利用统计学方法消除检验延误对大鼠致癌试验凝血指标的干扰

目的利用析因分析、偏相关和多元回归分析判断与消除检验延误(时间因素)对大鼠致癌试验凝血指标的干扰。方法对照、低、中、高剂量4个实验组共168只Wistar雌性大鼠致癌试验期满后(104周)以磁珠法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)。采用析因分析方法并结合偏相关和多元回归分析对采血后3~24 h内完成检测的数据进行分析。结果析因分析显示,APTT分别受时间和剂量的独立影响,TT受时间影响并与染毒剂量存在交互作用,PT亦受时间影响。偏相关和多元回归分析显示,APTT、TT分别与时间有相关性,并入选APTT、TT的回归模型;PT与时间无相关性,亦无法建立回归模型,由此判断因检验延误延长了APTT和TT,产生干扰的时间节点为5 h。剔除问题数据后对照、低、中、高4个实验组APTT均值分别下降了1.85%、4.56%、20.08%和30.45%,TT分别下降了4.01%、6.78%、11.76%和16.64%。结论联合使用析因分析、偏相关和多元回归分析可识别和消除检验延误对大鼠致癌试验凝血指标APTT和TT的干扰。     

保健食品耐缺氧功能体外评价方法建立

目的将小鼠大脑皮质神经元的缺糖/缺氧模型用于耐缺氧保健食品的体外评价。方法采用血清药理学方法制备含牛磺酸复合制剂的小鼠血清,观察其对缺糖缺氧损伤神经元的乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及细胞生存率的影响,并与小鼠急性脑缺血性缺氧实验结果比较。结果中、高剂量含牛磺酸复合制剂小鼠血清组LDH活力分别为(5.97±0.85)、(5.68±1.55)U/(g.prot),低于空白血清对照组的(8.27±1.54)U/(g.prot)(P<0.05);低、中、高剂量含牛磺酸复合制剂小鼠血清组SOD活力分别为(6.83±0.65)、(6.95±0.68)、(7.55±0.82)U/(mg.prot),高于空白血清对照组的(5.57±0.89)U/(mg.prot),细胞生存率分别为90.06%、89.04%、91.92%,高于空白血清对照组的75.74%(P<0.05);牛磺酸复合制剂低、中、高剂量组小鼠急性脑缺血性缺氧存活时间分别为17.3、19.5、18.2 s,比纯水对照组的15.5 s长(P<0.05)。结论含有某保健食品的小鼠血清对神经元缺糖/缺氧损伤具有保护作用;小鼠大脑皮质神经元的缺糖/缺...     

阿胶口服液对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响

目的:研究阿胶口服液对小鼠的细胞免疫和体液免疫的影响,探讨和分析阿胶口服液对小鼠免疫功能的调节作用.方法:采用小鼠迟发型变态反应试验、小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)、小鼠血清溶血素滴度测定(血凝法)和小鼠脾细胞抗体生成试验.观察2.5、5.0和15.0 ml/kg BW剂量的阿胶口服液对小鼠的细胞免疫和体液免疫的影响.结果:通过小鼠迟发型变态反应试验和小鼠脾淋巴细胞转化试验观察到2.5、5.0和15.0 ml/kg BW剂量的阿胶口服液能增强小鼠迟发犁变态反应和促进小鼠脾淋巴细胞转化增殖;通过小鼠血清溶血素滴度测定和小鼠脾细胞抗体生成试验观察到同等剂量的阿胶口服液能增加小鼠血清溶血素滴度水平和促进小鼠脾细胞抗体生成.结论:本研究条件下我们观察到阿胶口服液能够提高小鼠的细胞免疫和体液免疫功能,对小鼠的免疫功能有正向调节作用.     

