GPR30-PI3K/Akt信号通路对乳腺癌细胞迁移能力的影响研究

目的研究G蛋白偶联雌激素膜受体(GPR30)-磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路对乳腺癌细胞迁移能力的影响。方法分别选取乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-453及MCF-7,采用免疫印迹法检测4种细胞中GPR30的表达情况,将表达量最高的细胞用于后期实验。通过细胞免疫荧光染色检测乳腺癌细胞中GPR30的定位情况;通过免疫印迹法检测不同剂量(0 ng、2 ng、6 ng、10 ng) GPR30激动剂E_2作用乳腺癌细胞后磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达情况;采用划痕实验检测GPR30-PI3K/Akt信号通路活化对乳腺癌细胞迁移能力的影响。结果 GPR30在4种乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDAMB-468、MDA-MB-453及MCF-7中的相对表达量分别为0. 19±0. 03、0. 76±0. 07、0. 62±0. 08、0. 91±0. 09,差异具有统计学意义(P 0. 01)。因MCF-7细胞中GPR30的表达量最高,故以MCF-7细胞为实验对象。经免疫荧光染色可知,GPR30高表达于乳腺癌MCF-7细胞的胞质和胞膜上。随着激动剂E_2使用剂量的提高和刺激时间的延长,pPI3K、p-Akt蛋白表达量均明显增高(P 0. 05),具有时间和剂量依赖性。激动剂E_2最佳使用剂量为10 mg/ml,最佳干预时间为10 min,经激动剂E_2(10 mg/ml)刺激乳腺癌MCF-7细胞10 min后,p-PI3K蛋白表达量显著升高(P 0. 05);而提前采取GPR30特异性阻断剂(G15)进行预处理后,MCF-7细胞中的p-PI3K蛋白表达量显著降低(P 0. 05)。采用激动剂E_2干预后,乳腺癌MCF-7细胞迁移能力明显提升(P 0. 05);而采用GPR30特异性阻断剂(G15)、PI3K特异性阻断剂(LY294002)干预后,乳腺癌MCF-7细胞迁移能力显著降低(P 0. 05)。结论经体外实验表明,GPR30-PI3K/Akt信号通路在乳腺癌中可能具有一定的交叉关系,并且该信号通路异常活化具有参与乳腺癌细胞迁移的作用。     

可吸收螺钉结合缝线治疗交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折

正2010年3月~2014年3月,我科应用可吸收螺钉结合缝线治疗29例膝关节交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折患者,效果满意,报道如下。1材料与方法1.1病例资料本组29例,男23例,女6例,年龄19~62岁。均为新鲜单纯交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折:前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折16例,后交叉     

复方金银花颗粒质量标准提高研究

目的 复方金银花颗粒的原有标准较简单,且有不足,本研究全面提高和完善了复方金银花颗粒的标准,可鉴别出金银花、连翘、黄芩三味药材的真假,可测定出金银花、黄芩的投料多少.方法 建立了金银花、绿原酸、连翘、连翘苷、黄芩、黄芩苷的薄层色谱法(T L C法),可对处方中的三味药材进行定性;建立了绿原酸、连翘苷、黄芩苷的高效液相色谱法(HPLC)法,可对处方中的三味药材进行定量.结果 15家企业23批复方金银花颗粒,依据原标准检验合格率为100％,依据新的检验标准,23批样品的合格率为52％.结论 本文建立的分析方法科学、准确、可靠且简便易行;本研究方法能够更好、更全面的控制大部分企业生产的复方金银花颗粒的质量.     

