COPD大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体降解通路与IL-10相关性的研究

目的：研究 COPD 大鼠模型的骨骼肌泛素(Ub)-蛋白酶体降解途径中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达,肿瘤坏死因子α(TNF-α)和炎症抑制因子 IL-10在大鼠血清和骨骼肌中含量变化,探讨 IL-10在 COPD 骨骼肌蛋白高分解过程中的作用及调控机制。方法成年雄性 SD 大鼠45只,其中分为模型组30只、对照组15只,采用反复熏香烟+气管内注入脂多糖法复制 COPD 大鼠动物模型。蛋白质印迹法分别检测大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达。用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中 IL-10和 TNF-α的含量。结果模型组膈肌、肋间肌、腓肠肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白的相对表达量显著增加。在模型组中,血清和骨骼肌肌内 TNF-α较对照组显著升高,IL-10表达均下降[血清(44.68±8.67)vs (75.96±10.59),膈肌(50.55±7.41)vs (80.06±9.22),肋间肌(47.47±8.98)vs (78.10±7.21),腓肠肌(48.60±10.88)vs (76.77±8.92),P <0.01]。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10和 TNF-α水平呈负相关(血清 r =-0.67,膈肌 r =-0.78,肋间肌 r =-0.80,腓肠肌 r =-0.77,P <0.05)。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10都与中性粒细胞百分比、E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白相对表达量呈负相关(血清 r =-0.80、r =-0.73、r =-0.69、r =-0.81；膈肌 r =-0.83、r =-0.81、r =-0.75、r =-0.79；肋间肌 r =-0.81、r =-0.80、r =-0.74、r =-0.54；腓肠肌 r =-0.74、r =-0.69、r =-0.71、r =-0.62,P <0.05)。血清 IL-10与骨骼肌IL-10呈显著正相关(膈肌 r =0.83、肋间肌 r =0.80、腓肠肌 r =0.73,P <0.01)。结论 IL-10的下调在 COPD 炎症中起重要作用,可能参与骨骼肌 Ub-蛋白酶体降解途径降解机制的调控。     

重症监护病房肠球菌呼吸机相关性肺炎临床分析

目的 探讨肠球菌呼吸机相关性肺炎(ventilator-associated pneumonia,VAP)的临床相关因素及病原学特点,以指导临床防治.方法 应用回顾性调查的方法对广州市第一人民医院2003年1月至2007年11月重症监护病房发生的41例肠球菌VAP进行临床病例分析.结果 41例患者均有基础疾病,其中危重疾病如脑血管意外、良恶性肿瘤术后、慢性阻塞性肺疾病、重症肺炎、颅脑挫伤较常见;肠球菌感染中以粪肠球菌为多(63.6%),屎肠球菌为29.5%,肠球菌对临床常见抗生素如环丙氟哌酸、红霉素、青霉素、庆大霉素等耐药率较高,分别为77.3%、86.4%、51.3%、74.4%,其中屎肠球菌对氨苄青霉素和青霉素的耐药率明显高于粪肠球菌(P<0.01,P=0.018),此次分离的肠球菌未发现耐万古霉素菌株,但检出万古霉素中介粪肠球菌3株(6.8%),所有肠球菌均对替考拉宁敏感;41例患者最后死亡21例,病死率达51.2%.结论 肠球菌引起的VAP多发生于接受有创操作及有基础疾病患者,因其多重耐药,病死率高,需加强临床防治工作,以降低VAP的发病率和病死率.     

