负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒对人肝癌细胞株增殖的影响

目的 包装负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒(Ad-miR149),并检测其对人肝癌细胞株增殖的影响.方法 全基因合成microRNA-149前体核苷酸序列,插入腺病毒穿梭质粒的多克隆位点,随后与包装质粒共转染人胚肾293细胞,包装负载microRNA-149的复制缺陷型腺病毒;采用MMT方法检测Ad-miR149对人肝癌细胞株增殖的影响.结果 成功包装负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒,采用倍比稀释法检测病毒滴度为5× 109 pfu/ml.采用电子显微镜技术,观察到HEK293细胞中大量包装病毒颗粒.采用PCR扩增,Ad-miR149可获得腺病毒及microRNA-149特异片段,而对照Ad-LacZ只能扩增出腺病毒特异片段;采用MTT方法发现,Ad-miR149可显著抑制肝癌细胞株增殖.结论 成功包装负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒并初步证实其对肝癌细胞增殖的抑制作用.     

急进高原遂行任务对汽车兵心理应激和心理弹性的影响

目的探讨由低海拔环境急进高海拔环境遂行军事运输任务对汽车兵心理应激与心理弹性的影响,为高原汽车兵心理应激干预提供科学依据。方法以由低海拔环境急进高海拔环境执行军事运输任务的川藏线某部汽车兵126人为研究对象,选取症状自评量表(SCL-90)、状态-特质焦虑问卷(STAI)、特质应对方式问卷(TCSQ)、艾森克个性问卷(EPQ)、心理弹性量表(CD-RISC)作为心理应激及复原力指标,在执行任务前3 d(营区,海拔600 m)、执行任务后第2 d(藏区,海拔4100 m)进行团体心理测试。结果 (1)执行任务后,汽车兵SCL-90总均分(1.92±0.67)及各因子分均显著高于执行任务前和常住高原汽车兵(P<0.05或P<0.01);CD-RISC中坚韧性、力量、乐观因子分及TCSQ中积极应对因子分均显著低于执行任务前(P<0.05或P<0.01);TCSQ中消极应对因子分及STAI中状态焦虑、特质焦虑因子分均显著高于执行任务前(P<0.05或P<0.01)。(2)执行任务后汽车兵SCL-90总分及STAI因子分与消极应对、稳定性及精神质因子分呈显著正相关(r=0.214~0.715,P<0.01),与积极应对、内外向、掩饰性、坚韧性、乐观性、力量性因子分呈显著负相关(r=-0.169~-0.599,P<0.01)。回归分析结果显示,对执行任务后汽车兵SCL-90总分有显著影响的因素依次为:消极应对、特质焦虑、乐观性、状态焦虑、稳定性、坚韧性、精神质,7个变量的决定系数R2=0.65。结论急进高海拔环境执行军事运输任务后,汽车兵心理健康水平降低;人格特质、应对方式和心理弹性是影响汽车兵心理应激和心理健康的重要中介调节因素。     

检测DENV-2活病毒含量RTCA标准曲线法的建立

目的利用实时无标记细胞分析系统(real-time cellular analysis,RTCA)建立半数细胞指数时间(CIT50)与病毒滴度(TCID50)相关性的标准曲线,评估RTCA技术在监测2型登革病毒(DENV-2)感染BHK细胞后引发细胞病变效应(CPE)中的可行性和应用价值。方法检测不同培养条件下BHK细胞的CI值变化,筛选合适的初始细胞接种密度及血清浓度;应用RTCA分析已知不同TCID50滴度DENV-2感染BHK细胞的CIT50值,构建CIT50-TCID50标准曲线,计算回归方程;收集DENV-2感染C6/36细胞后第1~4d的培养上清(D1,D2,D3,D4),利用RTCA法和TCID50法分别检测上清中DENV-2滴度,分析CIT50-TCID50标准曲线法的灵敏度和可行性。结果 BHK细胞以初始接种密度为2×104个/孔,血清浓度为2%的培养条件为最佳;不同滴度DENV-2感染后BHK细胞的生长曲线均左移,CIT50与TCID50间呈线性负相关,线性方程为y=-7.007x+75.546(R2=0.9854);不同时间感染C6/36细胞培养上清中病毒含量(logTCID50/mL):RTCA标准曲线法为4.90±0.05(D2)、6.18±0.20(D3)、6.04±0.10(D4);传统TCID50法为0(D1)、6.25±0.49(D3)、5.87±0.35(D4)。结论利用RTCA技术建立的CIT50-TCID50标准曲线法,可用于已知DENV-2在BHK细胞的定量检测,结果较TCID50法更客观,且该法操作便捷且灵敏度高,为评估DENV-2感染性活病毒颗粒的毒力提供了新的技术手段。     