盐酸聚六亚甲基胍消毒洗手液的亚急性毒性研究

目的对0．3％盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）的消毒洗手液进行了哺乳动物的亚急性毒性试验，以研究消毒剂多次接触对实验动物的蓄积毒性作用及其靶器官，并为亚慢性、慢性毒性或致癌试验的剂量设计提供依据。方法试验依据卫生部的《消毒技术规范》（第2002版）消毒产品毒理实验规范，选用SPF级的sD大鼠，进行大鼠急性经口毒性LD50试验、亚急性毒性试验。结果大鼠急性经口毒性试验ID50〉5000mg/kg·BW，属实际无毒级；亚急性毒性试验，一般生理体征无异常，对大鼠生长曲线无明显影响，血常规指标无异常，生化指标无异常，脏体系数无异常，脏器组织病理学检查未发现异常。结论0．3％盐酸聚六亚甲基胍消毒洗手液为实际无毒级，亚急性试验各指标无异常。     

灵芝孢子油增强小鼠免疫功能及护肝作用的实验研究

[目的]探讨灵芝孢子油对小鼠免疫功能的影响及对肝脏的保护作用。[方法](1)免疫功能实验:昆明种小鼠经口连续分别给予0.17、0.33、1.00 g/kg BW的灵芝孢子油及粟米油(溶剂对照组)30 d,进行迟发型变态反应试验、淋巴细胞转化试验、NK细胞活性测定;(2)护肝作用实验:昆明种小鼠经口连续分别给予0.17、0.33、1.00g/kg BW的灵芝孢子油及粟米油(溶剂对照)30 d后,腹腔注射CCl4以诱发小鼠化学性肝损伤,测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)及观察肝脏病理组织学变化。[结果](1)免疫功能实验:与空白对照组比较,中、高剂量组迟发型变态反应能力,脾淋巴细胞转化能力及脾NK细胞活性均增强,差异有统计学意义(P﹤0.05);(2)护肝功能实验:与CCl4对照组比较,各剂量组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝脏病理组织学变化均减轻,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]灵芝孢子油对小鼠细胞免疫功能和NK细胞活性有明显的促进作用,对CCl4诱导的化学性肝损伤具有辅助保护作用。     

奶蓟益肝片对四氯化碳肝损伤保护作用效果观察

目的探讨奶蓟益肝片对四氯化碳（CCl4）肝损伤的保护作用。方法将46只动物随机分成阴性对照组、CCl4对照组及0.13、0.25g/kg两个剂量组,剂量组每天灌胃给予奶蓟益肝片。30d后,CCl4对照组及剂量组以0.01ml/g的剂量一次性经腹腔注射给予0.125?l4。24h后处死动物,测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平,肝脏进行病理组织学检查。结果0.25g/kg剂量组的ALT、AST水平降低,与CCl4对照组比较,差异有显著性（P〈0.05）。0.25g/kg剂量组发生肝细胞坏死的动物例数减少,病变程度减轻,肝细胞坏死评分降低,与CCl4对照组比较,差异亦有显著性（P〈0.05）。结论奶蓟益肝片对CCl4化学性肝损伤具有保护作用。     

SD大鼠麻醉后生化指标变化

目的观察SD大鼠麻醉后生化指标的变化。方法50只2月龄SPF级SD种大鼠，雄性28只，雌性22只，每鼠空腹16h，分别在麻醉后0、5、10和20min采血，检测血清ALT、AST、GLU、BUN、TP、ALB、AKP、CREA、CHOL、TG。结果随麻醉时间的延长，SD大鼠的生化指标有不同程度的变化。结论规范麻醉采血操作，缩短SD大鼠麻醉后等待采血的时间可减少生化指标的波动。     

