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1.
目的:构建人自噬受体蛋白p62的真核表达质粒,初步探索p62在氧化应激中的功能。方法:从HeLa细胞系中扩增SQSTM1基因,插入真核表达载体nFLAG/pRK5,构建p62的重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5。采用HEK293T细胞表达带有FLAG标签的重组p62蛋白,免疫共沉淀法观察p62和核因子E2相关因子2(Nrf2)相互作用。结果:重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5经琼脂糖凝胶电泳和测序对比均与预期结果一致,Western blot实验中p62蛋白可正常表达,且大小与预期结果一致。免疫共沉淀和蛋白质谱证明p62与氧化应激转录调控蛋白Nrf2可相互作用。结论:采用真核表达系统成功表达p62蛋白,并发现其与Nrf2可相互作用,为进一步研究p62与Keap1-Nrf2通路关系提供依据。  相似文献   
2.
目的为了判定服用木棉花对人体的母体毒性、胚胎毒性和致畸性,确定木棉花对试验动物的食用安全性及其对人的安全食用量;为后续将其做为新资源食品进行开发和利用提供毒理学安全性的依据。方法采用食品安全国家标准中的致畸试验方法,将木棉花样品按3 300、6 600和13 300 mg/kg·bw的剂量分为3组,采用灌胃的方式给药,溶媒对照组用等量纯水灌胃;阳性对照组腹腔注射环磷酰胺8 mg/kg。妊娠第20天处死孕鼠,解剖并检测记录着床数、黄体数、吸收胎、早死胎、晚死胎和活胎数子宫连胎重,计算孕鼠体重增重、体重净增重,检查胎鼠外观、内脏和骨骼的畸形情况。结果木棉花各剂量组对SD孕鼠母体未见明显毒性、对胎鼠未见明显胚胎毒性和致畸性。结论在本实验研究剂量范围内,木棉花样品未见致畸作用,NOAEL为13 300 mg/kg·bw。  相似文献   
3.
目的 分析小儿轮状病毒性肠炎应用炎琥宁及蒙脱石散治疗的临床疗效及安全性.方法 将80例小儿轮状病毒肠炎患者随机分为两组,每组患者40例,分别给予蒙脱石散治疗(对照组)及联合炎琥宁治疗(观察组),观察两组经治疗后的临床治疗效果及药物不良反应发生率.结果 两组经治疗后退热时间、止泻时间、脱水纠正时间、抗原转阴时间及住院时间均存在显著差异,观察组以上观察指标改善时间均明显短于对照组(t=5.3957,P=0.0000;t 17.5852,P=0.0000;t=10.5886,P=0.0000;=6.3800,P=0.0000;t=6.9887,P=0.0000).观察组患者在接受治疗3天后的治疗总有效率同样明显优于对照组(x2=10.3127,P =0.0013).此外两组在住院治疗期间药物不良反应发生率比较未见统计学差异(x2 =0.7207,P=0.3959),两组治疗前后肝肾功改变比较未见统计学差异(t=0.5678,P=0.2858;t=1.3600,P=0.0888;t =0.4065,P=0.3427;t-0.3257,P=0.3727).结论 炎琥宁、蒙脱石散联合应用可显著提高小儿轮状病毒性肠炎的治疗效果,并且安全可靠.  相似文献   
4.
目的:分析总结鼻腔胸膜外孤立性纤维瘤(EPSFT)的临床表现,影像学征象,病理特征,治疗及预后,以提高对鼻腔EPSFT的诊治水平。方法:报告2例EPSFT患者的住院病例资料,分析其临床症状,影像特征,血常规生化指标,治疗方法,光镜病理,免疫组织化学特点和随访结果。结果:①鼻腔EPSFT以鼻塞、鼻出血为主要临床症状。②鼻腔EPSFT的放射影像学表现与鼻腔肿瘤无特征性区别,增强扫描均有增强表现,与鼻腔血管瘤有相似之处。③鼻腔EPSFT患者血常规与生化检查无特异性改变。④鼻腔EPSFT确诊依赖病理学检查及免疫组织化学特征。⑤2例患者均接受手术治疗,彻底切除肿瘤。1例随访2年,1例随访1年,均无复发。结论:建议术前行DSA检查与血管栓塞,手术完整切除肿瘤是首选的、惟一疗效确切的治疗方法,预后一般较好。  相似文献   
5.
