极低频磁场对细胞色素氧化酶亚基1基因转录水平的影响

目的　克隆和鉴定本研究室经DD法在Daudi细胞中筛选到的一个极低频磁场的特异反应基因 (MF 1) ,并在多种磁场敏感细胞中证实该基因反应的普遍性 ,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法　克隆、序列分析MF 1片段 ;选择HL 6 0、L12 10和中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)等细胞 ,用Northern技术观察该基因在不同条件的磁场辐照 (5 0Hz磁场 ,磁通密度分别是 0 .1mT和 0 .8mT ,辐照时间分别是 2 0min和 2 4h)后该基因转录水平的变化。结果　克隆测序及与GeneBank同源性比较表明 ,MF 1序列与细胞色素氧化酶亚基 1基因 (CO1)有 10 0 %同源性。HL 6 0、L12 10和CHL等细胞在 0 .1mT、0 .8mT磁场辐照 2 0min后 ,CO1转录水平 (分别为 0 .38± 0 .12、0 .37± 0 .0 4 )均比对照组 (0 .5 8± 0 .12 )下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;辐照 2 4h后 ,3种细胞该基因转录水平 (分别为 0 .4 6± 0 .0 9、0 .4 5± 0 .0 9)亦比对照组 (0 .6 5± 0 .0 6 )下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　CO1是磁场辐照密切相关的反应基因之一。磁场可能通过影响CO1的转录水平来影响细胞色素氧化酶的活力 ,从而影响多种生物学效应     

电磁噪声阻断极低频磁场对细胞缝隙连接功能的抑制效应

目的　探讨电磁噪声对 5 0Hz磁场诱导的细胞缝隙连接通讯功能 (GJIC)抑制的干预作用。方法　小鼠成纤维细胞 (NIH 3T3)受 5 0Hz 0 .4mT极低频磁场或磁场加同等强度的电磁噪声联合作用 2 4h后 ,在激光共聚焦显微镜下 ,采用荧光光漂白后恢复技术 (FRAP)测定细胞的GJIC功能。结果　 0 .4mT磁场单独作用明显抑制细胞的GJIC ,其荧光恢复率为 2 7.6 7%± 5 .12 % ,与对照组(45 .5 7%± 9.72 % )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;而磁场与电磁噪声联合作用 (5 2 .6 1%± 8.30 % )明显拮抗磁场对GJIC的抑制作用 ,与 0 .4mT磁场组的差异有显著性 (P <0 .0 1) ,并与对照组的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　电磁噪声对极低频磁场诱导的GJIC的抑制具有阻断作用     

工频磁场对细胞蛋白质酪氨酸磷酸化影响的研究

目的;研究５０Ｈｚ工频磁场绎细胞浆蛋白质酪氨酸磷酸化的以初步工频磁场生物效 有关细胞信息转导的机制。方法;对分别经两个不同强度的工频磁场作不同时间辐照处理后的细胞,提取其胞浆蛋白质,定量后,以Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法测定并比较细胞胞浆蛋白质酪氨酸磷酸化的程度。     

工频磁场抑制细胞缝隙连接通讯功能的剂量效应研究

目的研究５０Ｈｚ磁场对细胞缝隙连接通讯（ＧＪＩＣ）功能抑制作用的剂量效应关系及其有关机理。方法利用微注射法将荧光染料引入单个中国仓鼠肺来源成纤维（ＣＨＬ）细胞内，以５分钟后的荧光偶合细胞数作为ＧＪＩＣ功能的指标。研究了不同磁场强度、不同辐照时间对ＣＨＬ细胞ＧＪＩＣ的影响。结果工频磁场对ＧＪＩＣ的抑制作用与其强度有关，低强度（００５、０２和０４ｍＴ）的磁场辐照２４小时不能抑制ＧＪＩＣ，高强度（０８和１６ｍＴ）的磁场辐照２４小时能够抑制ＧＪＩＣ。在０～１６ｍＴ范围内，磁场对ＧＪＩＣ的抑制作用不呈“强度窗”效应。将强度固定为０８ｍＴ，５分钟的辐照无作用，１小时的辐照足以抑制ＧＪＩＣ，２４小时的辐照对ＧＪＩＣ的抑制作用最明显。此外，研究发现对ＧＪＩＣ的抑制主要是工频磁场本身的直接作用，而并非由磁场在被辐照物中受感应的电场所致。结论工频磁场对ＧＪＩＣ的抑制具有剂量效应关系。     

工频磁场对星形胶质细胞间隙连接通讯功能的影响

目的　探讨工频磁场 (PFMF)是否有促癌或协同促癌作用。方法　利用荧光光漂白后再恢复法观察漂白细胞荧光强度的恢复以判断经间隙连接的细胞间通讯 ,以相对荧光强度恢复速率(CFIRR)作为对细胞间隙连接通讯 (GJIC)作用的评价指标 ,研究不同磁场强度单独作用或协同佛波酯(TPA)对星形胶质细胞GJIC功能的影响。结果　 3ng/mlTPA作用 1h时CFIRR的中位数 (Md)值为4 .53 % /min ,空白对照组为 9.74% /min ,两组的差异有显著性 (H =1 2 .0 84,P <0 .0 0 5)。 0 .8或 1 .6mT磁场作用 2 4h时CFIRR的Md 分别 8.2 5、6 .68% /min ,与空白对照组比较 ,差异无显著性 (H =32 .61 7,P >0 .0 5)。 0 .8或 1 .6mT磁场作用 2 3h ,再与TPA共同作用 1h时CFIRR的Md 分别为 3 .32、2 .85% /min ,与TPA组比较 ,差异无显著性 (H =2 .589,P >0 .0 5)。结论　 0～ 1 .6mT的 50Hz磁场单独作用不能抑制星形胶质细胞GJIC功能 ;协同TPA ,不能增强TPA对星形胶质细胞GJIC的抑制作用 ;但是磁场对星形胶质细胞GJIC的抑制作用随着磁场强度增强呈递增趋势     

