库,检索时间为19841月年至2013年12月。检索语言限定为中文和英文。收集研究血清AFU对PHC诊断价值的相关文献,对符合纳入标准的文献进行质量评价,采用meta-Disc 1.4软件进行分析,综合评价血清AFU在原发性肝癌诊断中的价值。结果共纳入20篇文献(中文15篇,英文5篇)。分析病例组2 114例,对照组5 718例。对入选20篇文献进行异质性检验,提示所纳入文献具有非阈值效应引起的异质性,因此选用随机效应模型进行meta分析。汇总灵敏度为0.77;汇总特异度为0.87;汇总阳性似然比为5.37;汇总阴性似然比为0.28;诊断比值比为20.47;受试者工作曲线(SROC)曲线下面积为0.87。结论血清AFU在PHC的诊断中具有较高的灵敏度和特异度,对其临床诊断具有较高的价值。     

带负压式牙刷刷牙法对气管插管患者口腔护理效果评价

目的探讨气管插管患者口腔护理的有效方法,提高护理质量,减少并发症的发生。方法采用对照研究的方式,将2013年1月至2014年6月间我院ICU收治的60例气管插管患者随机分为观察组和对照组,观察组施行负压式牙刷刷牙法,对照组施行常规口腔护理法。比较两组患者护理前后口腔细菌检测情况、口腔症状、pH值、呼吸机相关性肺炎、意外脱管、机械通气的时间以及患者的舒适度。结果观察组护理后即刻的细菌数、护理后2h、4h、6h的细菌数均少于对照组,5d牙菌斑率、口腔细菌阳性率均低于对照组,差异有统计学意义（ P＜0.05）。观察组护理后的口腔溃疡、疱疹、口臭、呼吸机相关性肺炎的发生率低于对照组,护理5 d时的口腔pH值高于对照组,机械通气时间短于对照组,差异有统计学意义（ P＜0.05）。两组的舒适度差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论带负压式牙刷刷牙法能够有效清除气管插管患者的口腔细菌,预防感染的发生,优于传统的口腔护理方法。     

丙泊酚对ARDS患者血液动力学及氧合的影响

目的观察丙泊酚对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者进行治疗时血液动力学的反应和肺部氧合的影响,分析丙泊酚的治疗效果如何。方法将本院2009年8月²013年8月期间收治的60例实施机械通气的ARDS患者作为研究对象,随机分为研究组(A组)和对照组(B组)各30例。研究组采取镇静诱导和丙泊酚维持治疗法,对照组则采用镇静诱导和咪唑安定维持治疗法。视患者情况调整患者用药量,具体可参照Ramsay分级标准。分别记录两组患者镇静诱导前1、6、10、14 h时的血液动力学变化;此外需在测定血液动力学的同一时间时采集患者中心静脉血和股动脉血以测定血气,随后计算患者的肺内动静脉分流率和氧合指数,整理分析进行比较。结果经治疗的12013年8月期间收治的60例实施机械通气的ARDS患者作为研究对象,随机分为研究组(A组)和对照组(B组)各30例。研究组采取镇静诱导和丙泊酚维持治疗法,对照组则采用镇静诱导和咪唑安定维持治疗法。视患者情况调整患者用药量,具体可参照Ramsay分级标准。分别记录两组患者镇静诱导前1、6、10、14 h时的血液动力学变化;此外需在测定血液动力学的同一时间时采集患者中心静脉血和股动脉血以测定血气,随后计算患者的肺内动静脉分流率和氧合指数,整理分析进行比较。结果经治疗的1¹4 h后,两组患者较镇静诱导前的MAP和HR值有着明显下降,其差异有显著性,具统计学意义(p<0.05)。研究组和对照组比较在614 h后,两组患者较镇静诱导前的MAP和HR值有着明显下降,其差异有显著性,具统计学意义(p<0.05)。研究组和对照组比较在6¹4 h时,研究组的肺内动静脉分流率下降、氧合指数升高,其差异有显著性,具统计学意义(p<0.05)。结论丙泊酚镇静剂可有效提高ARDS患者的氧合指数,疗效确切,可在临床上安全使用。     

肥厚性心肌病的QT离散度分析

肥厚性心肌病的ＱＴ离散度分析谭家余黄湘陈一伟ＢｕｊａＧ等［１］发现肥厚型心肌病（ＨＣ）患者ＱＴ离散度（ＱＴｄ）明显增大，并与恶性心律失常有密切关系。本文研究ＱＴｄ与ＨＣ的类型、心律失常、心功能损害程度及预后的关系。资料３６例ＨＣ患者（男２９例，女７...     