ROS指标在保健食品抗氧化功能检测中的应用及灵敏性比较

目的：将ROS指标应用于保健食品抗氧化功能检测中，并进行敏感性比较。方法：SPF级昆明种雄性小鼠，12月龄，按体重随机分为老龄组对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组（分别为0．08g／kgBW、0．17g／kgBW、0．50g／kgBW），每组10只动物。连续灌胃给予受试物42d后，断头处死动物，取肝脏。以胶原酶和胰蛋白酶联合酶解肝组织，制备肝组织单细胞悬液；以流式细胞术测定肝细胞ROS水平；同时制备肝组织匀浆，以分光光度法测定肝细胞MBA含量及SOD、GSH—Px活性。结果：流式仪直方图分析显示，随着受试物给予剂量的增加，各剂量组肝细胞ROS水平均明显降低（P〈0．05）；低、高剂量组肝细胞内MDA含量明显减少（P〈0．05），中、高剂量组GSH—Px活性明显增加（P〈0．05），高剂量组,SOD活性亦明显增加（P〈0．05）；其余剂量组各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：大豆异黄酮通过降低肝细胞自由基水平而起到抗氧化作用，以FCM检测肝细胞ROS水平可更好地对保健食品的抗氧化功能进行筛选与评价。     

守宫木细胞与遗传毒性实验研究

目的：以体外试验研究野生蔬菜守宫木的细胞毒性和遗传毒性。方法：生（Ⅰ）和煮熟（Ⅱ）的守宫木匀浆液分别以40000、20000、10000、5000、2500、1250μg／ml浓度对CHL细胞染毒，每一浓度分别在24、48和72h时间点以中性红摄入方法对守宫木的细胞毒性进行评定；体外染色体畸变试验则以同样的浓度分别以生和煮熟的守宫木匀浆液染毒2h后，收获细胞制备中期相，对染色体结构畸变进行分析。结果：中性红摄入细胞毒性试验：在生的与煮熟的守宫木匀浆液细胞毒性剂量效应关系分析中，低剂量组随着染毒浓度加大细胞毒性增强，而在较高剂量组则出现随染毒浓度加大细胞毒性减弱，20000和40000μg／ml剂量组出现细胞的增殖现象；时间效应分析中有和剂量效应分析相似的现象，即在低剂量组随着染毒时间的延长细胞毒性增强，而从10000μg/ml剂量组开始随着染度时间的延长细胞毒性减弱并出现细胞的增殖现象；对生的与煮熟的守宫木细胞毒性进行比较分析，仅在染毒24h的20000μg／ml剂量组发现煮熟的守宫木匀浆液的细胞毒性有统计学意义（P〈0．05）地高于生的守宫木匀浆液。体外染色体畸变试验结果阴性。结论：守宫木在一定浓度范围内对细胞溶酶体和高尔基体有一定的损伤作用，未观察到守宫木对细胞的遗传物质染色体有损害作用，未发现不同的食用习惯对守宫木的毒性有影响。     

TaqMan探针检测转基因大豆含量方法的建立及应用

目的建立TaqMan探针法检测转基因大豆含量的实时定量PCR方法并应用于市售转基因食品含量的检测。方法以0、0．1％、0．5％、2．0％、5．0％的转基因大豆RoundUp Ready^TM为标准品（Fluka公司），以特异TaqMan探针序列：5’（FAM）-cccactatcettcgcaagaccct-3’（TAMRA），引物序列F：5’-tgatgtgatatctccactgacg-3’，R：5’-tgtatcccttgagceatgttgt-3’，用实时荧光定量PCR方法扩增转基因大豆外源基因CP4EPSPS基因，在实验室建立定量转基因大豆检测的标准曲线，并对市场抽检的豆奶粉、素鸡、热狗肠、黄豆等12种豆类食品及制品进行含量分析。结果在实验室建立了TaqMan探针实时荧光定量PCR检测转基因大豆含量的方法，得到0值对转基因食品百分含量对数值的标准曲线方程式为Y=-2．8194X＋27．1855，相关系数值R^2为0．9994。12种市售大豆及制品中五香茶干、豆奶粉、素鸡、热狗肠、薄白叶检测出转基因成分含量分别为2．46％、6．26％、13．95％、0．48％、0．66％，其余7份样品为阴性。结论建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR法能够快速地进行转基因大豆含量的检测，并可应用于市售转基因食品的检测。