端粒酶反义寡核苷酸抑制端粒酶活性和诱导肺腺癌A549细胞凋亡的研究

目的 研究端粒酶反义寡核苷酸在肺腺癌A549细胞中抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡的能力.方法 用脂质体将荧光标记的端粒酶反义寡核苷酸转染入肺腺癌A549细胞后,TRAP-PCR-ELISA检测端粒酶活性变化,凋亡细胞用透射电镜(TEM)观察,TUNEL法检测各组细胞凋亡率.结果 转染72h后,端粒酶反义寡核苷酸进入A549细胞内,端粒酶活性显著降低.透射电镜下,端粒酶反义寡核苷酸转染组细胞凋亡增加,细胞凋亡率比其他组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 端粒酶反义寡核苷酸能靶向端粒酶,抑制其活性,并诱导肺腺癌A549细胞凋亡.     

脆性X相关蛋白Ⅰ结构及功能研究进展

脆性X相关蛋白Ⅰ(FXR1P)是脆性X蛋白家族成员,与脆性X智力低下蛋白(FMRP)的氨基酸序列60%以上相似。FXR1P分子中存在KH-Ⅰ结构域、RGG结构域、Agenet结构域、NLS、NES信号、NoS等结构;FXR1P可作为转录调节因子参与特定mRNA的转录与翻译。研究表明,FXR1P可以参与miRNA调控途径,实现对靶mRNA的调节。从结构和功能方面对FXR1P研究进展作一综述。     

人NKG2D基因重组质粒的构建及鉴定

目的 构建人NKG2D重组质粒。方法 应用RT-PCR，自健康人外周血单个核细胞(PB-MC)中获取NKG2D cDNA，克隆于pMDl8-T载体中，并经酶切和测序鉴定。结果 重组载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。结论 成功地构建了重组载体pMDl8T-NKG2D，为研究NKG2D的生物学活性奠定了基础。     

酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白

目的：应用酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白质，通过对相互作用蛋白质的筛选及研究，探讨CLN8的功能，为NCL8和NCLs疾病群的发病机制研究提供线索，并为疾病的蛋白质相互作用网络提供资料。方法 应用酵母双杂交技术，以pLexA-CLN8为诱饵质粒筛选人胎脑cDNA文库，得到Leu+LacZ+阳性克隆，进一步进行验证，并对验证后的阳性克隆的外源性片断进行测序及同源性分析。结果 从人胎脑cDNA文库中筛选得到60个Leu+LacZ+阳性克隆；将获得的具有外源性片段的文库质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母体内对相互作用进行验证，共获得阳性克隆22个；对验证后阳性克隆测序并进行同源性分析，共获得不同的候选基因序列10个。结论 应用酵母双杂交系统，共筛选得到10个不同的基因，其编码蛋白与CLN8P有相互作用，可能与NCLs 发病机制相关。     

生物化学双语教学的实践与探讨

21世纪是知识经济时代,为了适应新时代的要求,培养高素质的复合型人才及专业人才已成为各高等院校面临的挑战。为此,各高校进行了一系列的教学改革,其中实行双语教学是高校教育改革的新举措,加强学生英语水平和专业能力的培养是各高校实施双语教学改革的重要目标。现将我校生物     

人白细胞介素18（hIL—18）的cDNA基因克隆及序列测定

目的：克隆人白细胞介素18（IL－18）全长cDNA基因,进一步探讨人白细胞介素18的功效。方法：采用RT－PCR的方法从人肝组织中扩增出人白细胞介素18（IL－18）基因,并克隆到真核表达的绿色荧光蛋白报告载体pEGFP-NI中,结果：经PCR及DNA序列测定得以证实其序列与文献报导一致,结论：该实验成功地克隆了IL－18cDNA,并将其重组构建了含有IL－18cDNA的真核表达载体pEGFP-N1-IL18。     

骨巨细胞瘤中p185和p53的免疫组化研究

目的　探讨p185和p53在骨巨细胞瘤 (GCT)的表达及GCT病理分级和复发的关系。方法　应用SP免疫组织化学方法检测 p53和 p185在 52例GCT(GCT按Jaffe分级 :Ⅰ级 15例、Ⅱ级 2 5例、Ⅲ级 12例 )中的表达。结果　 11例 p185表达呈阳性 ,阳性率 2 1 2 % ,14例 p53表达阳性 ,阳性率 2 6 9%。其阳性表达与病理分级差异均无显著性 (P >0 0 5)。p53和 p185在复发和无复发的病例中 ,阳性表达率分别为 38 5%、15 4 %和4 6 2 %、2 0 5%。两者同时阳性表达的有 4例 ,p53和p185同时过表达与GCT病理分级无关 (P >0 0 5)而与其复发有显著性差异 (χ2 =6 12 5,P <0 0 5)。结论　p185和p53在GCT中的表达与病理分级无关而与其复发有关。所以 ,我们认为骨巨细胞瘤时 p53和 p185过度表达的临床意义有待进一步研究。     

壳聚糖碘液的制备及抗真菌活性研究

目的 制备壳聚糖碘溶液,并检测其体外抗真菌性能。方法 以低分子壳聚糖为载体与碘络合,通过紫外、红外光谱测定其化学结构;采用RPMI 1640培养基稀释法测定壳聚糖碘液的最小杀菌和抑菌浓度。结果 壳聚糖与碘形成了一种水溶性络合物-壳聚糖碘,且对几种常见真菌的最小杀菌与抑菌浓度达到1：64以上。结论 壳聚糖碘液具有良好的抗真菌作用,可开发成一种新型的抗真菌药物。     

人类β—珠蛋白基因5’—1559bp上游转录调控区的重组及表达

目的 探寻人类β－珠蛋白基因5′－帽位上游新转录调控元件。方法：利用重组DNA技术,构建及克隆3人含有人类β－基因不同5‘－帽位上游片段的荧光素酶报告基因重组载体（pGL2-promoter/SB-β^RHB734、pGL2-promoter/SB-β^R AB573、pGL2-promoter/SB-β^RHfB263）,分别将其导入Hela细胞中,采用β-半乳糖苷酶报告β-半乳糖苷酶报告基因为转移效率内对照,空白的荧光素酶基因载体为基础对照,进行荧光素酶活性比较。结果 3个基因片段载体构建符合设计,其相对抑制活性分别为59．74％、80．97％、79．42％。结论 初步提示人类β－基因5‘帽位上游－2132～－1822bp片段及－1822～15559bp片段内可能存在起负调控作用的顺式作用元件（抑制子）,而－2277bp～-2132bp片段间未检出报制子或增强子活性存在。 此初步结果尚需进一步研究证实和阐明其结构与功能的关系。