铜绿假单胞菌噬菌体PaP3生物学特性的研究

目的测定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的最佳感染复数、一步生长曲线和吸附K值及交叉吸附K值等基本生物学特性。方法按照感染复数（MOI）分别为0．0001、0．001、0．01、0．1、1和10加入噬菌体纯培养液和宿主菌，充分裂解细菌后，测定噬菌体滴度；以MOI=10的比例加入噬菌体及宿主菌，进行一步生长实验；纯化PaP3颗粒，免疫家兔，获得抗血清，通过中和反应实验测定PaP3和其抗血清之间的吸附反应常数K值。同时，利用抗血清交叉中和试验确定本室分离的三株噬菌体之间的血清学关系。结果当MOI=0．001时PaP3感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高；根据一步生长实验结果绘制一步生长曲线；通过血清交叉中和反应得出不同的吸附常数。结论PaP3最佳感染复数为0．001，感染宿主菌的潜伏期是20min，爆发期是60min，平均爆发量约为31，其抗血清反应的吸附常数K值为262。     

人生长激素杂交瘤系及单克隆抗体的建立

用人生长激素免疫Balb/c小鼠,6个月后取脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,用HAT作选择性培养,放射免疫法检测抗体。其中2个杂交瘤系(G_2D_4及E_2G_3)经3次克隆化后阳性率可以维持在接近100％。经过1个月的培养或冻存仍保持分泌抗体的能力。染色体主峰在90～100及80～90之间。注射腹腔后产生的腹水内抗体含量为2.5～3.5mg/ml。该抗体具有较高的效价和亲和力,免疫球蛋白亚型为IgG1,轻链为k。对hACTH、hFSH、hLH、β-内啡肽、hCG无交叉,但与hPRL有低度交叉(2.7～6.0％)。2株抗体用于放射免疫法测定时,其灵敏度分别为19.8及52.0ng/ml。本文对2株抗体的实用价值进行了讨论。     

妊娠期并发再生障碍性贫血

<正>1 临床特征 妊娠期并发的再障患者,年龄多在20～30岁之间。可初次妊娠时发病,也可在第二次、第三次,甚至第四次妊娠时继发再障。有的合并急性再生障碍性贫血(AAA);有的合并慢性再生障碍性贫血(CAA),但以CAA多见。多数在妊娠的早、中期即出现自觉症状。症状以贫血及出血为主,感染次之。病情往往随着孕份的增大而加重,但各病例之间病情变化的程度相差较大。部分患者经积极的治疗后,顺利地产下婴儿,多数婴儿的血液学未见异常。个别报道可见血红蛋白或/和血小板     

白细胞粘分缺陷综合征与β整合素

白细胞粘附缺陷（Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＬＡＤ）综合征系因先天性白细胞游功能障碍而引起非特异性免疫功能降低导致的临床综合征，多见于婴幼儿。近年来发现本病的发病机理为β２整合素表达障碍，本文就其研究近况进行综述。     

肽抗生素hPAB-β在毕赤酵母中的表达与活性鉴定

目的 构建表达人源肽抗生素hPAB-β的重组毕赤酵母,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法 用PCR及引物延伸法得到天然及优化的hPAB-β序列,克隆入pPIC9K质粒,转化DH5α大肠埃希菌,用酶切和核苷酸测序鉴定.重组质粒经SalⅠ酶线性化,整合入毕赤酵母GS115中,在DNA,mRNA及蛋白水平鉴定阳性重组子.结果 构建的含天然及优化序列的重组质粒酶切均可得到相应大小的插入片段,与预期相符,测序结果表明序列和阅读框均正确.线性化的重组质粒转入GS115后,得到7个不同的高拷贝阳性转化子,均能表达重组肽并具有良好的抑菌活性.结论 本研究成功构建含天然及优化hPAB-β序列的重组毕赤酵母工程菌,能够用于肽抗生素hPAB-β的制备.     

铜绿假单胞菌外毒素A的表达、纯化与生物学活性研究

目的利用基因工程技术制备铜绿假单胞菌外毒素A(PE),为深入研究PE的致病机理和免疫防治奠定基础。方法应用PCR技术从铜绿假单胞菌基因组中扩增外毒素A全长结构基因,将其克降于原核表达载体pQE-31中,所构建的重组质粒经测序鉴定后转化大肠埃希菌JM109, IPTG诱导表达;制备融合蛋白包涵体,并采用Ni-NTA柱亲和层析、葡聚糖凝胶过滤和阴离子交换层析分离和纯化目的蛋白;采用透析法对纯化后的目的蛋白进行复性,MTT法测定复性后的重组PE对L929细胞、B16黑素瘤细胞的细胞毒活性。结果通过对PCR反应体系的优化,扩增到了PE全长结构基因。所构建的pQE-PE重组质粒经酶切及测序鉴定与设计序列一致;转化E.coli JM109后,IPTG诱导目的蛋白表达率约为25%;SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(M_r)约为66×10~3,与理论预期值一致;破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式表达。经亲和层析、葡聚糖凝胶过滤和阴离子交换层析后蛋白纯度大于95%。MTT法测得重组PE对L929细胞和B16黑素瘤细胞的半数抑制浓度(IC_(50)值)分别为2.13μg/ml、2.58μg/ml。结论通过对PE的表达纯化,获得了具有细胞毒活性的重组PE,为利用基因工程手段大量制备PE的工作奠定了基础。     

咳喘灵高分子涂膜剂治疗急慢性支气管炎临床观察附:193例病例报告

对中中药配方提取物与高分子材料经相结合精制而成的外用涂敷药物－咳喘灵高分子涂膜剂进行了急慢性支气管炎的初步临床疗效观察,结果表明其具有较好的缓解和治疗急慢性支气管炎的作用,值得进一步研究。     

加味补阳还五汤对实验性损伤脊髓轴浆运输的保护作用

目的：探讨加味补阳还五汤对实验性脊髓损伤的保护作用。方法：将健康SD大白鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和尼莫地平组,采用Allen氏法,以288g.cm能量造成T9－T11脊髓不完全损伤动物模型,分别以加味补阳还五汤、尼莫地平、生理盐水灌胃治疗1次／d。6周后以305辣根过氧化酶（HRP）10μL坐骨神经内注射,在脑干区域测定HRP标记细胞数。结果：中药组脊髓神经功能CBS值明显下降,运动诱发电位的波幅明显提高,脊髓轴浆运输能力得到改善,髓鞘、神经元细胞结构恢复理想。结论：加味补阳还五汤可以阻止脊髓的继发性损务,促进神经元及损伤神经的修复。     

Effect of Fuzheng Kangbai Granule (扶正抗白冲剂) on Immune Function and Survival Time in Minimal Residual Leukemia Model Mice

Ｍｉｎｉｍａｌｒｅｓｉｄｕａｌｌｅｕｋｅｍｉａ（ＭＲＬ）ｉｓｔｈｅｏｒｉｇｉｎｏｆｌｅｕｋｅｍｉａｒｅｌａｐｓｅ,ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＭＲＬｉｓｔｈｅｋｅｙ ｐｒｏｂｌｅｍｉｎ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｌｅｕｋｅｍｉａｒｅｌａｐｓｅａｎｄｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇｔｈｅｉｌｌｎｅｓｓ ｆｒｅｅｓｕｒｖｉｖａｌｏｆｌｅｕｋｅｍｉａｐａｔｉｅｎｔｓ．ＴＣＭｈｏｌｄｓｔｈａｔｔｈｅｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｏｆＭＲＬｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆｔｗｏｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ：ｔｈｅ Ｅｖｉｌｅｌｉｍｉｎａ…