重组腺相关病毒-阳离子脂质体载体的构建及评价

目的探讨重组腺病毒相关病毒（rAAV）-阳离子脂质体（LyoVec）复合载体的构建方法及其转染率评价。方法构建rAAv～GFP，rAAv—LyoVec复合载体及rAAV—GFP—LyoVec。倒置荧光显微镜观察，测定rAAV—GFP，LyoVec—GFP及rAAV—GFP-LyroVec对定量C6细胞的转染率，筛选出高转染率载体。结果rAAV—GFP组24、48、72和96h转染率分别为16％、23％、21％和9％；LyoVec-GFP组为28．5％、33％、32％和11％；rAAV—GFP—Lyovec组为49％、59％、64％和20％。rAAV-GFP—LyoVec纽分别在24、48、72和96h的转染率显著高于rAAV—GFP组（P〈0．01）及LyoVec—GFP组（P〈0．01）。结论新构建rAAV—LyoVec复合载体基因的转染效率远远高于rAAV或LyoVec独立转染。     

鸡抗内毒素卵黄抗体IgY的制备

目的：研究分别应用内毒素（LPS）、类脂A(LipidA)和大肠杆菌突变株15免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量、纯度、效价并筛选最佳免疫抗原。方法：分别应用内毒素（LPS）、类脂A(LipidA)和大肠杆菌J5突变株作为抗原免疫25周龄Leghom鸡，水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-PSGE电泳检测抗体纯度，细胞酶联染色和ELISA检测抗体特异性、效价及筛选最佳免疫抗原。结果：3种抗内毒素IgY含量和效价分别为14.4mg/ml和1：12 800（J5）、10.61mg/ml和1：12 800（LPS）、9.26mg/ml和1：3200（LipidA），抗体纯度均为95％左右。结论：大肠杆菌突变株J5和内毒素（LPS）为最佳免疫抗原，免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量和效价最高。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

经雷公藤预处理大鼠异体神经移植后早期组织形态及免疫学观察

目的 观察经雷公藤预处理大鼠异体神经移植后髓鞘损伤程度及急性期免疫排斥反应,探讨雷公藤早期免疫抑制作用及合适用药浓度. 方法取60只3月龄雄性SD大鼠制备右侧坐骨神经干缺损模型,随机分为A、B、C、D、E组5组(n=12).取18只3月龄雄性Wistar大鼠,切取双侧坐骨神经干约15 mm,置入含200、400、800 mg/L雷公藤多甙细胞保存液(各浓度组浸泡12条神经),4℃下浸泡24 h,作为A、B、C组神经修复供体,修复神经缺损;另取6只3月龄Wistar大鼠,切取12条新鲜坐骨神经桥接于D组神经缺损处;E组将切下的自体坐骨神经立即行原位缝合.术后不同时间对移植神经行大体、光镜、电镜观察,检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)含量变化及免疫组织化学分析移植物CD4 、CD8 T细胞入侵情况. 结果 术后1周,A、B、C组神经纤维形态及结构较完整,炎性细胞浸润程度较D组轻;术后1、2、4周,A、B、C组组织形态学观察结果 相似,移植神经片段外形及结构清晰,与周围结缔组织粘连均较D组轻;术后48h及1、2、4周,各组均有不同程度髓鞘损伤,各时间点坐骨神经MBP含量B组最接近E组,两组差异无统计学意义(P＞0.05).术后1、4周,A、B、C组CD4 ,CD8 分子的IA值与D组比较,差异均有统计学意义(p＜0.05). 结论 雷公藤能有效降低异体神经移植术后早期急性排斥反应,对髓鞘发挥一定的保护作用.     

bcl-1基因编码蛋白在胃癌中的表达及意义

ｂｃｌ－１基因编码蛋白在胃癌中的表达及意义肖玉平辛彦赵凤凯隋成光任常山一、材料和方法收集中国医科大学肿瘤研究所１９９３年～１９９５年手术切除之胃癌大体标本共４９例，早期７例，进展期４２例，进一步按Ｂｏｒｍａｎｎ分型。伴淋巴结转移３５例，伴肝转移２例，...     