日记疗法对成人病人及家属ICU综合征发生的影响

[目的]探讨日记疗法对成人病人及家属ICU综合征发生的影响。[方法]选取2018年1月—2018年12月医院重症监护室(ICU)收治的120例病人及家属作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组60例,对照组采用ICU常规护理,观察组采用ICU日记疗法即病人在ICU治疗期间由医护人员、家属及病人共同配合记录日记,内容包括病人诊断过程、治疗措施、情感体验、家属探视与人文关怀等,同时也可以为病人与家属提供书信,语音录音、拍摄视频并辅助说明。采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表及意思模糊评估量表(CAM-ICU)对两组病人及家属进行测评,比较两组病人及家属ICU综合征发生情况及睡眠质量。[结果]观察组病人及家属ICU综合征发生率为8.33%,明显低于对照组(P0.05);观察组病人及家属PSQI量表评分低于对照组(P0.05)。[结论]ICU治疗后生存者及家属ICU综合征发生率较高,将日记疗法作为成人病人及家属的干预手段,能有效帮助病人重建记忆,改善负性情绪,家属参与治疗,了解治疗整个过程,减少创伤后的应激反应,从而降低病人及家属ICU综合征发生率,改善睡眠质量。     

pCDNA3.1-MT2A真核表达载体的构建及亚细胞定位

目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。     

PSMA7对A549细胞表面黏附分子表达的影响

目的探讨PSMA7表达量的变化对A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44表达的影响。方法采用流式细胞仪分别检测高表达PSMA7的A549细胞[pcDNA3.1(-)/PSMA7组]和低表达PSMA7的A549细胞(shPSMA7组)表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44的表达情况。结果与高表达阴性对照组[pcDNA3.1(-)组]相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组的ICAM-1(t=86.325,P=0.000)和VCAM-1(t=16.337,P=0.000)的表达量均显著降低,CD44表达量则无明显变化(t=-0.545,P=0.615),而与低表达阴性对照组(shNC组)相比,shPSMA7组ICAM-1(t=-119.827,P=0.000)和VCAM-1(t=-26.68,P=0.000)表达量均显著增高,CD44表达量则无明显变化(t=-848,P=0.444)。与pcDNA3.1(-)组相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组穿膜侵袭细胞的数量明显减少(t=3.553,P=0.024),而shPSMA7组明显高于shNC组(t=-3.207,P=0.033)。结论高表达或干扰PSMA7可影响A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1的表达,提示PSMA7可能因此参与肺腺癌细胞的侵袭和转移。     

中山市孕妇血清氨基末端脑钠肽前体水平的监测价值

目的对中山市孕妇血清氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）水平进行监测,并探讨其与妊娠并发症的关系。方法采用荧光酶免疫法检测2010年中山市博爱医院收治的孕妇血清NT-proBNP水平。结果荧光酶免疫法检测的1 393例正常孕妇的血清NT-proBNP平均水平为（63.31±49.32）pg/ml,与2008年6月-2009年12月用电化学发光免疫分析测定1 860名正常孕妇的NT-proBNP水平[（56.93±42.04）pg/ml]相比,两者间差异有统计学意义（t=3.26,P=0.001）。正常孕妇的年龄对NT-proBNP无影响（F=1.632,P=0.3180）,且NT-proBNP值与孕周无关（F=0.405,P=0.876）。与正常组孕妇相比,合并有死胎、妊高征、心功能不全和贫血的孕妇的NT-proBNP值均显著升高（F=41.770,P=0.000）。随着妊高征的严重程度分级增高,NT-proBNP值逐渐升高（F=3.538,P=0.032）,与轻度妊高征相比,重度妊高征差异有统计学意义。结论通过检测孕妇血清NT-proBNP水平,可尽早发现孕妇的并发症,特别是在妊高征监测中具有较大意义。