高效液相色谱法直接拆分药物西孟旦对映体

目的:建立西孟旦的对映体拆分和对映体光学纯度测定方法。方法:使用Kromasil CHI-TBB手性固定相,以正己烷-异丙醇(85～92.5:7.5～15)为流动相,流速1.5 mL·min~(-1),检测波长380nm;流动相中添加0～0.2％乙酸作改性剂,直接拆分了药物西孟旦的对映体,考察了流动相组成和极性添加剂对对映体拆分的影响。结果:结果显示,这种以酒石酸二酰胺为手性中心的手性固定相,在正相条件下,可以对上述药物对映体实现基线拆分。并且通过改变流动相组成,在对映体分离因子基本不变的情况下,可以调节对映体的分高度和保留时间。结论:拆分了药物西孟旦对映体,测定了左旋西孟旦的对映作过量百分率。     

脑肿瘤四例误诊分析

<正> 脑肿瘤由于生长部位不同,个体的耐受性不同,表现出来的临床症状也不同,加之临床医生经验不足、查体不细、综合分析不够,往往造成误诊.现将我科近二年收治的4例脑肿瘤病人误诊情况分析如下.     

高原人通气敏感性的探讨

本文通过用重复呼吸法测定了青海省沱沱河地区(4 700米)18例健康人对低O_2的通气反应和47例健康人的高CO_2通气反应,发现高原人对低O_2和高CO_2通气反应均低于平原人;高原世居组对低O_2和一定浓度内高CO_2通气反应比移居组高。我们认为高原人低通气反应在某种意义上来讲是有益的。     

抑制NFBD1的表达对鼻咽癌化疗敏感性的影响

目的:研究抑制NFBD1表达后,对鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞化疗敏感性的影响。方法:将NFBD1 siRNA导入NPC细胞系,采用RT-PCR和蛋白质印记法检测siRNA对NPC细胞NFBD1表达的抑制效果;NFBD1 siRNA转染后,MTT法分析NPC细胞对化疗药物敏感性的影响。结果:NFBD1 siRNA转染NPC细胞后,能高效、特异地在mRNA水平及蛋白质水平抑制NFBD1的表达;MTT结果分析表明,NFBD1 siRNA转染后,能显著提高NPC细胞系对化疗药物的敏感性。结论:NFBD1 siRNA转染后抑制NPC NFBD1表达,可显著提高其对化疗药物顺铂的敏感性。     

小量煤酚急性中毒致迟发性急性肾功能衰竭一例

<正> [病例]女,30岁。因5天前与爱人口角后吞服“来苏儿”10余毫升。服后10余分钟在当地卫生院用清水洗胃。第二天咳嗽、咯白痰,偶带血丝。第三天可进食奶粉。在当地治疗5天于1990年12月4日转来我院。查体:T37.4℃,P80次/min,R 20次/min,BP22/18kPa 。神志清。巩膜无黄染。口周及前胸皮肤见药物灼伤后之结痂,口腔内无溃疡。双下肺可闻干湿性罗音,心率不快。腹平坦柔软,胃区无压痛,肠鸣音活跃。肾区无叩痛。双下肢无水肿。入院诊断:急性煤酚中毒,双下肺肺炎。住院经过:住院第三天(服药第八天)出现尿少,尿常规:Pr     

藻酸双酯的临床新用途

藻酸双酯钠(PSS)是我国研制生产的用于防治心、脑梗塞的新药。近来不断发现PSS的一些新用途。本文仅此报告如下。 1 治疗高脂血症 血粘度增高症。临床研究证实,PSS可使全血比粘度、血浆比粘度、纤维蛋白原、胆固醇、甘油三脂、β-脂蛋白及LDL-ch/HDL-ch均有显著下降,和明显的抗凝血作用。说明PSS既有稀释血液、增加红细胞变形能力、降低红细胞的聚集性,又有降低血脂的作     

胆绞痛发病的昼夜时间规律初探

目的：探索胆绞痛发作的昼夜时间规律性，为临床胆绞痛的防治提供时间依据。方法：用“十二时辰分析法”、“四时间段分析法”对324例胆绞痛昼夜发病的时间进行统计分析。结果：在昼夜十二时辰中，子时胆绞痛的发生率最高；在昼夜四个时间段中，夜半胆绞痛的发生率最高。结论：胆绞痛发病具有明显的昼夜时间规律性。