9慢性阻塞性肺疾病大鼠膈肌萎缩信号通路与白细胞介素17相关性的研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠膈肌萎缩信号通路——泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx和MuRF-1蛋白表达及核转录因子κB（NF-κB）p50表达情况,以及前炎症因子白细胞介素17（IL-17）在大鼠血清及膈肌中的表达,探讨膈肌萎缩的可能调控机制。方法采用气管内滴入脂多糖＋反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。Western blot法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1及NF-κB p50表达,ELISA法测定大鼠血清及膈肌中IL-17的表达。结果 Westernblot结果显示COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1及NF-κB p50蛋白的表达均较对照组明显升高（0.96±0.12比0.53±0.09,0.99±0.10比0.53±0.08,0.95±0.08比0.51±0.16,1.11±0.10比0.64±0.50,P均〈0.01）。ELISA结果显示IL-17在血清及膈肌中的表达均升高（P均〈0.01）。NF-κB p50与E2-14K、MAFbx、MuRF-1水平呈显著正相关（r值分别为0.82、0.92、0.86,P均〈0.01）;血清IL-17与中性粒细胞百分比、NF-κB p50、E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关（r值分别为0.94、0.90、0.85、0.84及0.79,P均〈0.01）;膈肌IL-17与中性粒细胞百分比、NF-κB p50、E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关（r值分别为0.88、0.90、0.72、0.86及0.80,P均〈0.01）;血清IL-17与膈肌IL-17呈显著正相关（r=0.84,P〈0.01）。结论 COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路与NF-κB通路表达上调可能是导致膈肌萎缩的主要原因之一,IL-17可能参与了膈肌萎缩的调控。     

地塞米松对COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路调控机制的研究

目的:探讨地塞米松对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白表达的影响,分析其调控机制。方法:SD大鼠42只,随机分为对照组13只、模型组15只及干预组14只。采用气管内注入脂多糖加反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。蛋白免疫印记方法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1的表达。酶联免疫吸附法测定大鼠血清及膈肌中的TNF-α水平。分析TNF-α及与E2-14K、MAFbx、MuRF-1的相关性。结果:成功建立COPD大鼠模型;COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白的表达均较对照组明显升高(P<0.01),干预组膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1较模型组降低(P<0.01);TNF-α水平与E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(P<0.01)。结论:COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路的表达与TNF-α水平有关,地塞米松降低COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体表达可能与下调TNF-α的抗炎作用有关。     

重视社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的流行病学研究

社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Community—acquired methicillin—resistant Staphylococcus aureus，CA—MRSA）感染及其在社区中的播散近年来出现逐年上升的趋势，是时下引起全球公共卫生人员广泛关注和棘手的一个严重问题。加强CA-MRSA的流行病学研究，对有效追踪传染源、进一步阐明CA—MRSA的致病机制具有重要意义。本文就CA—MRSA感染的流行病学及其研究方法、传播途径、发病机制等作一评述。     

阴沟肠杆菌临床感染分析及药敏监测

目的分析医院阴沟肠杆菌感染的临床分布及耐药性,以指导临床合理用药。方法对医院近2年分离出的阴沟肠杆菌的临床分布特点及耐药情况进行总结分析。结果2005年1月-2006年12月共分离出148株阴沟肠杆菌,菌株来源主要为痰液、尿液,分别占53.4%、16.2%;菌株分布于多个病区;阴沟肠杆菌对碳青酶烯类、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、莫西沙星的敏感性较高。结论阴沟肠杆菌主要引起呼吸道、尿路感染;对三代头孢菌素耐药严重,呈多药耐药性,亚胺培南仍为治疗阴沟肠杆菌严重感染的首选用药。     

阻塞性睡眠呼吸暂停与急性冠脉综合征的相关性研究

目的 观察伴有阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的急性冠脉综合征(ACS)患者胰岛素抵抗水平及纤维蛋白溶解功能,探讨OSAS 与ACS 患者冠脉病变严重程度和预后的关系.方法 选择2009 年6 月至2010 年6 月在我院住院的ACS 患者346 例,应用便携式多导睡眠监护仪对患者进行监测.以呼吸紊乱指数(AHI)≥5 作为界限,共有86 例诊断为OSAS.将ACS 患者分为Non-OSAS 组260 例和OSAS 组86例.检测患者胰岛素抵抗水平及纤溶功能指标,并对患者行冠状动脉造影及经皮冠状动脉腔内介入治疗(PCI).PCI 术后长期随访,记录随访期间主要心脏不良事件(MACE)发生情况.结果 与Non-OSAS 组相比,OSAS 组ACS 患者胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显升高,组织纤溶酶原激活物(t-PA)水平降低,纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平升高,并且冠脉病变更为严重,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05 或P＜0.01).KAplAn-Meier 生存分析发现,随访15 个月,两组患者累积无MACE 事件生存率差异有统计学意义(82.6%比92.3%,Log rAnk 6.724,P＝0.01).结论 合并OSAS 的ACS 患者伴有更为严重的胰岛素抵抗和纤溶功能紊乱,导致冠脉病变更为严重并影响患者的临床预后.     

