血细胞嵌合体与移植耐受

新概念的提出和新技术的应用是促进科学发展的主要推动力。 194 3年Ｍｅｄａｗａｒ阐明了器官移植排斥的免疫机制 ,开辟了临床器官移植的新领域 ;近半个世纪以来 ,由于组织配型以及强力免疫抑制药物的发明和应用 ,器官移植已成为临床治疗各种终末器官功能衰竭的主要方法。由于器官移植患者需要终生使用免疫抑制药物 ,导致感染的频繁发生和肿瘤发病率的升高 ,严重地影响了患者的生存质量。诱导器官移植受者对供者器官特异的免疫耐受 ,是解决器官移植排斥最彻底的方法。由于成年动物稳定的移植耐受诱导相当困难 ,长期以来不但进展缓慢 ,而且大…     

成年大鼠联体诱导的移植耐受与嵌合状态相关性的研究

目的 将异基因成年大鼠联体共生（ｐａｒａｂｉｏｓｉｓ）以诱导相互特异的移植耐受，探讨嵌合体与耐受的关系。方法 联体前后低剂量环磷酰胺（ＣＰ，１００ｍｇ／ｋｇ）腹腔注射，观察联体大鼠存活时间。分别于联体５、１５、４５ｄ时将联体大鼠分开，并相互植皮，观察皮肤存活情况，并在上述时间点以流式细胞仪检测联体分开后大鼠胸腺、脾脏中供体来源细胞的嵌合状态。在联体１５ｄ时检测同种异型混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）、迟     

成年小鼠皮肤移植耐受诱导的实验研究

静脉注射ＢａＩｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２￣ｄ）脾细胞和骨髓细胞，４８小时后，腹腔注射环磷酰胺和抗胸腺细胞血清，可诱导Ｂ６小鼠（Ｈ－２￣ｂ）对ＢａＩｂ／ｃ小鼠皮肤移植的长期耐受（＞８０天）．耐受Ｂ６小鼠可正常排斥无关品系ＣＢＡ／Ｊ小鼠（Ｈ－２￣ｋ）的皮肤，显示了耐受的特异性。上述诱导方案可导致受体小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ、ＬＰＳ诱导的增植反应的抑制，但这种全身性免疫抑制可在短期内恢复，而供体特异性的同种异型反应，如ＭＬＲ和ＤＴＨ则不能恢复。     

成年小鼠的耐受机制及其在异基因骨髓移植中的应用

静脉注射异基因脾细胞和骨髓细胞加腹腔注射环磷酰胺和抗胸腺细胞血清可诱导成年小鼠异基因皮肤移植耐受。体内、外细胞转移实验均未显示耐受小鼠脾细胞中存在抑制细胞活性。直接荧光染色的流式细胞仪分析结果表明，耐受小鼠胸腺内形成了微量混合嵌合体。以耐受小鼠作为异基因骨髓移植的供体，可完全避免移植物抗宿主病的发生，耐受骨髓可在受体中建立稳定的嵌合体，使受体小鼠对供体来源的肿瘤产生了特异耐受。     

多西环素诱导表达下IL-3基因转染小鼠骨髓基质细胞促进造血

本研究探讨用多西环素调控IL-3基因表达的小鼠骨髓基质细胞系对小鼠造血干细胞增殖分化的促进作用。构建含小鼠IL-3基因逆转录病毒载体系统，转染小鼠骨髓基质细胞系，获得QXMSClTet-on-IL-3；体外加入多西环素诱导IL-3基因表达并检测IL-3表达活性；观察细胞培养条件上清液对造血祖细胞集落形成单位的作用及QXMSClTet-on-IL-3与骨髓细胞共培养对造血干细胞增殖分化的影响。结果表明：多西环素提高了QXMSClTet-on-IL-3细胞系IL-3的表达，促进骨髓造血祖细胞克隆形成数；与骨髓细胞共培养可促进造血干细胞的增殖分化。结论：应用多西环素诱导外源基因转染的骨髓基质细胞IL-3的表达，可促进造血。     

小鼠同种异体肿瘤移植耐受的诱导

目前预防移植排斥的方法副作用较多。诱导同种异体免疫耐受是避免移植排斥理想的方法。由于成年动物耐受诱导困难,用诱导免疫耐受进行同种异体器官移植的研究进展缓慢。今年以来,我们开展了小鼠     

蓖麻毒素及其A、B链的提取分离纯化的研究

本文研究蓖麻毒素及其A、B链的提取、分离、纯化,根据B链能与Sepharose-6 B上的半乳糖结合,而A链不具有这一性质,用β-巯基乙醇使蓖麻毒素直接在Sepharose-6B柱上断链,然后分别用Tris-HCl和Tris-HCl-半乳糖溶液洗脱,首次把蓖麻毒素的制备、纯化以及A、B链的断链、分离结合起来,大大简化了工艺。     

转IL—2基因的骨髓基质细胞对骨髓移植后免疫功能重建的促进作用

目的探讨了用逆转录病毒载体转入小鼠IL-2基因的基质细胞系QXMSC1对异基因骨髓移植后免疫功能重建的促进作用.方法将小鼠IL-2cDNA片段连接到逆转录病毒载体PLXSN上,构建重组逆转录病毒载体PL2SN(含小鼠IL-2cDNA).用磷酸钙共沉淀法将PL2SN转入单嗜性包装细胞系CRE,获得G418抵抗细胞株后,以上清感染双嗜性包装细胞系CRIP,G418筛选后获得高滴度的包装细胞系CRIPIL-2.感染NIH3T3细胞测定CRIPIL-2培养上清病毒滴度为3.4×105cfu/ml.感染骨髓基质细胞系QXMSC1(H-2d),G418筛选,有限稀释法得10个单克隆细胞株,选择表达IL-2最高的细胞株为实验用细胞QXMSC1IL-2,用于以后的实验.供体小鼠BALB/c(H-2d)骨髓以抗T细胞单抗anti-Thy1.2加补体去除骨髓中T细胞,受体小鼠C57BL/6(H-2b)经γ射线致死剂量照射后,输入供体骨髓1×107/只,同时输入基质细胞QXMSC1IL-25×105/只.在第30天、60天检测BMT小鼠脾细胞对LPS、ConA的反应,脾细胞产生IL-2的能力,BMT小鼠产生抗体生成细胞(PFC)的能力及产生DTH的能力.流式细胞仪检测了QXMSC1IL-2对BMT小鼠T细胞亚群的影响.结果电泳及酶切鉴定证实构建的PL2SN质粒.QXMSC1IL-2细胞系IL-2的分泌量为857U(1×106*24h).异基因骨髓移植,共输入QXMSC1IL-2能明显增加BMT小鼠脾细胞对LPS、ConA的反应.脾细胞产生IL-2的能力增强.PFC数目增加,DTH反应增强.T细胞亚群中CD4+/CD8+的比例有所恢复.结论转入IL-2的骨髓基质细胞系可促进骨髓移植后免疫功能重建.     

供体脾细胞输注诱导小鼠移植耐受及其机理的研究

目的以持续供体脾细胞输注的方法建立异基因嵌合体动物模型,并探讨移植耐受形成的机制。方法BALB/c（H-2