甲状腺癌差异表达cDNA消减文库的构建

目的 应用抑制性消减杂交技术，构建人甲状腺癌与正常甲状腺差异表达的cDNA消减文库。方法 分别从甲状腺癌及正常甲状腺组织中提取总RNA，应用高效、灵敏的抑制性消减杂交技术，构建成功cDNA消减文库，再转染大肠杆菌进行文库扩增。结果 构建成功具有高消减效率的人甲状腺癌组织cDNA消减文库，文库扩增得到了400个克隆，随机挑取50个制备质粒，酶切分析均得到50bp-400bp大小插入片段，这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段。结论 人甲状腺癌组织cDNA消减文库的建立为进一步克隆甲状腺癌特异性表达的新基因奠定了基础。     

20例肉芽肿性乳腺炎X线表现与病理分析

目的 探讨肉芽肿性乳腺炎的临床、X线和病理特点以及鉴别诊断.方法 全组进行乳腺X线摄片和手术病理组织学诊断.结果 X线表现单发17例,单侧多灶3例.病灶的直径0.6～5.0 cm.形态可为片状或结节状,不规则影,部分呈椭圆形.钼靶X线片上大多数表现为等密度或稍高于腺体密度.边缘多数不清,可有长毛刺或索条状影.病理特点:病变局限在小叶内18例,累及小叶外2例.病变小叶末梢导管完全消失12例,残留腺泡8例.4例有小脓肿形成和脂质吸收空泡,2例有嗜酸性粒细胞浸润.结论 发病的部位以乳晕下居多.乳腺病灶的特点为多数肿物边缘不清、可见分叶状.肿块中等质地的比较多见.     

肝细胞癌组织中PTEN和p27Kip1及cyclinD1蛋白表达及临床意义

目的:研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中PTEN、p27Kip1和cyclinD1蛋白的表达及相互关系,初步探讨它们在肝细胞癌的发生发展中的生物学意义。方法:应用Elivision免疫纽化方法检测53例肝细胞癌组织及癌旁肝组织中PTEN、p27Kip1和cyclinD1蛋白表达。结果: 53例肝细胞癌组织中p27Kip1和cyclinD1蛋白表达的阳性率分别为65％和53％,均高于癌旁肝组织(x2=34．11,x2=29．05,P值均为0．000),肝细胞癌组织中PTEN蛋白表达的阳性率(57％)明显低于癌旁肝组织中的阳性率(96．2％)(x2=20．94, P=0．000),PTEN和cyclinD1蛋白表达与肿瘤大小、TNM分期和是否伴肝硬化无关;与组织分化程度、有无侵袭性呈显著相关(P值分别为0．014、0．003、0．026和0．042)。p27Kip1蛋白表达与肿瘤大小和是否伴肝硬化无关,与肝细胞癌组织分化程度、TNM分期和有无侵袭性呈显著相关(P值分别为0．000、0．008和0．001)。PTEN蛋白表达与p27Kip1和cyclinD1蛋白表达无相关性。结论: PTEN、p27Kip1和cyclinD蛋白在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用。PTEN、p27Kip1和cyclinD蛋白的联合检测对评估肝细胞癌的恶性程度有参考价值。     

24例乳腺黏液癌临床病理分析

目的：探讨乳腺黏液癌的临床病理特点,临床进展及预后。方法：对24例乳腺黏液癌进行病理学形态观察,并采用Max Vision法进行免疫组织化学雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、Her-2、Ki-67染色,对其进行随访和分析并回顾相关文献。结果：18例单纯型乳腺黏液癌,其中1例伴有微乳头结构的乳腺黏液癌,6例混合型。免疫组织化学肿瘤细胞22例ER阳性,19例PR阳性,1例混合型黏液癌HER-2阳性,单纯型黏液癌HER-2均阴性,单纯型乳腺黏液癌和混合型乳腺黏液癌两者具有统计学意义(P<0.05)。结论：乳腺单纯型黏液癌特征是细胞巢漂浮在黏液湖中,并由富含毛细血管的纤维分割。细胞团大小和形态各异,核异型性不明显,ER、PR阳性,HER-2阴性。单纯型乳腺黏液癌(pure mucinous carcinoma,PMCs)生长缓慢,转移率低,可以行保乳手术。伴有微小乳头结构的乳腺黏液癌(mucinous micropapillary carcinoma,MUMPC)与混合型乳腺黏液癌易发生转移,建议行乳腺改良根治手术,术后辅助放化疗。     

肝细胞肝癌组织浸润性淋巴细胞及其因子的表达

目的:分析原发性肝细胞癌(HCC)组织中浸润淋巴细胞的分类及细胞因子表达,探讨肝癌组织免疫微环境改变的意义.方法:收集76例原发性HCC的癌组织及非癌组织标本,应用流式细胞术及免疫组化的方法分别检测组织中免疫细胞的比例;运用流式微球阵列法(CBA)检测HCC组织和非癌组织中Th1/Th2类细胞因子,ELISA法检测TGF-1、VEGF的表达.结果:HCC患者中CD3+T细胞、CD4+ Th细胞、Treg细胞及CD455RO+记忆性T细胞在癌组织中的比例均高于相应的非癌组织,而CD8+ CTL细胞在癌组织中的比例较低;Treg细胞与Th细胞或CTL细胞水平呈负相关;癌组织中早期活化因子CD69在CD3+T淋巴细胞及NK细胞上的表达均低于非癌组织,而癌组织中晚期活化因子HLA-DR在CD3+T细胞表达的水平高于非癌组织.细胞因子IL-10、TGF-1及VEGF在癌组织中表达高于非癌组织.结论:肝癌组织微环境中,抗肿瘤效应性细胞比例下降,而抑制性细胞及其相关因子增加,引发肿瘤浸润淋巴细胞的免疫无能,导致肿瘤发生.     