综合心理行为训练对新兵心理应激的干预效果

目的探讨综合性心理行为训练对集训期新兵心理应激的干预效果,寻求调控新兵心理应激和促进心理健康的有效方法。方法以某部集训期新兵为研究对象,随机分为干预组(216人)和对照组(220人)。对照组进行常规军事训练;干预组在此基础上进行综合性心理行为训练,共2个月。采用应激反应问卷(SRQ)、状态特质焦虑问卷(STAI)、艾森克个性问卷(EPQ)、特质应对方式问卷(TCSQ)于干预前和干预第60天进行心理应激及相关因素评估。结果 (1)干预组干预前SRQ总分及各因子分与消极应对、状态焦虑、特质焦虑、神经质及精神质呈显著正相关(r=0.113~0.698,P均0.01),与内外向、掩饰性呈显著负相关(r=-0.188~-0.304,P均0.01);多元线性回归分析显示,影响SRQ总分的因素从大到小依次为:消极应对、神经质、状态焦虑、精神质,这4个变量的决定系数R2=0.560。(2)干预组干预第60天SRQ总分和各因子分均显著低于干预前和对照组(P0.05,P0.01);而在同一时间点上,对照组SRQ总分和各因子分前后比较,差异均无显著性(P0.05)。结论新兵心理应激受多因素影响,综合性心理行为训练能有效减轻新兵心理应激,促进心理健康。     

个性化的青光眼小梁切除滤过手术疗效观察

目的对比个性化青光眼小梁切除术与常规小梁切除术近期、远期效果的差异。方法2010—2011年在我院治疗的原发性慢性闭角型青光眼患者56例（56眼）,随机分为改良组和对照组,每组28例。改良组根据不同个体情况,选用Tenon囊切除,调整巩膜瓣厚薄和虹膜切除面积,滤过口予以少量粘弹剂,巩膜瓣缝合调整松紧;对照组采用常规青光眼小梁切除术。术后随访6个月。结果改良组术后近期、远期的治愈率、有效率优于对照组（P〈0．05）,虽然早期角膜水肿、滤过泡渗漏稍多,但对症处理后2W内消失。近期眼压两组无统计学差异（P〉0．05）,远期眼压改良组优于对照组（P〈0．01）。改良组功能性滤过泡远期优于对照组（P〈0．05）。结论在青光眼小梁切除术被重新认识的时候,采取个性化的青光眼滤过手术,较常规小梁切除术有较好的临床效果。     

维和医疗队待命军人心理健康与情绪、个性特征分析

目的评估维和医疗分队待命军人的个性特征、情绪和心理健康状态,为有针对性的心理健康教育提供依据。方法应用一般情况问卷、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、卡特尔16项个性因素测定(16PF),对57名维和医疗分队待命军人进行测评。结果受测者SAS因子分显著高于国内成人常模(P<0.01),SDS因子分显著低于国内成人常模(P<0.05);与中国军人常模比较,16PF呈高聪慧性、稳定性、兴奋性、世故性、自律性,低乐群性、敏感性、怀疑性、忧虑性和紧张性特点;抑郁总分与个性特征无显著相关性,焦虑因子分与实验性和紧张性显著相关;心理健康因素(Y1)与乐群性、稳定性、恃强性、兴奋性、敢为性、忧虑性和紧张性显著相关。结论受测者整体心理健康状态较好,具备胜任维和任务的人格特征,情绪适度焦虑,针对性的心理健康教育重点应放在缓解焦虑情绪、加强与人合作及环境适应能力方面。     

一期手术重建治疗膝关节脱位合并多发韧带损伤

目的探讨膝关节脱位合并多发韧带损伤急性期行一期韧带重建术后近期疗效。方法 2005年1月至2011年12月,对39例膝关节脱位患者采用一期同种异体肌腱移植重建前后交叉韧带,锚钉缝合修复内侧副韧带,部分股二头肌腱重建修复外侧副韧带损伤。术后早期康复锻炼。结果患者术后均未发生关节内感染。全部切口Ⅰ期愈合。术后均获至少12个月随访。2例患膝较健侧屈曲缺失25°,其余膝关节活动度恢复正常。膝关节Lysholm评分为82～95分,平均87.6分。后抽屉试验Ⅰ度阳性6例,Lachman试验阳性(Ⅰ度)6例,内、外翻试验及前抽屉试验均为阴性。结论对外伤性膝关节脱位合并多发韧带损伤于急性期一期重建,近期疗效满意。     

灵芝多糖调控PI3K/Akt信号通路抑制肝癌细胞恶性表型

目的：观察灵芝多糖对肝癌细胞SK-HEP-1和Huh-7增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响,同时探讨其可能的作用机制。方法：将肝癌细胞SK-HEP-1和Huh-7作为主要研究对象,设立空白组和灵芝多糖低、中、高组（3.5、7、14 g·L-1）。细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测灵芝多糖对肝癌细胞增殖能力的影响;划痕实验检测灵芝多糖对肝癌细胞迁移能力的影响;流式细胞术测定灵芝多糖对肝癌细胞周期的影响;Hoechst33258染色法测定灵芝多糖对肝癌细胞凋亡的影响,通过蛋白免疫印迹法检测灵芝多糖对肝癌细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平的影响。结果：与空白组比较,灵芝多糖低、中、高组SK-HEP-1和Huh-7细胞增殖和迁移能力降低（P<0.05）;灵芝多糖低、中、高组G1期细胞比例升高（P<0.05）,S期和G2期细胞比例降低（P<0.05）;灵芝多糖低、中、高组可以诱导2种肝癌细胞凋亡,并且药物浓度越高作用越明显。与空白组比较,灵芝多糖低、中、高组PI3K和Akt的磷酸...