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p27^kip1在骨肉瘤中表达的研究

目的：探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p27^kip1在骨肉瘤发生中的作用。方法：应用免疫组织化学方法（S－P法）检测27例传统骨肉瘤、4例皮质旁骨肉瘤和12例良性骨肉瘤中p27^kip1的表达,表达程度采用半定量方式判定。结果：骨肉瘤中p27^kip1表达的阳性率为100％,良性骨肿瘤中表达的阳性率为75％,两者间有非常显著性差异（P＜0．01）。骨肉瘤不同分化与阳性半定量间无相关性（P＞0．05）。结论：p27^kip1蛋白表达与骨肉瘤的发生有关,但与骨肉瘤的分化程度无关。     

抗脆弱类杆菌和产气荚膜杆菌McAb池在外科感染快速诊断中的应用

目的 制备抗脆弱杆菌和抗产气荚膜杆菌单克隆抗体池,并用于快速诊断及时指导临床治疗。方法 采用间接免疫荧光抗体染色法（IFA）和免疫酶标抗体染色法（ELA）对我院1998～1999年191例外科感染患者的标本进行细菌学检测,并与常规培养法进行比较。结果 3种方法从191份标本中分别检出脆弱类杆菌53株（27.7%）和55株（28.8%）以及25株（13.1%）;检出产气荚膜杆菌12株（6.3%）和11株（5.8%)以及6株（3.1%）。IFA和ELA法2种厌氧菌检出率明显高于CM法。但IFA和ELA法之间检出率差异无显著性。结论 自制脆弱类杆菌和抗产气荚膜杆菌的McAb池,检测平时常见的脆弱类杆菌和战时常见的产气荚膜杆菌,敏感性高,简便,快速、便于推广。     

WT1基因对肾胚瘤细胞系G401细胞肿瘤逆转的研究

目的 肾胚瘤是一种较常见的儿科实体肿瘤，该肿瘤的发生与抑癌基因WT1密切相关。本研究的目的是利用脂质体介导转染法将WT1cDNA导入G401细胞，研究WT1基因对G401细胞生长凋亡及致瘤性的作用。方法 通过Western blot检测WT1基因在肾胚瘤中的表达、采用碘化丙锭(PI)染色法检测G401细胞的凋亡情况、并且对G401的致瘤性进行分析，探讨WT1基因在肾胚瘤发生及治疗中的作用。结果 WT1 DNA可诱导G401细胞凋亡，并且使其致瘤性有所降低。结论 该结果为确定WT1在肾胚瘤病因方面的作用、为肾胚瘤的基因治疗提供重要的依据。     

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p27 Kip1在肾癌中表达的研究

目的：研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子（ｃｙｃｌｉｎ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ, ＣＤＫＩ）ｐ２７ Ｋｉｐ１ 在肾癌中表达情况,探讨ｐ２７ Ｋｉｐ１ 在肾癌预后方面的应用价值。方法：应用免疫组织化学方法检测１０９例肾癌（肾透明细胞癌６９ 例,肾颗粒细胞癌２０例,混合细胞癌１１例,未分化癌９ 例）ｐ２７ Ｋｉｐ１ 蛋白表达情况,并探讨ｐ２７ Ｋｉｐ１表达与肾癌Ｒｏｂｓｏｎ 分期的关系。结果：肾癌ｐ２７ Ｋｉｐ１ 阳性表达率为３７．６％ ;６９ 例肾透明细胞癌ｐ２７ Ｋｉｐ１ 阳性表达与Ｒｏｂｓｏｎ 分期各期之间差异无显著性（ Ｐ＞ ０．０５）;而对另外３ 种病理类型肾癌的分析发现,ｐ２７ Ｋｉｐ１ 阳性表达随Ｒｏｂｓｏｎ 分期增加而降低（Ｐ＜ ０．０５）。结论：细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子ｐ２７ Ｋｉｐ１ 失活或低表达可能是肾透明细胞癌发生过程中的早期事件,免疫组织化学方法检测ｐ２７ Ｋｉｐ１蛋白表达在除肾透明细胞癌之外的其他病理类型肾癌预后方面具有一定的应用价值