目的建立携带BARF1基因的人胃上皮细胞株,为探讨EB病毒编码BARF1基因对胃上皮细胞的影响而建立体外模型。方法构建携带BARF1基因的真核载体pcDNA3.1(+)-his/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,G418筛选单克隆。用CCK-8检测未转染的GES-1、转染空载体GES-1及转染BARF1基因的GES-1增殖状况。结果双酶切鉴定,666bp的BARF1基因片段已连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)-his。转染细胞通过G418筛选,获得了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株,转染BARF1基因的GES-1细胞增殖速度显著高于未转染的GES-1和转染空载体GES-1细胞(P〈0.01)。结论建立了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。  相似文献   
6.
7.
目的探讨春砂叶油的遗传毒性。方法通过骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验,将春砂叶油以0.53 g/kg体质量、1.06 g/kg体质量、2.11 g/kg体质量的剂量灌胃给予小鼠,观察小鼠骨髓细胞微核率和精子畸形率。结果低、中、高剂量组雄鼠骨髓细胞微核率分别为1.4‰、1.4‰、1.2‰,雌鼠微核率分别为1.8‰、1.2‰、1.8‰,与溶剂对照组比较差异无显著性(P>0.05);低、中、高剂量组小鼠精子畸形率分别为2.0%、2.1%、2.2%,与溶剂对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论春砂叶油对哺乳动物体细胞染色体及生殖细胞无致突变作用,未显示明显遗传毒性。  相似文献   
8.
钙调蛋白(calmodulin,CaM)是广泛存在于真核生物体内的一种多功能蛋白质,是Ca2+在体内的一个重要受体。CaM通过Ca2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶及CaMKⅡ,调节心肌细胞肥大相关基因的表达;通过心肌细胞膜上钙通道的磷酸化,造成钙超载,进而诱导心肌肥厚及肥厚心肌心律失常的发生。钙调蛋白在肥厚心肌心律失常机制的阐述,对指导临床治疗和开发新的、更有效的药物具有重要的意义。  相似文献   
9.
[目的]探讨叶酸和维生素B12在防治糖尿病的作用及其作用机理。[方法]采用病例对照实验研究方法,观察糖尿病患者叶酸联合维生素B12治疗后血清同型半胱氨酸水平、氧化应激相关指标等的影响。[结果]该治疗可降低糖尿病患者血清同型半胱氨酸、丙二醛(MDA)水平,并可升高一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。[结论]叶酸联合维生素B12干预后,糖尿病患者同型半胱氨酸水平降低,氧化应激状态改善,因此补充叶酸和维生素B12可成为一种早期防治糖尿病的新的、有效的和经济的方法。  相似文献   
10.
目的构建EBV LMP2-LMP1Δ融合基因,初步观察融合基因体内诱导EBV特异性细胞免疫应答的效果。方法 (1)应用PCR方法构建包含EBV-LMP2全长和去除致癌基因的EBV-LMP1Δ融合基因,并将融合基因插入到pcDNA3.1(+)-his真核表达载体中,构建重组表达质粒pcDNA-LMP2-LMP1Δ,Western blot和免疫荧光方法检测融合蛋白的表达。(2)使用pcDNA-LMP2-LMP1Δ及携带LMP1Δ和LMP2基因的重组腺病毒单独或联合免疫Balb/c小鼠,末次免疫1周后应用IFN-γELISPOT方法检测小鼠脾淋巴细胞中EBV特异性CTL水平。结果 (1)真核表达质粒pcDNA-LMP2-LMP1Δ能够在293细胞中表达LMP2-LMP1Δ融合蛋白,融合蛋白分子量大小正确,具有免疫原性。(2)重组质粒pcDNA-LMP2-LMP1Δ免疫小鼠能够诱导出EBV特异性的CTL,但诱导的CTL水平很低,1×106小鼠脾淋巴细胞中平均斑点数只有12个,远远低于LMP1Δ、LMP2重组腺病毒平均495个斑点数的免疫结果。但使用pcDNA-LMP2-LMP1Δ和重组腺病毒联合免疫,与只使用重组腺病毒相比,诱导的EBV特异性CTL水平能够显著提高,1×106小鼠脾淋巴细胞中平均斑点数可达1 001个(P〈0.01)。结论构建的EBV LMP2-LMP1Δ融合基因能够有效表达LMP2-LMP1Δ融合蛋白,并能够在小鼠体内诱导出EBV特异性的CTL反应,与重组腺病毒联合使用,可以提高特异性CTL应答水平。  相似文献   
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