白介素15与慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌降解的相关性研究

目的 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型骨骼肌降解途径——泛素-蛋白酶体途径与白介素15(IL-15)的相关关系,为有效防治COPD患者骨骼肌蛋白高分解提供理论与依据.方法 成年雄性SD大鼠45只,分为模型组30只,健康组15只,采用反复熏香烟加气管内注入脂多糖法复制COPD大鼠动物模型.实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中E2-14K、MAFbx、Ub基因和蛋白表达.ELISA法检测大鼠血清、膈肌、腓肠和肋间肌中IL-15和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果 COPD模型大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中E2 14K、MAFbx、Ub基因和蛋白表达分别较健康组升高.COPD模型组大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15、TNF-α的水平较健康组升高.大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15和TNF-α水平呈正相关(血清r=0.75;膈肌r =0.81;腓肠肌r=0.82;肋间肌r=0.78,P值均＜0.05).膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15均与E2-14K、MAFbx、Ub相对表达量呈正相关(膈肌r=0.88、r=0.86、r=0.87;腓肠肌r=0.85、r=0.87、r=0.76;肋间肌r=0.85、r =0.80、r=0.84,P值均＜0.05).大鼠造模结束后体质量净增长与血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中IL-15呈负相关(血清r=-0.90,膈肌r=-0.85,腓肠肌r=-0.82,肋间肌r=-0.82,P＜0.05).结论 在COPD模型大鼠中,IL-15可能通过TNF-α共同作用于泛素-蛋白酶体途径影响骨骼肌降解的作用.     

慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌中NF-κB通路的研究

目的：研究COPD大鼠骨骼中磷酸化NF-κB通路蛋白的表达情况及意义。方法：采用气管内滴人脂多糖＋反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。Westernblot方法测定大鼠骨骼肌内磷酸化NF_xB蛋白的表达,ELISA法测定大鼠血清及膈肌中IL-1B的表达。结果：Westernblot结果显示,COPD大鼠骨骼肌中磷酸化NF-κB蛋白的表达均较对照组明显升高（P〈0．01）;ELISA结果显示,IL-1p在血清及骨骼肌中的表达均升高（P〈O．01）;NF-κB与IL-1β水平呈显著正相关（r=1．55,P〈0．01）。结论：COPD大鼠骨骼肌中NF-κB表达上调,IL-1β可激活骨骼肌中NF-κB通路。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对脂多糖致急性肺损伤大鼠的抗炎作用

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对急性肺损伤（ALl）大鼠的抗炎作用机制。方法将雄性SD大鼠54只随机分为对照组、Au组和MG-132组,每组18只。对照组尾静脉注入生理盐水,Au组、MG-132组尾静脉注射脂多糖（LPS）5mg／kg,MG-132组于实验前30min腹腔注射MG-13210mg／kg。三组动物在注射生理盐水或LPS后2、4、8h各随机处死6只,观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿重／干重比值（W／D）,酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞间粘附分子1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达,Westernblot法测定肺组织核因子κB（NF-κB）P65蛋白的表达。结果Au组大鼠病理切片可见明显肺组织充血、水肿、大量炎性细胞浸润等典型Au表现,MG．132组病理学损伤明显减轻。与对照组比较,Au组大鼠2、4、8h肺组织W／D比值及BALF中ICAM．1、TNF-α的表达、肺组织NF-κBP65蛋白的表达均明显升高（P〈0．05）,MG-132组大鼠2、4、8h肺组织W／D比值及BALF中ICAM-1、TNF-α的表达、肺组织NF-κBP65蛋白的表达均较Au组明显降低（P〈0．05）。肺组织NF—κBP65蛋白的表达与ICAM-1、TNF-仪的表达呈显著正相关（P〈0．01）。结论MG-132可改善内毒素性急性肺损伤炎症反应,其抗炎作用可能与抑制NF—κB信号通路的激活有关。