蛋白芯片技术在自身抗体检测中的应用

目的建立应用蛋白芯片技术检测抗核抗体谱中11种自身抗体的方法，并对蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性和特异性进行评价。方法通过蛋白芯片技术与间接免疫荧光法（IIF）和酶联免疫吸附法（ELISA）自身抗体检测试剂盒进行比对，验证抗核抗体谱检测蛋白芯片（抗SSA-52抗体、抗SSA-60抗体、抗SSB抗体、抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗dsDNA抗体、抗rRNP抗体、抗着丝点抗体和抗核抗体）在临床应用中的敏感性和特异性。除抗Jo-1抗体阳性样品较罕见，仅检测阳性样品32份，其他10种自身抗体，每种选择各阳性样本70份，阴性样本294份；并对检测结果进行统计学分析。结果除抗SSA52抗体和抗SSB抗体的检测敏感度分别为95．7％和98．6％外，其他9种自身抗体的检测敏感度均为100％；除抗SSB抗体、抗RNP-68抗体、抗Scl-70抗体、抗dsDNA抗体、抗CEN-B抗体、抗核抗原提取物抗体（ANA）的检测特异度分别为98．0％、98．0％、99．7％、99．7％、99．7％、98．3％外，其他5种自身抗体的检测特异度均为100％。结论蛋白芯片技术检测11种抗核抗体谱自身抗体的检测敏感度（均〉95．0％）和特异度（均〉98．0％）均较高，且与IIF和EHSA法有较高的符合率，能满足临床检测自身抗体谱的要求。此外，蛋白芯片技术检测自身抗体时具有高通量、简单快速、敏感度好和特异度强等优点，值得临床推广应用。     

生物芯片技术在药物研究与开发中的应用

近年来，以DNA芯片为代表的生物芯片技术，得到了迅猛发展，已有多种不同功用的生物芯片问世。目前生物芯片技术已应用于分子生物学、疾病的预防、诊断和治疗、新药开发、司法鉴定和食品卫生监督等诸多领域，已成为各国学术界和工业界所瞩目并研究的一个热点。生物芯片技术的飞速发展，引起了制药业的极大兴趣，使得生物芯片技术在药物研究与开发领域得到越来越广泛的应用，已逐渐渗入到药物研发过程中的各个步骤。目前，生物芯片技术已经应用于药物靶点发现与药物作用机制研究、超高通量药物筛选、毒理学研究、药物基础组学研究以及药物分析等药物研发环节。可以预见，随着生物芯片技术的不断发展，生物芯片技术将在药物研究与开发领域，尤其是在中药现代化研究中得到更广泛更深入的应用。     

生物芯片技术与产品发展趋势以及面临的机遇

 生物芯片是一类快速、高效、高通量的生物分析器件或集成化分析系统，包括微阵列芯片、微流控芯片、芯片实验室以及相关的仪器和设备。它集合计算机、微电子、微机械、生物化学、分子生物学和生物信息学等技术，在一个微小的芯片表面或芯片内部的微流体系统研究生物大分子之间或者生物大分子与其他化学小分子之间的反应。生物芯片能整合样品制备、分子识别和反应、信号检测和信号放大等独立的分析过程，使之连续化、平行化、集成化和微型化。生物芯片被认为是当今十分重要且具有战略意义的前沿高新技术。它们不仅在功能基因组学、蛋白质组学、代谢组学和毒理组学等领域研究中发挥了重要的作用，而且在疾病诊断和治疗、新药研究和开发、农业、环境、食品安全、国防等领域中已经显示出了非常广阔的应用前景和巨大的商业市场。截至目前，共有13 000多篇生物芯片相关论文发表，其中1000多篇发表在Cell、Nature、Science等国际顶级学术刊物上。经过了十多年的发展，生物芯片技术日趋成熟。其中技术较为成熟的微阵列芯片已经大量进入实用[1-4]。微流体芯片等技术正在逐渐成熟并开始被各领域应用[5]。同时，新世纪是大生命科学的世纪，功能基因组、蛋白质组、代谢组等大科学研究计划强力地推动了基于生物芯片的高通量生物分析技术和研究平台的市场需求。     

栀子苷、胆酸及其配伍干预脑缺血全基因表达谱的比较研究

目的比较脑缺血后清开灵主要组分栀子苷、胆酸及其配伍对基因表达谱的影响。方法建立全脑缺血再灌注小鼠模型,分为栀子苷组、胆酸组、栀子苷 胆酸组。一步法抽提小鼠脑组织的总RNA,Cy3/Cy5标记,16463个小鼠脑oligo片段芯片检测全基因组表达谱,每组重复实验669次。Genespring分析显著变化基因,GO原则分类,层次聚类分析全基因组表达谱信息。结果栀子苷组、胆酸组、栀子苷 胆酸组所致差异表达基因数分别为95、86、102,其中上调63、48、56个,下调32、38、45个基因,共同调节基因19个。3组差异基因集中在代谢和信号转导相关基因方面。重叠基因数栀子苷 胆酸组与胆酸组(30个)多于栀子苷 胆酸组与栀子苷组(25个),前两者及早反应基因如Pip92表达相似,后两者则在炎症相关因子,如NFκB、Irf5、IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ等表达雷同;聚类分析发现栀子苷组表达谱较胆酸组更接近栀子苷 胆酸组;实时定量PCR结果与芯片结果一致。结论①虽然栀子苷组、胆酸组与栀子苷 胆酸组存在共同的调节基因,但栀子苷组偏重于对炎症相关因子,特别是对NFκB、Irf5等炎症介导因子的调控;而胆酸组对Pip92等凋亡前功能基因的调节较为突出;②重叠基因数与聚类分析结果的不一致提示基因分析不能仅局限在差异数量上,而应该深入分析基因功能和组分的关系。     

