miR-26b通过调节Notch1信号通路参与原发性肝细胞肝癌侵袭的机制研究

目的:探讨miR-26b参与原发性肝细胞肝癌（HCC）侵袭的机制。方法:在细胞培养液中培养人肝细胞系HL-7702和HCC细胞各系Hepb-3、HuH-7、MHCC97-L、MHCC97-H。实时荧光定量PCR法（qRT-PCR）检测miR-26b的表达水平；用miR-26b mimics、miR-26b inhibitors和Notch1-siRNA分别转染HCC细胞；MTT实验检测转染后HCC细胞的活力；采用Western blot检测Notch1受体蛋白表达水平的变化；Transwell小室测定不同处理后的HCC细胞的侵袭能力。结果:人正常肝细胞系HL-7702和HCC细胞系Hepb-3、HuH-7、MHCC97-L、MHCC97-H中的miR-26b相对表达含量随其侵袭和迁移能力的升高而依次下降；抑制miR-26b的表达，Notch1受体蛋白表达明显增高，而此时HCC细胞的侵袭性显著增强；相反，上调miR-26b的表达，Notch1受体蛋白表达明显降低，而HCC细胞侵袭性显著下降；miR-26b可能通过调控Notch1信号通路调节HCC细胞侵袭性。结论:miR-26b通过负调控Notch1信号通路抑制HCC细胞侵袭能力，为HCC侵袭的机制奠定了理论基础，miR-26b可能成为HCC治疗的新靶点。     

双刺激活化的PBMC和胃泌素拮抗剂合用对结肠癌细胞作用的研究

目的研究胃泌素受体拈抗剂和CD28／CpG ODN活化PBMC在体外对结肠癌细胞株SW480杀伤作用机理。方法用含共刺激活化PBMC或（和）C1-988（胃泌素受体拈抗剂）的100mL／L胎牛血清的RPM1 1640培养基培养细胞，测生长曲线；MTY法检测活化细胞的体外淋巴细胞毒作用，并用电镜观察效应细胞杀伤的结肠癌细胞超微结构及用流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡指数。结果胃泌素拮受体抗剂本身对SW480细胞有一定的杀伤作用（P＜0．05），CD28／CpG ODN共刺激活化PBMC在体外对结肠癌细胞株SW480杀伤作用明显（P＜0．01），胃泌素受体拮抗剂与CD28／CpG ODN共刺激活化PBMC合用，对SW480 CEA的杀伤作用显著大于胃泌素受体拮抗剂本身对SW480细胞杀伤作用（P＜0．01），亦大于单独应用CD28／CpG ODN共刺激活化PBMC对SW480细胞的杀伤作用（P＜0．05），胃泌素受体拮抗剂增加了SW480细胞对共刺激活化PBMC的敏感性。电镜结果显示，效应细胞作用24小时肿瘤细胞就部分发生坏死，部分肿瘤细胞可见凋亡。流式细胞仪检测效应细胞SW480 CEA细胞72小时明显凋亡。结论胃泌素受体拮抗剂与共刺激活化PBMC联合应用，提高了CD28／CpG ODN共刺激活化PBMC对结肠癌细胞SW480的靶向性杀伤作用。活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞是通过坏死及凋亡实现的。     

经腹肛拖出式直肠癌切除术治疗早、中期低位直肠癌21例分析

目的 探讨早、中期低位直肠癌保留肛门括约肌功能的理想手术方式。方法 采用经腹肛拖出式直肠癌切除术治疗早、中期低位直肠癌21例。结果 全组无手术死亡，术后1例发生肛门外拉出肠管部分坏死。骶前感染1例，无肠回缩、吻合口瘘。平均随访 28（6-50）个月，无局部复发。术后18个月发现肝脏转移灶1例，现仍无癌生存20例，吻合口狭窄2例。本组术后2周拉出肠段修整后排便次数较多。1月后控制大便能力明显改善。大便3-5次/d,3月后大便基本正常。1-2次/d。结论 在严格掌握手术适应证的条件下，经腹肛拖出式直肠癌切除术可作为治疗早、中期低位直肠癌并保留肛门功能的一种可靠术式。     

特发性收缩性肠系膜炎1例

1病例报告 男,52岁,农民.因车祸后腹部间歇性疼痛不适15 d入院.患者15 d前驾驶卡车时发生事故,致上腹部被方向盘相撞,渐出现腹部疼痛不适,为间歇性,疼痛不剧烈,无恶心呕吐,无发热,伴腹胀,肛门停止排气排便.查体:T 37℃,P 80次/min,BP14/8kPa,R 20次/min.精神差,贫血貌,皮肤无黄染,浅表淋巴结无肿大,心肺无异常,右腹略膨隆,皮下有瘀血斑,右腹及右下腹可见2处手术疤痕,右中腹可触及一包块约15 crm×12 cm,有压痛,界限清楚,不易推动,肝脾肋缘下未触及,无移动性浊音,肠鸣音活跃,于包块上可闻肠鸣音.     