变性高效液相色谱技术检测非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变的研究

 目的　探讨采用变性高效液相色谱（DHPLC）技术检测表皮生长因子受体（EGFR）基因突变的优势。方法　应用DHPLC技术检测49例非小细胞肺癌（NSCLC）患者EGFR基因第19与21外显子突变情况,并应用DNA直接测序法验证DHPLC检测基因突变的准确性。结果　49例NSCLC患者中,应用DHPLC检测出13例EGFR基因突变;其中第19外显子缺失突变10例（76.92 %）;第21外显子替代突变3例（23.08 %）。DNA直接测序法突变检测结果与DHPLC一致,DHPLC检测EGFR基因突变灵敏度为100 %。结论　DHPLC技术可以快速、准确、大规模筛选EGFR基因突变。     

结直肠癌不同病变阶段K-ras基因突变的研究

目的:研究结直肠癌不同病变阶段K-ras基因变化及其对结直肠癌演变的影响.方法:提取20例结直肠癌患者的原发灶、淋巴结转移灶、远处转移灶、结直肠腺瘤和相应正常结直肠组织的DNA各20 份,经PCR扩增,对产物进行基因序列分析.结果: 正常结直肠组织均表达野生型K-ras基因,结直肠腺瘤、原发灶、淋巴结转移灶和远处转移灶的K-ras突变率分别为20.0%(4/20)、30.0%(6/20)、25.0%(5/20)和30.0%(6/20),有3例远处转移灶出现复合突变.在发生K-ras突变的标本中,结直肠腺瘤、淋巴结转移灶、远处转移灶的突变类型与原发灶的一致性分别为0%(0/4)、40.0%(2/5)和50.0%(3/6).结论:结直肠腺瘤、淋巴结转移灶和远处转移灶不宜作为临床检测K-ras突变的常规标本,但在无法获得原发灶标本时,淋巴结转移灶和远处转移灶的检测结果也有一定的参考价值;结直肠癌发生、发展的过程中,K-ras基因可能在多阶段发生多次不同的突变.     

凝血酶敏感素-2在胃癌中的表达及其临床意义

  目的  探讨胃癌中凝血酶敏感素-2（thrombospondin-2,THBS2）基因表达的临床意义及其与患者临床病理特征的关系,分析THBS2基因表达与胃癌组织中微血管密度（MVD）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达水平的相关性。  方法  采用实时荧光定量PCR技术检测82例配对的胃癌组织及癌旁组织THBS2 mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系;应用免疫组织化学Elivision法检测胃癌组织中MMP-2表达情况,通过CD34免疫组织化学染色评价肿瘤组织MVD;分析THBS2 mRNA的表达与MVD、MMP-2表达的相关性。  结果  THBS2 mRNA在胃癌中的表达高于癌旁组织（P=0.002）;胃癌组织中THBS2 mRNA的表达水平与肿瘤浸润程度、MVD及MMP-2表达密切相关（P=0.023,r=0.35,P < 0.01,P=0.004）,但与性别、年龄、肿物大小、组织分型及淋巴结转移无关（P=0.53,P=0.53,P=0.21,P=0.84,P=0.96）。  结论  THBS2可能在胃癌发生和发展中起重要的作用;THBS2可能通过调节MMP-2的表达,促进肿瘤生长与转移,但其确切的作用及机制有待进一步的研究。      

食管鳞癌组织LSDl表达与预后相关性分析

目的：研究组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1（1ysinespecificdemethylase1,LSDl）在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系,并探讨其与预后的相关性。方法：收集2005—01—01—2006—12—31在福建省肿瘤医院胸外科接受食管癌三野根治术且术前未接受放疗或化疗的食管鳞癌患者135例。免疫组化检测135例食管鳞癌及其配对癌旁正常食管黏膜组织的LSDl表达水平。运用Y。检验分析肿瘤组织LSDl表达与临床病理因素的关系。运用Kaplan-Meier方法和Log—rank检验分析肿瘤组织LSDl表达与患者术后总生存时间的关系。采用Cox模型对食管癌患者预后相关因素进行多因素回归分析。结果：食管鳞癌组织LSDl强阳性表达率为53．3％,在正常食管黏膜组织中为7．6％,差异有统计学意义,x2=9．016,P=0．002。LSDl高表达与性别（x2=0．396,P=0．546）、年龄（x2=2．530,P=0．123）、T分期（x2=1．264,P=0．286）、淋巴结转移（x2=1．136,P=0．343）、TNM分期（x2=0．396,P=0．546）和分化（x2=0．415,P=0．537）无显著相关性,而与生存时间是否超过5年（x2=6．699,P=0．013）显著相关。Cox多因素回归分析显示,淋巴结转移（p=0．001）、肿瘤浸润深度（P=0．004）和LSDl表达水平（P=0．020）是食管鳞癌患者的独立预后因素。生存分析提示,LSDl强阳性组患者预后明显差于LSDl弱阳性组患者,P=0．008。亚组分析显示,在有淋巴结转移的患者中,肿瘤LSDl强阳性与患者预后相关,P=0．014;而在无淋巴结转移的患者中,LSDl强阳性与预后无显著相关性,P=0373结诊．T-Snl在仓管鳞痛钼织申表达上调．其强阳性表达与不良预后相关。