十五项遗传性耳聋基因突变微阵列诊断芯片的临床应用研究

目的验证十五项遗传性耳聋基因检测试剂盒(微阵列芯片法)在临床耳聋基因检测的准确性及有效性。方法采用420例解放军总医院临床门诊病人或住院病人的全血,其中未携带突变的样本103例,携带基因突变样本317例,包括50例大前庭水管综合征患者;对血样进行随机编盲,并用十五项遗传性耳聋基因检测芯片检测,以九项遗传性耳聋基因检测试剂盒(微阵列芯片法)及测序法作为对比方法进行比较。结果检测结果显示,本组病人样本的各位点检测探针的灵敏度达100%,特异性达100%,与对比方法的检测结果一致性达100%;经χ2检验和Kappa值分析,两种方法的检测结果无显著性差异,一致性较好。结论十五项遗传性耳聋基因检测试剂盒(微阵列芯片法)的临床检测结果稳定、可靠,通量较高,基本满足临床遗传性耳聋基因检测需求,并进一步提高大前庭水管综合征(EVAS)患者的阳性检出率和确诊率。     

2例导管相关感染的治疗的体会

随着我国人口老年化,因为慢性病到医院就医中占了很大的比例。这种病人病情复杂,免疫力低下,病情发展快,其中很大一部分因为病情需要上了中心静脉置管。中心静脉置管方便中心静脉压测定,给药、补液及肠外营养支持等治疗很方便,最近几年来已广泛在临床开展。笔者将治疗2例导管相关感染的治疗体会报道如下。     

基因芯片技术及其在药学领域的应用

１引言 １９９５年，Ｓｃｈｅｎａ［１］在《ｓｃｉｅｎｃｅ》杂志上发表文章，他把拟南芥菜植物的ｃＤＮＡ文库中的４８个ｃＤＮＡ用ＰＣＲ方法扩增后，把ＰＣＲ产物固化在玻璃片上，制成基因芯片（ ＤＮＡ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ，也称 ＤＮＡ芯片）。然后从拟南芥菜的不同组织中提取ｍＡＮＡ反转录得到带荧光标记的ｃＤＮＡ，把不同组织来源的ｃＤＮＡ混合后与玻璃片上的ＤＮＡ进行杂交，用荧光双通道扫描系统对杂交点的荧光信号进行扫描分析，得到了拟南芥菜不同组织中基因的表达情况。自Ｓｃｈｅｎａ的成功报道后，短短四五年时间，有关…     

基因芯片用于SARS早期诊断和病毒载量时相监测研究

目的：采用基因芯片技术对严重急性呼吸综合征(SARS)患者进行病毒载量时相监测，为SARS早期诊断提供参考指标。方法：4例确诊非重症SARS患者，在病程的3～30d中，间隔2-6d共7次连续采样。检测标本种类为血液和呼吸道分泌物(痰或鼻、咽拭子)。血标本26份，呼吸道分泌物标本24份．共计50份。对SARS—CoV复制酶(replicase)1A、刺蛋白(spike glycoprotein)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein)的编码序列区域进行检测和杂交。基因芯片有严格的反应内控体系和防止污染手段。结果：4例SARS患者在病程第4天第1次采样时，2例患儿呼吸道标本阳性，在病程9～18d第2、3次采样时，4例患者的所有标本检测均为强阳性或中等程度阳性。在病程18～23d、第4、5次采样时，所有标本均表现为阳性程度减弱或转为阴性。到病程的22—30d第6、7次采样检测时．4例患者的呼吸道分泌物和血标本已全部无病毒核酸检出。结论：基因芯片技术为SARS早期诊断和病毒载量时相监测提供了有参考意义的实验数据．     

采用信息技术提高中药材GAP基地建设质量的探讨

国家食品药品监督管理局于2 0 0 3年12月开始实施的中药材GAP基地认证揭开了我国中药材生产现代化的新篇章[1 4] 。建设GAP基地不仅需要完善的硬件设施,还需要用信息管理工具来收集、处理、储存、分析和上报大量的数据,其中包括涉及生态环境、种子、栽培、施肥、病虫害、采收、加工、包装、储藏、运输等原始记录及标准操作规程SOP(standardoperat ingprocedure)的研究资料,还包括人员、场地、设施、文件、管理规章等基地管理资