脉部磁场对细胞缝隙连接通讯功能影响的研究

本文用细胞内微注射法对不同强度的脉冲磁场对细胞缝隙连接通讯（GJIC）功能的效应进行了研究,并与正弦磁场的作用以及脉冲磁场所感生的不同电场的作用进行了比较和探索。研究发现0.41mT以上强度的脉冲磁场具有抑制GJIC的作用。这种作用与磁场强度有关,其抑制GJIC的效庆比正弦磁场为强。经相同磁场不同强度感应电场作用的比较。得出,GJIC的抑制主要由磁场引起,而与感应电场关系不大,本文首次从研究对GJIC的作用提供了脉冲磁场治疗的创伤愈合等有关理论依据。     

电磁环境污染造成的眼部损伤

随着社会的发展,人类生活的电磁环境也发生巨大改变,尤其是电子设备的广泛应用,电磁波与人类的关系越来越密切,电磁环境污染也逐渐被人们所重视.眼是人体最为精密复杂又相对脆弱的器官之一,由于其各部分组织结构特点不同,在各频段电磁波辐射下发生的生物学效应各有差异,其中角膜、晶状体和视网膜等是电磁辐射作用较为敏感的靶组织,会分别发生角膜内皮细胞变性、晶状体混浊、视网膜的小动脉和毛细血管功能障碍等.本文介绍了不同种类的电磁环境污染对眼各组织造成的损伤及其机制.     

移动电话射频电磁场对大鼠神经细胞微管结合蛋白2基因表达的影响

目的了解1．8 GHz移动电话射频电磁场(RF EMF)对大鼠神经细胞基因表达的影响,筛选射频电磁场反应基因。方法体外原代培养新生SD大鼠皮层和海马神经细胞至第13天,将细胞随机分为实验组(辐照组)和对照组(假辐照组)。实验组使用217 HZ调制的1．8 GHz射频电磁场,SAR为2 W/kg,间断辐照24 h(5 min开/10 min关)；对照组置于同样的波导腔中,但不输入射频信号,进行假辐照。辐照后即刻抽提两组细胞的总RNA,然后用Rat Neurobiology U34 array基因芯片进行基因转录水平分析,找到可能的RF EMF反应候选基因。利用核糖核酸酶保护分析(RPA)法对功能相对明确、表达丰度和表达相对比值较高的变化基因进行验证。结果在Rat Neurobiology U34 array 1 200个候选基因中,筛选出34个差异表达基因,从中确定上调基因微管结合蛋白2(microtubule associated protein 2,Map2)为候选基因,经RPA方法验证,差异有统计学意义(P＜0．05)。结论Map2作为神经细胞特有的骨架蛋白,它的表达和功能的调控对于神经细胞维持正常细胞骨架和功能十分重要。1．8 GHz射频辐照可以引起大鼠神经细胞Map2基因表达上调。     

极低频磁场抑制细胞间隙连接通讯的分子机制

目的研究极低频(ELF)磁场抑制细胞间隙连接通讯(GJIC)的分子机制.方法MH3T3小鼠成纤维细胞受50Hz、0.8mTELF(24h)、12-氧-14-酰佛波13酯(TPA,2h)或ELF加TPA的作用后,用Northern和Western印迹法检测连接蛋白(Cx43)的基因转录水平及其磷酸化状态.结果各处理组的Cx43基因转录水平与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05).Cx43的非磷酸化条带在正常组为107.33±27.42(以样本Cx43基因条带的特异吸光度值与相对应的GAPDH吸光度值之比来表示),与ELF处理组(64.69±27.88)、TPA处理组(45.54±20.59)和ELF+TPA处理组(39.96±11.93)比较,差异有显著或极显著性(P＜0.05、P＜0.01),在各处理组间则差异无显著性(P＞0.05).各处理组均出现了过磷酸化的P3条带.结论ELF和(或)TPA不影响Cx43基因的转录;ELF和(或)TPA抑制GJIC的主要机制是Cx43蛋白的过磷酸化.     

1．8GHz射频电磁场对大鼠神经元基因表达谱的影响

目的了解1．8GHz移动电话射频电磁场（RFEMF）对大鼠神经细胞基因表达谱的影响,筛选射频电磁场反应基因。方法将原代培养的大鼠神经细随机分为实验组（辐照组）和对照组（假辐照组）,经1．8GHz射频电磁场,SAR为2W·kg^-1,间断辐照24h（5min开／10min关）后,即刻抽提两组细胞的总RNA,用Affymetrix公司的Rat Neumbiology U34array基因芯片筛选其差异表达基因,寻找可能的RFEMF反应候选基因。结果在1200个候选基因中,筛选出34个差异表达基因,其中上调基因24个,下调基因10个。差异表达基因与多种细胞功能相关（细脆骨架、信号通路、细胞代谢等）。这些基因的变化均小于2倍,但具有统计学意义（P〈0．01）。结论1．8GHz射频辐射影响大鼠神经元多个基因的表达,某些基因的改变提示射频辐射对神经元可能产生不良影响。