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目的 探讨术后急性胆囊炎的病因、诊断方法和治疗。方法 回顾性分析9例术后急性胆囊炎的临床资料并复习文献。结果 B超确诊为术后急性胆囊炎者7例。CT确诊1例，1例因胆囊穿孔而死亡，急性胆囊切除术病例无死亡。结论 胆汁淤积是引起卢术后急性胆囊炎的主要病因，早期确诊、及时治疗是降低病死率的关键。     

人源噬菌体Fab抗体库构建过程中引物的优化和初步鉴定

目的 优化设计一套引物，扩增全套人抗体Fd片段和L链基因，改善扩增效率，益于人源噬菌体抗体库的构建。方法 根据V-BASE数据库提供的人抗体可变区胚系基因，在其家族分类基础上，根据FR1区5’端保守序列重新分组，设计特异性的5’端扩增引物。同时对设计引物的匹配情况进行分析，并应用PCR扩增和测序反应对其扩增效果进行鉴定。结果 Fd链5’端扩增引物有5条，κ轻链有6条5’端扩增引物，而λ轻链5’和3’扩增引物有10条。分析表明，人抗体可变区胚系基因与5’引物有较好的匹配率，数目较少，匹配率较高。PCR结果显示，全部的重链及轻链引物对均能高效扩增出特异性较高的目的片段。测序结果表明PCR扩增产物具有较好的亚类和可变区家族分布。结论 优化了一套扩增全套人抗体Fd片段和L基因的引物，为人源噬菌体抗体库的构建奠定了良好的基础。     

经胆道镜钬激光碎石治疗肝内胆管难取性结石

目的：探讨经胆道镜结合钬激光治疗肝内难取性结石的方法和安全性。方法：回顾性总结12例肝内胆管难取性结石的锹激光治疗资料。结果：结石最大者1.6cm，最小者0.8cm，经1-2次激光碎石治疗，全部治愈，未出现明显并发症。结论：钬激光碎石术是目前治疗肝内胆管难取性结石的一种安全，有效的理想新技术。     

海风藤酮对重症急性胰腺炎大鼠腹腔器官血流的干预效应

背景:海风藤酮具有显著的抗氧化作用和钙离子拮抗样效应,能有效清除氧自由基,抑制钙离子内流,还能降低胰腺酶活性,减轻胰腺组织自我消化。目的:研究海风藤酮对重症急性胰腺炎大鼠腹腔器官血流,特别是胰腺血流的影响及其作用机制。设计:对比观察的动物实验。单位:解放军第四军医大学唐都医院普外科实验室和中心实验室。材料:选用Sprague-Dawiey(SD)雄性大鼠40只,清洁级,体质量200～280g。海风藤酮(共150mg)(北京大学药学院,批号:20050347);牛磺胆酸钠(Sigma公司,批号:86339);淀粉酶试剂(Roche公司,批号:irp170505)按说明书用。Imexlab9100多普勒超声诊断仪(美国Imex公司);多普勒超声诊断仪专用的8mHz探头(产品号X1-M008)(美国Imex公司)。方法:实验于2006-04/10在解放军第四军医大学唐都医院普外科实验室完成。应用随机数字表法选取8只大鼠作为假手术组,其余大鼠禁食12h后制作重症急性胰腺炎模型。造模后的重症急性胰腺炎大鼠采用随机数字表法分为2组:海风藤酮组(n=16)和模型组(n=16),两组又分别分为术后12和24h2个时间点进行观察,每个时间点8只。假手术组大鼠不进行任何手术操作。海风藤酮组大鼠术后3h经空肠造瘘管给药,剂量为海风藤酮10mg/kg,1次/6h,1～2次。配置时,药物溶于25g/L二甲基亚砜中,即刻应用。模型组大鼠经空肠造瘘管给予等量的二甲基亚砜。假手术组动物仅作开腹手术。假手术组于术后12h,模型组和海风藤酮组分别于重症急性胰腺炎术后12,24h测定血淀粉,同时运用多普勒超声测定胰腺局部动脉(相当于胰头、体交界处)、门静脉血流、脾动脉及肠系膜上动脉血流。主要观察指标:各组不同时间血浆淀粉酶和血流量变化情况。结果:纳入SD大鼠40只全部进入结果分析。①血浆淀粉酶测定结果:模型组和海风藤酮组血浆淀粉酶在各时点与假手术组相比均明显升高(P<0.01);模型组随时间延长,血浆淀粉酶继续升高,与术后12h比较,差异明显(P<0.05)。②胰腺局部动脉血流情况:在术后12和24h时,海风藤酮组和模型组胰腺局部动脉血流量明显低于假手术组(P<0.01);在海风藤酮组,随胰腺炎病程进展,胰腺局部血流量进一步下降(P<0.05),但各时点局部动脉血流量明显高于模型组(P<0.01)。③肠系膜上动脉根部、门静脉及脾动脉血流情况:海风藤酮组和模型组在术后12和24h时肠系膜上动脉血流量明显低于假手术组(P<0.01)。海风藤酮组各时点血流量与模型组比较,明显升高(P<0.01)。结论:海风藤酮能促使重症急性胰腺炎大鼠胰腺血流量增加,减轻胰腺的病理损害。